• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제36권1호
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• pp.45-53
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• 2009

목 적: 본 연구는 정상 정액을 배양액으로 세척한 후 $4^{\circ}C$, $22^{\circ}C$, $37^{\circ}C$에서 5일 동안 보존하면서 정자의 운동성, 생존성을 관찰하여 정자의 운동성과 수명 유지를 위한 적정 배양 환경을 분석하고자 하였다. 연구방법: 정액검사 시 정상으로 판정된 남성의 정자를 HTALP 배양액으로 세척하여 정자의 최종 농도 $1{\times}10^6/ml$로 각 5 ml을 배양온도 $4^{\circ}C$, $22^{\circ}C$, $37^{\circ}C$에서 5일 동안 배양하였다. 1일, 3일 5일째에 CASA에 의해 운동성을 측정하였고, HOST로 정자막의 온전성을 분석하였으며, CTC pattern으로 수정능획득 상태 분석하여 최적의 배양 환경을 분석하였다. 결 과: 정자의 운동성, 생존성 및 수정능획득이 야기되지 않은 정자는 배양일에 따라 유의하게 감소하였다 (p<0.05). 또한 정자 배양 후 1일에는 정자의 운동성, 생존성 및 정자막의 온전성과 CTC pattern은 온도에 따라 차이가 없었으나, 배양 후 3일과 5일에서는 $22^{\circ}C$에서 배양된 정자가 다른 배양온도에 비해 가장 잘 보존되었다 (p<0.05). 결 론: HTALP로 세척된 정자를 $22^{\circ}C$에서 보존 시 5일까지 정자의 운동성과 수명을 보조생식술에 적합한 수준으로 유지시킬 수 있는 최적 배양 환경으로 제시할 수 있다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권17호
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• pp.7363-7369
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• 2014

The present study aimed to prepare and evaluate polymeric micelles conjugated with folic acid through ${\alpha}$- or ${\gamma}$-carboxyl groups for antitumor efficacy. The isomeric block copolymers, ${\alpha}$- and ${\gamma}$-folate-polyethyleneglycol-distearoyl phosphatidylethanolamine (${\alpha}$- and ${\gamma}$-Fol-PEG-DSPE), were produced by solid phase peptide synthesis. Three types of doxorubicin (DOX)-loaded polymeric micelles (MPEG-DSPE-DOX and ${\alpha}$- / ${\gamma}$-Fol-PEG-DSPEDOX micelles) were prepared via the film formation method. Compared with MPEG-DSPE-DOX micelles, the ${\alpha}$- / ${\gamma}$-Fol-PEG-DSPE-DOX micelles presented a higher cellular uptake behavior in the live cell study. Cell viability percentages were 81.8%, 57.3%, 56.6% at 2 hours for MPEG-DSPE-DOX, ${\alpha}$- and ${\gamma}$-Fol-PEG-DSPE-DOX micelles, respectively (p<0.05). Using the KB xenograft tumor model, both ${\alpha}$- and ${\gamma}$-folate-conjugated micelles were found to have better antitumor effects with lower toxicity in comparison with MPEG-DSPE-DOX micelles. No difference in in vivo antitumor efficacy was found between ${\alpha}$- and ${\gamma}$-Fol-PEG-DSPE-DOX micelles. The folate-conjugated micelles might be a potentially useful strategy for tumor targeting of therapeutic agents, whether grafting with folic acid through ${\alpha}$- or ${\gamma}$-carboxyl groups.

• 한국수정란이식학회지
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• 제28권3호
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• pp.229-235
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• 2013

The objective of this study was to monitor health conditions of four genetically identical somatic cells cloned Labrador retriever puppies by estimation of body weight and analysis of hematologic and serologic characteristics. Naturally ovulated oocytes and donor cells were used for somatic cell nuclear transfer (SCNT). Donor cells and enucleated oocytes were followed by electric fusion, chemical activation and surgical embryo transfer into the oviducts of surrogate females. Two recipients became pregnant; two maintained pregnancy to term, and four live puppies were delivered by Caesarean section. The cloned Labrador retrievers were genetically identical to the nuclear donor dog. The body weight of clone-1, -2, -3, and -4 was increased from 0.66, 0.40, 0.39, and 0.37 kg at birth to 6.2, 6.6, 6.2, and 6.0 kg at 8 weeks of age, respectively. Although clone-4 had lower numbers of RBC than reference range, the most of RBC and WBC related heamatologic results of cloned puppies were not different when compared to reference range. In serological analysis, Glucose, ALP and inorganic phosphate level of four cloned puppies was significantly higher than the reference ranges. However, there was no significant difference among four cloned dogs. This study suggests that cloned puppies derived from SCNT did not have remarkable health problems, at least in the growth pattern and hematological and serological parameters.

• International Journal of Oral Biology
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• 제34권2호
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• pp.87-95
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• 2009

Porphyromonas gingivalis is a major etiologic agent of chronic periodontitis and cytokines produced by macrophages play important roles in the pathogenesis of periodontal diseases. In this study we investigated the cytokine response of phorbol myristate acetatedifferentiated THP-1 cells exposed to P. gingivalis. Compared with the prominent cell wall components of P. gingivalis (lipopolysaccharide and the major fimbrial protein FimA), live P. gingivalis stimulated much higher levels of cytokine production. In addition, whereas low multiplicity of infection challenges (MOI=10) of P. gingivalis 381 stimulated high levels of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-6 (IL-6), and IL-1${\beta}$, high dose challenges with this bacterium (MOI = 100) resulted in a substantially diminished production of MCP-1 and IL-6. Moreover, high MOI P. gingivalis challenges achieved only low levels of induction of MCP-1 and IL-6 mRNA. The decreased production of MCP-1 and IL-6 appeared to be mediated by P. gingivalis proteases, because high MOI challenges with congenic protease mutant strains of this microorganism (MT10 and MT10W) did not result in a diminished production of MCP-1 and IL-6. Similar to its protease mutant strains, leupeptin (a protease inhibitor)- treated P. gingivalis at high doses induced high levels of MCP-1 production. To examine the mechanisms underlying the diminished production of MCP-1 by P. gingivalis proteases, the activation of mitogen-activated protein (MAP) kinases and NF-${\kappa}$B was compared between the 381 and MT10W strains. Whilst high doses of both 381 and MT10W similarly activated the three members of the MAP kinase family, the DNA binding activity of NF-${\kappa}$B, as revealed by gel shift assays, was greatly increased only by MT10W. Taken together, our data indicate that P. gingivalis stimulates the production of high levels of TNF-${\alpha}$, IL-1${\beta}$, IL-6, and MCP-1 but that high dose challenges with this bacterium result in a diminished production of MCP-1 and IL-6 via the protease-mediated suppression of NF-${\kappa}$B activation in THP-1 macrophagic cells.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제28권1호
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• pp.65-70
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• 2000

에르고스테롤(ergosterol)은 고등균류 균사세포막의 중요한 구성 성분으로 이들의 특징 물질이고, 균의 생장에 중요한 기능을 한다. 그러므로 균사 배양체에서 이 물질의 함량을 분석함으로써 고체상 배지 속에 있는 곰팡이의 생채량을 추정할 수 있다. 표고균사의 액체 배양체와 톱밥 배양체를 가지고 에르고스테롤을 분석한 결과, 이 물질의 함량은 균사체의 중량과 직선적 상관관계가 있으면서(r=0.98), 배양기간, 균주, 배지내 수분함량에 따라 달라졌다. 액체배양체에서 에르고스테롤 농도는 10주간 배양된 것이 0.13%로 20주간 배양된 것의 0.1% 보다 높았다. 톱밥배양체에서 이 물질의 농도는 균주와 수분 함량에 따라 0.015~0.042% 범위였다. 표고균주 산림 4호 배양체에서 에르고스테롤 함량은 균주 목-H나 산림 6호의 것보다 건조배지 g당 $20{\sim}140{\mu}g$ 정도 높았다. 이 화확물질의 함량은 표고균사를 수분율이 125%나 175%인 배지에서 배양하였을때 건조배지 g당 $297{\sim}425{\mu}g$/g 였다. 이 양은 수분율이 125%나 225%인 배지에서의 함량, $148{\sim}286{\mu}g$/g 건조배지, 보다 높은 것이다. 에르고스테롤을 분석함으로써 톱밥이나 원목과 같은 고체배지내에 있는 표고 균사량의 추정이 가능하리라 생각한다.

• 미생물학회지
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• 제52권3호
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• pp.313-318
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• 2016

Viable but nonculturable (VBNC) 상태에 들어간 세균은 일반적인 증균 배지에서는 집락을 형성하지 않지만, 죽은 것이 아니라 낮은 대사활성상태로 유지되고 있다. 본 연구에서는 $10^{\circ}C$의 저온 빈영양 해수에서 Edwardsiella tarda를 VBNC 상태로 유도한 후, 해수 온도를 10에서 $25^{\circ}C$로 상승시킬 때 첨가된 유기물의 종류에 따라 VBNC 상태인 균의 소생 가능성을 알아보고자 하였다. E. tarda가 접종된 빈영양 해수 microcosm을 $10^{\circ}C$에 유지하였을 때 VBNC 유도 기간은 42-84일까지 다양하였다. 유도 기간 동안 acridine orange direct counting법으로 계수한 총 균수는 초기 접종 농도인 약 $10^8cells/ml$로 일정하였으며, direct viable counting법으로 계수한 생존 균수는 약 $10^4cells/ml$로 감소되었다. VBNC E. tarda에 효모추출물, 넙치근육추출물 그리고 혈청을 첨가하여 $25^{\circ}C$에서 소생을 유도한 결과 전체 시료 개수의 37%, 23%, 37%에서 각각 소생이 확인되었으며 소생된 E. tarda의 특성은 VBNC 유도 전 원래의 세균과 일치하였다. 소생된 E. tarda를 넙치(Paralichthys olivaceus)에 복강 주사 하였을 때 접종 후 5일 이내에 시험어가 모두 사망함으로써 VBNC 상태의 E. tarda가 독력을 유지하고 있었음을 시사하였다. 그러므로 E. tarda는 우리나라 남해 연안 겨울의 저온 빈영양 해수에서 VBNC 상태로 유도되었다가 여름과 가을 시기에 수온 상승과 더불어 소생되어 양식 넙치에 지속적인 발병 요인이 되고 있는 것으로 생각된다.

• 한국가축번식학회지
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• 제25권4호
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• pp.371-379
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• 2001

본 연구는 체외에서 생산된 소 수정란의 동결을 위한 최적치 조건을 규명할 목적으로 실시하였다. 동결을 위하여 체외에서 생산된 8 세포기, 상실배기 및 비반포기 단계의 수정란을 공시하여 EC 5.5 동결온액에 20초 동안 노출시키고, 각 용기에 장착한 후, 즉시 -196$^{\circ}C$ 액체질소에 침지하는 유리화동결법을 채택하였다. 그 후 0.5 M, 0.25 M 및 0.121 M sucrose 용액에서 각 1분간씩, 연속으로 응해 한 다음, 10 % FBS가 첨가된 CR Iaa 배양액으로 옮겨 배양하였다. 그 결과 수정란의 재팽창률과 완전부화율은 EM grid, OPS 및 Cryo-loop 등과 같은 동결용기에 의해 큰 차이를 보이지 않았다. 또 Hoechst 염색에 의해 조사한 동결융해 후 체외에서 발달된 완전팽창 배반포의 총세포수에 있어서도, 대조군 (180.0 $\pm$ 5.4)과 동결군 (178.0 $\pm$ 7.5) 사이에 차이가 없었고, 동결융해 후 세포의 손상을 이중염색법으로 조사한 생존세포와 사멸세포의 비율도 대조군 (176 : 4)과 동결군 (172 : 6) 사이에 유의차가 인정되지 않았다. 이러한 결과로 보아 소 수정란은 EG 5.5 동결용액과 EM grid, OPS 또는 Cryo-loop과 같은 동결용기에 의해 성공적으로 동결보존할 수 있는 것으로 판단된다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제30권1호
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• pp.111-120
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• 2000

Purpose We designed this study for the purpose of determining the relationship between periodontal disease activity and PLBW, using the evaluation of probing pocket depth, loss of attachment, gingival index, gingival crevicular fluid amount and subgingival microflora. Methods A total of 100 volunteer mothers(mean age 30.44) at the Department of Obstetrics and Gynecology Seoul National University Hospital were selected for this study.Pregnancy outcomes were categorized into cases and controls in two ways. our definition was based on the following; Group 1 : Any PLBW cases Vs. All NBW controls Group 2 : PLBW cases Vs. NBW controls A periodontal exam was performed on the Ramfjord( #16, 21, 24, 36, 41, 44) teeth and Clinical evaluation consisted of probing pocket depth, loss of attachment, gingival index and gingival crevicular fluid amount. Subgingival plaque samples were collected by three sterile #35 paper points. The total number of anaerobic colonies and aerobic bacteria were enumerated after incubation. Antisera to P. gingivalis, P. intermedia, A. actinomycetemcomitans were produced in white rabbits with live whole cells suspensions. The specific fluorescent bacteria obtained by immunofluorescence and total cell counts obtained by dark-field microscopy were counted on four fields. The percent of each specific microorganism in the total cell count was determined. Results Any PLBW and PLBW cases showed significantly greater probing depth and attachment loss than all NBW and NBW controls. Cases group had significantly increased anaerobic bacterial counts compared with control group and no differences in the other microbes. This study confirmed that periodontal disease is a statistically significant risk factor for PLBW by investigating clinical parameters and subgingival plaque analysis.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제16권6호
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• pp.4328-4334
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• 2015

본 연구는 선박평형수처리장치 성능을 평가하기 위한 일환으로 Evan blue, Aniline blue 그리고 CMFDA 염색방법을 활용하여 해양부유생물의 생사판별을 이해하고자 하였다. Evans blue와 Aniline blue의 염색은 죽은 생물을 파란색으로 염색하여 죽은 생물을 평가하는 방법이고, CMFDA의 방법은 살아있는 생물을 녹색으로 염색하여 평가한다. 현장 동 식물플랑크톤 군집을 대상으로 Evans blue와 Aniline blue의 방법을 적용한 결과, 죽은 생물을 90%이상 염색시키는 것으로 나타났다. 하지만, 살아있는 일부 식물플랑크톤의 군집에서도 파란색으로 염색 되어, 실제 선박평형수 처리장장치의 성능을 평가하기에는 일정의 한계성을 나타내었다. 한편, 살아있는 생물을 염색하는CMFDA방법을 적용한 결과, 현장의 부유생물의 70%의 염색효과를 보였다. CMFDA방법은 FDA방법과 유사하게 살아있는 생물을 녹색으로 염색하여 생물 생사판별이 가능하게 함으로, 두 가지 방법을 중복염색(double staining)하는 방법을 고안해 보다 높은 효율의 생사판별방법을 찾고자 노력하였다. 그 결과, 두 가지의 염색시약을 중복으로 염색한 실험군에서 95%이상의 높은 효율을 보였고. 이는 단일 염색한 실험군보다 상대적으로 높은 염색효율을 얻을 수 있었다. 따라서 CMFDA+ FDA를 중복염색한 평가법이 해양생물의 생사를 판별하는데 보다 높은 효율을 보였고, 선박평형수처리장치의 성능을 평가하는 방법으로 활용이 가능할 것으로 판단된다.

• 한국토양비료학회지
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• 제20권2호
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• pp.147-151
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• 1987

메탄발효폐액(醱酵廢液)의 시용(施用)이 목초(牧草)의 화학성분(化學成分), 가소화건물수량(可消化乾物收量) 및 에너지가치(價値)에 미치는 효과구명(效果究明)을 위하여 Orchardgrass, Tall fescue, Kentucky bluegrass 및 Ladino clover가 혼파(混播)된 초지(草地)에서 수행(遂行)된 시험결과(試驗結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 메탄발효폐액시용(醱酵廢液施用)으로 목초(牧草)의 조단백질(粗蛋白質) 및 조회분함량(粗灰分含量)은 증가(增加)되었으나 가용성무질소물(可溶性無窒素物)(N-free extracts)은 약간(若干)의 감소(減少)가 있었다. 조지방(粗脂肪) 및 조섬유함량(粗纖維含量)은 시비방법(施肥方法)에 따라 큰 차이(差異)를 나타내지 않았다. 2. 목초(牧草)의 NDF (Neutral Detergent Fiber) 및 ADF (Acid Detergent Fiber)는 폐액시용량(廢液施用量)이 증가(增加)됨에 따라 감소(減少)되는 경향(傾向)이었다. 폐액시용(廢液施用)으로 Cell-Wall Constituents 중(中) Cellulose가 감소(減少)된 반면(反面) Hemicellulose는 약간(若干)의 증가(增加)를 보였다. 3. 초지(草地)에 대한 폐액적량(廢液適量)은 42 MT/10a으로 이때의 가소화건물(可消化乾物)은 405.0 kg/10a을 생산(生産) 3요소표준시비(要素標準施肥) (233.8 kg)에 비해 현저(顯著)히 높았다. Starch value 및 Net energy lactaction 수량(收量)에서도 각각(各各) 291.3 KStE 보다 및 3450 MJ-NEL/10a를 생산(生産) 3요소표준시비(要素標準施肥) 보다 각각(各各) 70% 및 64%가 증가(增加)되었다.