This study was planned to estimate the activity of bovine circulating blood lymphocytes using phytohemagglutinin-M(PHA) known as T cell mitogen. Bovine circulating blood mononuclear cells(MNCs) was separated, and cultured with or without macrophage($PHA^+/M{\phi}^+$ or $PHA^+/M{\phi}^-$) in conditioned medium which stimulated with various concentration of PHA(0, 5, 10, 15 and $20{\mu}g/ml$ in medium), and then investigated the blastogenic response and rosette formation of lymphocytes. Blastogenic rate(BR) was especially increased in PHA concentration(10 and $15{\mu}g/ml$) of $PHA^+/M{\phi}^+$ group and their BR were $41.5{\pm}6.8%$ and $44.4{\pm}8.9%$, respectively and BR in PHA concentration(15 and $20{\mu}g/ml$) of $PHA^+/M{\phi}^-$ group was $32.8{\pm}6.2%$ and $31.4{\pm}4.6%$, respectively. BR of lymphocytes was more increased in $PHA^+/M{\phi}^+$ than $PHA^+/M{\phi}^-$ group when these cells were stimulated by PHA. Rosette forming rate(RFR) of lymphocytes to SRBC highly increased when SRBC was treated with AET and/or dextran, respectively. On the orther hand, RFR significantly increased more in $PHA^+/M{\phi}^+$ and $PHA^+/M{\phi}^-$ group than in control group, but when compared with two groups, statistical significancy was recognized only in PHA concentration($15{\mu}g/ml$, p<0.026) of $PHA^+/M{\phi}^+$ group.
In this study, effect of levamisole, selenium and tocopherol on the lymphocyte blastogenesis and antibody production in Korean native goat were evaluated in vitro and in vivo. Lymphocyte blastogenesis of goat blood increased significantly (p<0.01 and p<0.05) when the cells were treated in vitro with levamisole at the concentration of $50{\sim}500{\mu}g/ml$, with selenium at the concentration of $0.062{\sim}1.0{\mu}g$ and with tocopherol nt the concentration on $12.5{\mu}g$. Increased lymphocyte blastogenesis was detected from 2 to 24 hours after oral administration of levamisole (2.5mg/kg of body weight). After 7 days, increased mitogenic response of lymphocytes was not detected. Meanwhile increased blastogenesis of lymphocyte from goats given the selenium-tocopherol mixture (selenium $100{\mu}g$-tocopherol 200IU/head/day) was detected from 10 days after feeding, and the tendency continued throughout the entire experimental period. When immune responses of goats against PPD were subjected to test by ELISA, the mean IgG titers of levamisolc group (1 : 1,800) and selenium-tocopherol group (1 : 960) were higher than that of control group (1 : 600) at 2 weeks after lst inoculation. At 3 weeks after lst inoculation and 1 week after 2nd inoculation, the significant (p<0.05) differences in IgG titers were detected among the three groups. The mean IgG titers of levamisole group, selenium-tocopherol group and control at that time were 1 : 20,480, 1 : 5,120 and 1 : 2,640, respectively. The IgG production of levamisole group was significantly (p<0.01) higher than that of control group.
The present study was carried out to investigate the optimal conditions on blastogenesis of guinea pig lymphocytes. A microculture system in conjuction with a semiautomatic multiple sample harvester was used to study the in vitro optimal condition of guinea pig lymphocytes. Careful analysis of lymphocyte transformation to concanavalin A (Con A) and lipopolysaccharide (LPS) mitogen determined optimal conditions as: (a) 10% fetal bovine serum in RPMI-1640 medium (b) 48-hour culture period.
To investigate the influence of age and dietary fat level on the immune function and the growing potential of the fibroblast cells, male rats of 2 month, 6 month and 30 month of age were fed either 6% or 30% fat diet for 16 weeks. The weight of thymus decreased linearly with increasing age. And this age-dependent degeneration of thymus was delayed in rats fed low fat diets. The blastogenesis of spleen lymphocytes to PHA, ConA, and PWM was decreased with increasing age, however, no effect of dietary fat level was observed. The age-related decline in ratios of PHA/ConA response may suggest that T suppressor cell activity increases with age. In cell culture system, lung fibroblast cells from 30M rats showed lower plating efficiency. longer doubling time. and shorter cumulative doubling potential than those from 2M or 6M animals. Also. the morphology of fibroblasts from 30M rats was tended to be rouned rather than flattened and more variable in size and being generally larger. wherease those from 2M and 6M rats were uniform in size and adhered tightly to the culture vessel in ordered arrays. Therefore fibroblast cell culture system tried in this study reflects the changes of cellular aging.
To investigate the effects of T-2 toxin on the blastogenesis of lymphocytes, pathology, hemogram and blood chemistry in the goat, the korean native goats were treated orally with T-2 toxin for 21 days with a dosage of 0.6mg per kg body weight. The results were as follows: 1. The total count of leukocytes and lymphocytes decreased significantly from 14 to 21 days after treatment. 2. Mryeloid: erythroid ratios increased significantly on days 12 after treatment. 3. Delayed-type hypersensitivity skin reactions to tuberculin were reduced predominantly. 4. T-2 toxin induced prolonged prothrombin time. 5. Mitogenic responses of lymphocytes to both lipopolysaccharide and phytohemagglutinin were significantly depressed on days 7 and 14 after treatment. 6. Treatment of T-2 toxin caused marked depletion of lymphocytes in the thymus, mesenteric lymph node, peyer's patchs and spleen.
Immunosuppressive effects of reticuloendotheliosis virus (REV) infection in chickens were investigated. Primary antibody responses to Newcastle disease virus (strain B1) and sheep red blood cells were significantly low in chickens inoculated with the local isolate 89-74 of REV compared to those of uninfected chickens. In chickens infected with REV strain T or 89-74, blastogenesis of spleen cells and peripheral blood lymphocytes (PBL) to concanavalin A (Con A) was severely suppressed. When specific pathogen free (SPF) chickens were inoculated with the isolate, the suppressive effect was observed up to 7 weeks of age while, in the contact infected chickens, the suppression was absent. Similar suppressive effects were observed in chickens inoculated with REV strain T at 2, 3 and 4 weeks of age. When spleen cells or PBL from uninfected chickens were co-cultured with spleen cells or PBL from chickens infected with REV at 1 day-old or 2 week-old, the blastogenesis of the normal cells was suppressed. The suppressive effect of PBL from REV-infected chickens on normal lymphocytes was abrogated by the treatment with trypsin. However the suppressive activity of the REV-infected PBL was not influenced at removing machrophage from the cell suspension by incubation in plastic petri dishes. In addition to the immunosuppression, chickens infected with the REV isolate showed abnormal feather development (nakanuke), anemia, paralysis and retarded growth. Three out of 11 chickens inoculated with the isolate at day-old died between 6 and 9 weeks of age by bacterial infections.
The present study has been carried out to investigate the optimal condition on the blastogenesis of guinea pig lymphocytes. A microculture system in conjunction with a semiautomatic multiple sample harvester(SAMSH) was used to study the in vito optimal condition of guinea pig lymphocytes. Data were presented to show many variables that are Involved in studying the responses of guinea pig lymphocyte in a microculture system to the stimulation of Concanavalin A(Con A) and lipopolysaccharide (LPS). Analysis indicated that the conditions for optimal Con A as measured by incorporation of $^3H$-TdR include : (1) use of RPMI-1640 as culture medium, (2) use of $6{\mu}g$ of Con A, per culture, (3) use of $1{\times}10^6$ cells per culture. Conditions for optimal stimulation with LPS mitogen were similar to those used for Con A.
The present study has been carried out to investigate the optimal condition on lymphocyte blastogenesis of rabbit lymphocytes, whole blood culture and microculture system in conjunction with a semiautomatic multiple sample harvester(SAMSH) was used to study the In vitro optimal condition of rabbit lymphocytes. Data were presented to show many variables that are involved in studying the phytohemagglutinin(PHA) and lipopolysaccharide(LPS) response of rabbit lymphocyte in a microculture system. Analysis indicated that the conditions for optimal PHA as measured by incorporation of $^3H$-TdR include: (1) use of RPMI-1640 as culture medium. (2) use of $6{\mu}g$ of PHA, per culture. (3) 48-hours culture period. Conditions for optimal stimulation with LPS mitogen were similar to those used for PHA.
We Previously reported that Polysaccharide Isolated from panax ginseng C. A. Meyer, stimulates murine splenocytes to proliferate and to be cytotoxic against a wide range of tumor cells in MHC non-restricted manner:) Therefore, we examined the cytokine mRNA expression induced by the ginseng polysaccharide in this paper. This study demonstrates that the ginseng polysaccharide stimulates Thl type cytosine expression such as IL-2 and IFNY, and macrophage type cytokine expression such as IL-lc and GM-CSF in a dose-dependent manner at different time: IL-2 mRNA was induced at 30 min, IL-la, GM-CSF mRNA at 3 hr, IFNY at 6 hr after the ginseng polysaccharide treatment. In contrast with these, Th2 type cytokine expression such as IL-4 and IL-5 was not induced. The generation of the ginseng polysaccharide-activated killer cells which was induced at the optimal doses of 50 pEyml was neutralized in the presence of anti-lL-2, anti-lFNy, anti-IL-l ${\alpha}$ antibodies, showing the importance of these cytokines produced by the ginseng polysaccharide. In flow cytometry analysis, the blastogenesis of IgM+ cells was induced on day 3 and the number of Thy 1.21 cells, CD4+ and CD8+ cells was increased on day 5. The ginseng polysaccharide also induced blastogenesis of T cells. In conclusion, the ginseng polysaccharide may have considerable antitumor immunotherapeutic modality by stimulating the cytokine production from Thl cells and macrophage and by proliferating lymphocytes.
폐흡충(Paragonimus westermani) 피낭유충을 마우스에 감염시킨 후 in vitro상에서 비장 림프구에 폐흡충 항원, phytohemagglutinin(PHA) 및 혈청 첨가시 림프구 아세포화 반응을 관찰하였다. PHA로 자극시킨 감염 마우스의 비장 림프구는 비감염군에 비해 감염 1 주 후에 평균 53.6%의 유의한 증식 억제를 관찰하였고, 폐흡충 성충항원으로 자극시킨 경우 감염 마우스의 비장 림프구의 증식은 감염 1 주 후부터 6 주까지 비감염군에 비해 중가되었으며 특히 감염 1 주와 4 주 후에는 각각 평균 200.9% 및 280.2%의 유의한 수준으로 증가되었다. 또한 피낭유충 항원으로 감염 마우스의 비장 림프구를 자극시에도 비감염군의 림프구의 증식에 비해 전반적으로 증가되었으며 특히 감염 4 주 째에는 평균 180.5%의 유의한 수준으로 증가하였다. 폐홉충에 감염된 마우스의 감염 4 주 째 혈청을 PHA로 자극시킨 비감염 마우스 비장 림프구에 첨가하였을 때 유의한 수준의 증식의 억제를 관찰하였다. 이러한 결과들로 보아 폐흡충 감염 마우스에서 림프구가 세포 매개성 면역에 관여하며 감염 혈청이 PHA에 대한 T 림프구의 증식을 억제함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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