Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Injinchunggan-tang (Yinchenchinggan-tang) on DMN-induced liver damage by applying proteomics. Materials and Methods : Sprague-Dawley rats were used in this experiment and were divided into the normal group (normal saline), the control group (DMN) and the sample group (DMN+IJCGT). DMN was injected i.p. once a day three times a week for 3 weeks in the control group. Normal saline instead of DMN was administered to the normal group. In the sample group, Injinchunggan-tang (Yinchenchinggan-tang) extract was orally administered once a day for 10 days after DMN was induced. The livers of each group were processed and analyzed by histology, Western blot, $Oxyblot^{TM}$, CBB and 2-dimensional electrophoresis. Results : In the histological findings of the liver, IJCGT reduced collagen deposition and liver damage in DMN-induced hepatic fibrosis. IJCGT increased MMP-13 protein production assessed by western blot. Protein oxidation induced by DMN treatment was decreased by IJCGT. In the 2-dimensional electrophoresis finding, the level of the increased proteins induced by DMN treatment such as GRP 75, 58kDa glucose regulated protein and heat shock 70kDa protein 5 were decreased by IJCGT. IJCGT was considered to have the protective effects on hepatotoxicity induced by DMN. In the 2-dimensional electrophoresis finding, the level of increased oxidized proteins such as heat shock 70 protein, mitochondrial malonyltransferase, calreticulin precursor, actin, NADP-isocitrate dehydrogenase, ankyrin repeat and SOCS box protein 11 were decreased by IJCGT. IJCGT was considered to have protective effect on the protein production induced by DMN treatment. Conclusion : Injinchunggan-tang (Yinchenchinggan-tang) exerts an inhibitory effect against the fibrosis and protein oxidation induced by DMN treatment in the rat liver. IJCGT was considered to have protective effects on the hepatotoxicity and protein production induced by DMN treatment.
간흡충에 감염되었을 때 나타나는 조직병리학적 소견의 변화로는 담관 직경이 확장되고 담관벽이 비후되며, 담관 상피층에 선종성 증식과 배세포 화생이 관찰되었다. 치료 후에는 이러한 변화 중에서 화생이 소실되나 선종성 증식은 상당히 완화되어 잔존하고 담관벽의 비후는 지속된다. 이러한 형태학적인 변화는 선종성인 특징이 있어 어떠한 분비기능이 예상되었다. 이 연구에서는 특히 소장의 분비물이 담관 점막층에서 분비되는가를 확인하고자 하였다. 간흡충 피낭유충을 300개씩 8마리의 토끼에 감염시킨 후, 14주에 프라지관텔로 치료하여 구층 후 6개월 및 1년에 간을 적출하고, 파라핀 포매하여 절편을 만들어 분비물에 대하여 면역조직화학법을 시행하였다. Gastrln과 secretin은 정상토기의 간내 담관 및 감염된 담관에서 나타나지 않았다. Serotonin은 비감염 간 내 담관에서는 관찰되지 않았으나, 감염 대조군의 담관상퍼층에서 몇 개의 양성 세포가 관찰되었다. 그러나 치료 후 6개월에는 관찰되지 않았다. 또한 휜쥐에 100개씩 간흡충 피낭유충을 감염시키고 증식된 상피 층에서 소장 미소응모막 효소의 활성을 관찰한 바, alkalinephosphatase의 활성이 감염군에서 대조군과 같은 정도로 관찰되 었으나 sucrose, trehalase, lactate, leucine annnopeptidase의 활성은 나타나지 않았다. 이 결과를 통하여 간흡충 감염시에 증식된 담관상피에 소수의 serotonin 분비세포가 있음을 관찰하였고 다른 소장의 분비기능은 생기지 않음을 확인하였다. 이 serotonin을 포함한 세포는 비만세포로 추정된다.
In current study, we aimed to investigate whether the gentiopicroside (GPS) derived from Gentiana manshurica Kitagawa could block the progression of alcoholic hepatic steatosis to fibrosis induced by chronic ethanol intake. C57BL/6 mice were fed an ethanol-containing Lieber-DeCarli diet for 4 weeks. LX-2 human hepatic stellate cells were treated with GPS 1 h prior to transforming growth factor-β (TGF-β) stimulation, and murine hepatocyte AML12 cells were pretreated by GPS 1 h prior to ethanol treatment. GPS inhibited the expression of type I collagen (collagen I), α-smooth muscle actin (α-SMA) and tissue inhibitor of metal protease 1 in ethanol-fed mouse livers with mild fibrosis. In addition, the imbalanced lipid metabolism induced by chronic ethanol-feeding was ameliorated by GPS pretreatment, characterized by the modulation of lipid accumulation. Consistently, GPS inhibited the expression of collagen I and α-SMA in LX-2 cells stimulated by TGF-β. Inhibition of lipid synthesis and promotion of oxidation by GPS were also confirmed in ethanol-treated AML12 cells. GPS could prevent hepatic steatosis advancing to the inception of a mild fibrosis caused by chronic alcohol exposure, suggesting GPS might be a promising therapy for targeting the early stage of alcoholic liver disease.
본 연구는 50 mg/kg의 STZ로 유발된 당뇨쥐에서 단기간 운동과 capsaicin 섭취가 혈중지질, 항산화 효소 및 Akt량에 미치는 영향을 알아보고자 31마리의 흰쥐를 대상으로 실험 하였다. 운동 군과 운동과 capsaicin을 병행한 군에서는 당뇨 유발 일주일 후 부터 15 m/min, 0%의 경사도로 25분간 주5회 2주간 트레드밀 운동을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 혈중 지질 농도는 capsaicin 섭취와 운동을 병행한 군에서 TG는 유의하게 감소하였고, HDL-C는 다른 군에 비해 유의하게 높게 나타났고, ROS는 당뇨군을 제외한 모든 군에서 유의하게 감소하였다. CAT는 capsaicin만 섭취한 군에서 유의하게 증가하였고, SOD은 운동만 처치한 군과 capsaicin만 섭취한 군에서 유의하게 높았으며, GSH는 당뇨군을 제외한 모든 군에서 유의하게 높은 것으로 각각 나타났다. Akt효소는 capsaicin만 섭취한 군, p-Akt는 운동군에서 유의하게 증가하였다.
인삼 및 인삼 유래 물질들은 가장 대표적인 건강기능식품이며, 홍삼추출물(Panax ginseng C.A. Meyer)의 경우 항바이러스, 알레르기 감소, 항산화, 비만억제 등의 효과를 나타낸다고 알려져 있다. 대표적 건강기능식품임에도 불구하고 약물상호작용을 일으키는 대사효소(Cytochrome P450, CYP)에 대한 홍삼추출물의 영향은 보고되지 않았다. 본 연구에서는 사람의 간 마이크로좀 분획과 마우스 모델을 기반으로 홍삼엑기스의 약물대사 조절능을 평가하였다. 사람의 간 마이크로좀에서는 CYP2B6에 대한 미약한 억제 효과를 나타내었을 뿐, 타 대사효소 CYP1A2, 2B6, 2C19, 2D6와 3A에 대한 억제효과는 검출되지 않았다. 홍삼엑기스를 마우스에 50, 250, or 500 mg/kg의 농도로 3, 7, 14일간 하루 1회 경구 투여 후 간을 적출하여 대사효소의 활성 변화를 측정하였지만, 유의적인 변화는 관찰되지 않았다. 결과적으로 홍삼엑기스의 유의적인 약물대사효소에 대한 활성 조절능이 없는 것으로 판단되고, 홍삼엑기스 복용에 따른 홍삼-약물상호작용의 가능성은 없을 것으로 추정된다.
This study was carried out to evaluate the effects of all-trans retinoic acid(RA) on the development of cholangiocarcinoma in hamsters. Eighty six female Syrian golden hamsters were divided into four groups. Group I was for the induction of the cholangiocarcinoma, which was infected orally with C sinensis and given dimethylnitrosamine(DMN, 15ppm) in drinking water for 4 weeks. Group II was for evaluating the effect of all-trans RA treatment on the cholangiocarcinogenesis, which was treated the same as group I and orally given RA(1mg/kg, 5 times per week) for 15 weeks. Group III was given only RA hr 15 weeks. Control group IV was given only soybean oil which was solvent for RA treatment. More than 5 heads of hamsters in each group were sacrificed at 4, 7, 11 and 15 weeks after the begining of the experiment. The livers were examined grossly, histopathologically, and immunohistochemically. The results obtained were as follows : 1. Death of animals started from the 11 weeks after the begining of the experiment. One of the total 22 animals(5%) and 7 of the total 24 animals(29%) died in group I and group II, respectively. 2. Proliferation of oval cell was peaked at 11 weeks in group I and at 7 weeks in group II, and decreased gradually after those periods of the time. 3. Cholangiocarcinomas were found in 1 of 6 animals(17%) at 11 weeks and in 4 of 6 animals(67%) at 15 weeks in group I, respectively. But in group II, the cholangiocarcinomas occured in 1 of 5 animals(20%) at 7 weeks, in 7 of 12 animals(58%) at 11 weeks and in 2 of the rest animals(100%) at 15 weeks, respectively. 4. Expression of $\alpha$-fetoprotein(AFP) of the oval cells in the group II showed the same degree of positive reaction at that of group I at 4 weeks. But AFP postive oval cells decreased gradually and AFP negative oval cells(ductlike oval cells) increased gradually. 5. Expression of cytokeratin of the oval cells in group II was shown slightly at 4 weeks and the degree of expression increased moderately from the 7 weeks. But the expression of the oval cells in group I was shown slightly after the 7 weeks. These results suggested that all-trans RA promoted the occurrence and the rate of cholangiocarcinoma by inducing differentiation of small cells and oval cells in the liver of hamsters infected with C sinensis and treated with DMN.
본 연구는 Pb중독이 rat의 생리현상에 미치는 영향을 구명 하고자 연속적 인 Pb acetate 투여가 사료와 물섭취량, 증체량, 혈액치 및 장기내 무기물 수준의 변동을 측정하였다. 1. Pb acetate 1,000, 2,000 및 4,000 ppm/kg을 rat에 투여했을 때 사료섭취량은 정상대조군에 비해 점차 감소하는 경향을 나타냈고 용량이 증가할수록 사료섭 취 량은 유의 한 감소를 나타냈다. 2. Pb acetate 1,000, 2,000 및 4,000 ppm/kg을 rat에 투여했을 때 음수량은 정상대조군에 비해 점차 감소하는 경향을 나타냈고 Pb 용량이 증가할수록 음수량은 감소하였다. 3. Pb acetate 1,000, 2,000 및 4,000 ppm/kg을 rat에 투여했을 때 증체량은 정상대조군에 비해 약간 감소된 수준을 나타냈으나 Pb용량이 증가할수록 증체량은 점차 감소하였다. 4. Pb acetate 1,000, 2,000 및 4,000 ppm/kg을 rat에 투여했을 때 혈액치중 RBC, WBC 및 PLT치는 정상대조군에 비해 유의한 증가를 나타냈고, Hb량과 PCV치는 정상대조군에 비해 약간 감소를 나타냈다. 5. Pb acetate 2,000 및 4,000 ppm/kg을 rat에 투여했을 때 간내 Pb, Mn, Fe, Pb 및 Zn의 잔류함량은 정상대조군에 유의한 증가를 나타냈다. Pb 2,000 및 4,000 ppm/kg을 rat에 투여했을 때 신장내 Pb, Mn, Fe, Pb, Zn의 함량은 정상대주군에 비해 증가를 나타냈다.
Mast cells (MCs) have been implicated in the pathogenesis of tissue fibrosis. However, the role of MC in the development of liver fibrosis has not been fully elucidated. Stem cell factor (SCF) is known to recruit MCs to the liver following injury as it induces mast cell proliferation, survival and differentiation from resident tissue precursors. This study examines the interaction between activated hepatic stellate cells (HSCs) and MCs in rat fibrotic liver, and SCF production by HSCs during culture in vitro. Rats were studied 4, 7, 14 and 21 days after bile duct ligation (BDL). Fibrogenesis was assessed by a measurement of collagen stained with sirius red F3B. Activated HSCs and MCs were identified by ${\alpha}$-smooth muscle actin (${\alpha}-SMA$) immunohistochemical and alcian blue staining and measured by a computerized image analysis system. SCF production was determined in rat HSC cultures using Western blotting. Mild fibrotic changes were noted in BDL rat livers as early as 4 days after induction of cholestasis. Significant expansion and organization of fibrous tissue has occurred in day 14 BDL rats which progressed to bridging fibrosis by day 21. In BDL rats, both a large number of activated HSCs and MCs were detected in portal tracts and fibrous septa. Both area of activated HSCs infiltration and density of MCs were significantly higher in all BDL group compared with Shams. In BDL rats, both areas of activated HSCs infiltration and density of MCs were no significant difference between day 4 and 7 and were significantly higher in day 14. However, the areas of activated HSCs infiltration were significantly lesser in day 21 and the densities of MCs were significantly higher in day 21 compared with day14 BDL. In BDL rats, both areas of activated HSCs infiltration and density of MCs were highly correlated with areas of fibrosis. Western blotting showed that SCF protein was consistently produced in activated HSCs by culture on plastic and freshly isolated HSCs expressed relatively little 30kD SCF compared to late primary culture activated HSCs (day 14) and passaged HSCs. These results suggest that HSCs activated in vitro produce SCF, and may play an important role in recruiting mast cells to the liver during injury and fibrosis.
[ $CdCl_2$ ]이 간에 미치는 독성에 관한 Squalene의 효과를 알아보기 위하여 30 mg 내외의 웅성 ICR계 mouse에 체중 kg당 5.0 mg의 $CdCl_2$와 체중 kg당 180.0 mg의 SQ를 복강투여하여 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7일째에 절취한 간조직을 SOD 활성도와 투과전자현미경법을 이용하여 관찰한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 간조직에서 SOD 활성도는 Group A가 정상군에 비해 증가를 보였고, Group B는 Group A에 비해 약간의 감소를 나타내었다. 조직학적 관찰에서 Group A의 핵은 불규칙한 모양이 관찰되었고, 미토콘드리아의 내강 팽대와 cristae 파괴가 나타났으며, 조면소포체의 수조 팽대가 관찰되었다. Group B의 핵은 원형을 나타내었으며 미토콘드리아는 약간 팽대되었지만 정상적인 형태를 보였고, 조면소포체의 전형적인 층판구조가 관찰되었다. 이상의 결과를 종합하면 SQ 처치가 SOD 활성을 감소시키고 mouse 간세포에 미치는 카드뮴의 독성을 감소시켜 간세포의 회복에 효과가 있는 것으로 사료된다.
향신성 식용유는 에너지원이나 대사조절물질로서뿐 아니라 식품의 맛이나 향 또는 포만감을 결정하는 지방이다. 본 연구는 0.12% 콜레스테롤 식이를 한 흰쥐에서 대두유를 대조로 하여 향신성 식용유(고추종실유, 산초유)에 의한 지질농도의 조절효과를 평가하였다. 사료중 n-6/n-3 지방산의 비는 8.8:1.2:70.1 (대두유:산초유:고추종실유)로 큰 차이가 있었다. 혈청콜레스테롤 농도는 고추종실유 섭취군에서 다른 군보다 높았으나, HDL-cholesterol/totalcholesterol 비는 고추종실유 섭취군에서 낮았다. 혈청중성지질 농도는 다른 군에 비하여 산초유 섭취군에서 낮았다. 반면에 간장 콜레스테롤 농도는 고추종실유 섭취군보다 산초유 섭취군에서 높았다. 이러한 응답은 식이지방에 의한 혈청 콜레스테롤 농도의 응답은 조직간 콜레스테롤 분배의 차이에 기인되는 듯하다. 결론적으로 본 연구는 콜레스테롤 함유식이를 한 흰쥐에서 고추종실유는 대두유에 비하여 콜레스테롤상승효과를 보여준 반면, 산초유는 중간적 효과를 보여주었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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