본 연구에서는 유도비만 쥐에서 발효 서목태의 항산화 효과를 연구하기 위하여 체중 175 g의 SD계 암컷 흰쥐 24마리를 대상으로 정상 군, 고지방식이 군, 발효 서목태 엑기스 급여 군, 발효 서목태 음료 급여 군으로 분류하여 54일간 사육하였다. in vitro 항산화 활성에서는 발효 서목태 엑기스가 높은 활성 및 함량을 나타냈다. in vivo 항산화 활성에서는 발효 서목태 섭취 군이 고지방식이 대조 군에 비해 CAT, SOD 활성은 높은 활성을 보였으며, MDA량은 감소 현상을 보였다. 이와 같은 결과를 통해 발효 서목태가 항산화 효소의 증가로 활성산소의 제거능을 향상시킬 뿐만 아니라, 생체 내 대사과정에서 생성된 과산화물로부터 생체 조직을 보호하여 손상된 간조직의 기능을 회복시킨 것으로 사료된다.
In this study, bovine Dnmt1 cDNA was sequenced and detected Dnmt1 mRNA level in bovine tissues by northern blot, methylation pattern of genome by southern blot, specific localization of Dnmt1 in mouse and bovine preimplantation embryos by immunocytostaining and Dnmt1 protein level in ovary and testis by western blot. Bovine Dnmt1 cDNA sequence showed more homology with that of human than mouse and rat. The RNA level of Dnmt1 was 10 times higher expression in placenta than other tissues. This indicates that placenta was hypermethylated compared to others organs. The genomic DNA could not be cut by a specific restriction enzyme (HpaII) in placenta, lung and liver of bovine. It suggests that Dnmt1 in some somatic cells was already methylated. Dnmt1, which has the antibody epitope 1316~1616, was distributed in nucleus and cytoplasm including the stage of pronuclear stage and maturation of oocyte and gradually weaken to blastocyst stage compare to negative. In addition, Dnmt1 was strongly expressed in tetraploid embryo and cloned 8-cell than IVF 8-cell. An aberrant pattern of DNA methylation in cloned embryo may be abnormal development of fetus, embryonic lethality and placenta dysfunction. The somatic specific band (190kDa) was appeared in ovary and testis, but oocyte specific band (175kDa) was not. Further investigations are necessary to understand the complex links between the methyltransferases and the transcriptional activity of genes in the cloned bovine tissues.
Kim, Joo-Hee;Park, Ju-Yeon;Hong, So-Young;Kim, Mi-Kyung
Nutrition Research and Practice
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제3권3호
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pp.200-207
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2009
This study examined the effects of com gluten (CG) and its hydrolysate consumptions on weight reduction in rats fed a high-fat diet. Eight-month-old male Sprague-Dawley rats (n=40) were fed a high-fat diet (40% calorie as fat) for 4 weeks. They were then randomly divided into four groups and fed the isocaloric diets with different protein sources for 8 weeks. The protein sources were casein (control group), intact CG (CG group), CG hydrolysate A (CGHA group, 30% of protein as peptides and 70% as free amino acids) and CG hydrolysate P (CGHP group, 93% of protein as peptides and 7% as free amino acids). Body weight gain, adipose tissue weights, nitrogen balance, absorptions of energy, protein and fat, lipid profiles in plasma, liver and feces and hepatic activities of camitine palmitoyl transferase (CPT), fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) were assessed. The CGHA diet had the highest amount of BCAAs, especially leucine, and most of them existed as free amino acid forms. The CGHA group showed significant weight reduction and negative nitrogen balance. Protein absorption and apparent protein digestibility in the CGHA group were significantly lower than those in other groups. Adipose tissue weights were the lowest in the CGHA group. Activity of CPT tended to be higher in the CGHA group than in other groups and those of FAS, ME and G6PDH were significantly lower in the CGHA group than in other groups. In conclusion, the CGHA diet which had relatively high amounts of free amino acids and BCAAs, especially leucine, had a weight reduction effect by lowering adipose tissue weight and the activities of FAS, ME and G6PDH in experimental animals, but it seemed to be a negative result induced by lowering protein absorption, increasing urinary nitrogen excretion and protein catabolism.
Kim, Joo-Hee;Lee, Hyo-Jung;Kim, Ji-Yeon;Kim, Mi-Kyung;Kwon, O-Ran
Preventive Nutrition and Food Science
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제17권3호
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pp.223-227
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2012
This study examined the effects of corn gluten (CG), wheat gluten (WG), and soybean protein isolate (SPI), as well as their hydrolysates, on weight reduction in rats fed a high-fat diet. Eight-month-old male Sprague-Dawley rats (n=70) were fed a high-fat diet (40% of the calories were fat) for 4 weeks. Rats were then randomly divided into seven groups and were fed isocaloric diets with different protein sources for 8 weeks. The protein sources were casein (control group), intact CG (CG group), CG hydrolysate (CGH group), intact WG (WG group), WG hydrolysate (WGH group), intact SPI (SPI group), and SPI hydrolysate (SPIH group). Body weight gain, adipose tissue weights, lipid profiles in plasma and liver; and hepatic activities of carnitine palmitoyl transferase, fatty acid synthase (FAS), malic enzyme, and glucose-6-phosphate dehydrogenase were assessed. The CGH group showed significant weight reduction compared with the other groups. Epididymal fat pad and plasma triglycerides in the CGH group were the lowest and were significantly different than those in the control group. FAS activity in the CGH group was significantly lower than that in the other groups. In conclusion, the CGH diet of these experimental animals demonstrated a weight-reducing effect by lowering the adipose tissue weight and by affecting the activities of hepatic lipogenic enzymes.
Cytochrome P450 4A11 (CYP4A11) is a fatty acid hydroxylase enzyme expressed in human liver. It catalyzes not only the hydroxylation of saturated and unsaturated fatty acids, but the conversion of arachidonic acid to 20-hydroxyeicosatetraenoic acid (20-HETE), a regulator of blood pressure. In this study, we performed a directed evolution analysis of CYP4A11 using the luminogenic assay system. A random mutant library of CYP4A11, in which mutations were made throughout the entire coding region, was screened with luciferase activity to detect the demethylation of luciferin-4A (2-[6-methoxyquinolin-2-yl]-4,5-dihydrothiazole-4-carboxylic acid) of CYP4A11 mutants in Escherichia coli. Consecutive rounds of random mutagenesis and screening yielded three improved CYP4A11 mutants, CP2600 (A24T/T263A), CP2601 (T263A), and CP2616 (A24T/T263A/V430E) with ~3-fold increase in whole cells and >10-fold increase in purified proteins on the luminescence assay. However, the steady state kinetic analysis for lauric acid hydroxylation showed the significant reductions in enzymatic activities in all three mutants. A mutant, CP2600, showed a 51% decrease in catalytic efficiency ($k_{cat}/K_m$) for lauric acid hydroxylation mainly due to an increase in $K_m$. CP2601 and CP2616 showed much greater reductions (>75%) in the catalytic efficiency due to both a decrease in $k_{cat}$ and an increase in Km. These decreased catalytic activities of CP2601 and CP2616 can be partially attributed to the changes in substrate affinities. These results suggest that the enzymatic activities of CYP4A11 mutants selected from directed evolution using a luminogenic P450 substrate may not demonstrate a direct correlation with the hydroxylation activities of lauric acid.
The effects of ${\beta}$-glucosidase on the overall growth performance and a set of physiological parameters of broilers were investigated. 240 male, one-day old Avine broiler chickswere randomly allocated to four treatment groups and fed with a corn-soybean meal supplemented with 0% (control), 0.2%, 0.4% and 0.6% ${\beta}$-glucosidase. The 0.2% ${\beta}$-glucosidase group, but not the 0.4% and 0.6% ${\beta}$-glucosidase groups, showed a significantly increased average daily weight gain (p<0.05) over that of the control. All three ${\beta}$-glucosidase feed groups showed significantly higher feed conversion ratios than the control group (p<0.05). Feed supplementation of 0.2% ${\beta}$-glucosidase significantly raised the contents of serum isoflavone aglycones as shown by decreases of genistin and daizin (p<0.01) and an increase of daidzein (p<0.01). The 0.2% ${\beta}$-glucosidase feeding significantly increased the intestinal amylase activity while it had little effect on lipase and trypsin activities (p>0.05). 0.2% ${\beta}$-glucosidase feeding also significant elevated the levels of highdensity lipoprotein cholesterol and malate dehydrogenase while lowering the level of low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C). Finally, ${\beta}$-glucosidase improved the anti-oxidative activities of the animals; the 0.2% ${\beta}$-glucosidase feed group had higher activities of superoxide dismutase (p<0.05), glutathione peroxidase and glutathione reductase in the liver (p<0.05), and malondialdehyde level in the serum (p<0.05).
본 연구는 산겨릅나무의 식품학적 가치를 알아보고 기능성식품 소재로서의 이용.개발을 위하여 항산화 및 간 기능 보호효과를 탐색하였다. 항산화성 결과 가운데 총 폴리페놀은 EtOAc fr.에서 함량이 가장 많았고 BuOH fr., EtOH ex., $CHCl_3$ fr., hot water ex., aqueous fr. 순으로 높게 나타났다. 전자공여능은 EtOAc fr.과 BuOH fr.이 ascorbic acid와 유사한 전자공여능을 보였으며 SOD 유사활성능은 $250\;{\mu}g/mL$ 이하의 농도에서는 BuOH fr.이 가장 높게, 그 이상에서는 aqueous fr.에서 가장 높게 나타났다. LPS로 급성 간 손상을 유도한 마우스에서의 BuOH fr.의 간 기능 보호효과에서는 BuOH fr.을 전 처치한 다음 LPS를 투여한 군이 LPS만을 투여한 군보다 혈장 AST와 ALT의 활성은 유의하게 감소 되었으나 BUN의 농도는 유의성이 관찰되지 않았다. 간조직의 형태학적 관찰에서 BuOH fr.을 투여하고 LPS로 급성 간 손상을 유도한 군의 간세포는 염증과 괴사가 나타났지만 LPS군에 비하여 그 정도가 적은 것으로 나타났다.
Objectives : This study was carried out to evaluate analgesic effects of Zanthoxylum bungeanum Maxim (ZM) pharmacopuncture on formalin-induced pains in Sprague-Dawley (SD) rats and ICR-mice. Methods : The subjects were divided 8 weeks aged rats with constant pain sensitivity into five groups; normal (treated with normal saline at Taegye (KI3) and before injected with normal saline at hindpaw), Con-1 (treated with normal saline at KI3 before injected with formalin at hindpaw), Lido-1 (treated with lidocaine at KI3), ZMWG-1 (treated with Hot water extraction pharmacopuncture of Zanthoxylum bungeanum Maxim at KI3), ZMEG-1 (treated with ethanol extraction pharmacopuncture of Zanthoxylum bungeanum Maxim at KI3). After 35 minutes, we measured ultrasonic vocalization (USV) and enzyme activities of both Aspartate aminotransferase (AST), Alanine aminotransferase (ALT) in rat serum. In addition, Tail flick test is performed by injecting ICR mice at 5 weeks of age. And it classified into 4 groups (Con-2, Lido-2, ZMWG-2, ZMEG-2) according to the kind of drug (normal saline, lidocaine, ZMW, ZME). After each drug injection, we examined the reaction by placing the tail in water at $50^{\circ}C$. Results : ZME had analgesic effects in the early and late phase of USV during the formalin test. There were no significant differences between ZMEG-1 and Lido-1 in early and late phase of USV. Also, No significant differences observed in serum AST and ALT activity in ZMWG-1 and ZMEG-1 compared with Con-1. For tail-flick test, analgesic effect on warmth significantly increased in Lido-2 and ZMEG-2 compare to that of Con-2. Conclusion : ZME pharmacopuncture had analgesic effects on formalin-induced pain without liver toxicity. Also, tail-flick test suggest that ZME pharmacopuncture could be useful technique on analgesic effect on warmth and treatment of pains.
This study was designed to compare the effect of different dietary fats on plasma lipids, the degree of lipid peroxidation and the activity of antioxidant enzymes in RBC and liver rats treated with or wighout 1, 2-dimethylhydrazing (DMH). Male Sprague Dawley rats, at 7 weeks-old, were divided into control and DMH-treated grous, and each group was again subdivided into four were perilla oil (PO), blend fat (BF) containing ten different kinds of dietary oil, beef tallow (BT), corn oil (CO). At the same time, each rat was injected intramusculary with saline(for control) or DMH twice a week for 6 weeks to give total dose of 180 mg/kg body weight. Compared with BT feeding, BF reduced plasma total choesterol level and PO and Co reduced plasma TG levels (p<0.05). DMH injection decreased plasma cholesterol in all dietary groups. However, PO decreased tocopherol levels and increased TBARS levels in RBC compared to BT. The degree of hemolysis in PO group was higher than that of BT group (p<0.05 only in control group. Fatty acid composition of hepatic microsome was reflected by dietary fatty acid profile. The peroxidizability index and TBARS level in hepatic micorsome were significantly increased but tocopherol level was lowered in PO group compared to BT group. Activites of superoxide dismutase and glutathione peroxidase in RBC and hepatic cytosol were not influenced y dietary fats and DMH treatment(p<0.05). Overall, perilla oil rich in $\omega$3 $\alpha$-linolenic acid could be a very important dietary source in reducing plasma lipids and blend fat was also good dietary oil mixture in reducing plasma cholesterol. However, the degree of lipid peroxidation was greater in tissue by perilla oil feeding and it is very difficult to use only perilla oil as oil source for meal preparation, so that it could be suggested to use more perilla oil and fish to give an equal effect of blend fat in order to reduce the risk factors against cardiovascular disease.
The currently accepted model of membrane structure proposes a dynamic, asymmetric lipid matrix of phospholipids and cholesterol with globular proteins embedded across the membrane to various degrees. Most phospholipids are in the bilayer arrangement and also closely associated with integral membrane proteins or loosely associated with peripheral proteins. Biological functions of membrane, such as membrane-bound enzyme functions and transport systems, are influenced by the membrane physical properties, which are determined by fatty acid composition of phospholipids, polar head group composition and membrane cholesterol content. Polar and non-polar region of the phospholipid molecule can interact, with changes in the conformation of a membrane-associated protein altering either its catalytic activity or the protein's interaction with other membrane proteins. Mammalian dietary studies attempted to change the lipid composition of a few cell membranes have shown comparisons, using essential fatty acid-deficient diets. In recent years, Clandinin and a few other workers have pioneered the study proving the influence of dietary fat fed in a nutritionally complete diet on composition of phospholipid classes of cell membrane. Modulation caused by diet fat was rapid and reversible in phospholipid fatty acyl composition of membranes of cardiac mitochondria, liver cell, brain synaptosome and lymphocytes. These changes were at the same time, accompanied by variety of membrane associated functions controlled by membrane-bound enzymes, tranporter and receptor proteins. The findings suggest the basic concept of the necessity of dietary fatty acid balance if consistency of optimal membrane structural lipid composition is to be maintained, as well as the overall inadequacy of describing the nutritional-biochemical quality of a dietary fat solely by its content of linoleic acid. Furthermore, they give light on the possible application to clinical and preventive medicine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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