Seo, Young-Mi;Park, Seung-Taeck;Rim, Yo-Sup;Chung, Ok-Bong;Jekal, Seung-Joo
대한임상검사과학회지
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제43권2호
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pp.75-81
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2011
To clarify the oxidative stress of reactive oxygen species (ROS) and the effect of Chrysanthemum morifolium L. (CM) flower extract on the cultured neuroglial cells (C6 glioma) damaged by ROS, cell adhesion effect was measured by colorimetric assay after cultured C6 glioma cells were treated with various concentrations of glucose oxidase (GO) for 5 hours. For the antioxidative effect of CM flower extract, cell adhesion activity (CAA), superoxide dismutase (SOD)-like activity and lactate dehydrogenase (LDH) activity were assessed against GO-induced cytotoxicity on same cultures. In this study, GO remarkably decreased CAA dose-dependently, and the $XTT_{90}$ and $XTT_{50}$ values were measured at 15 mU/mL and 50 mU/mL following the treatment of C6 glioma cells with 5~60 mU/mL of GO. The CM flower extract significantly increased cell adhesion activity damaged by GO-induced cytotoxicity, and it also showed the SOD-like activity and the decrease of LDH activity. From these results, it is suggested that GO was cytotoxic on cultured C6 glioma cells, and CM flower extract showed antioxidative effects as shown by the increased CAA, SOD-like activity and the decrease of LDH activity on GO-induced cytotoxicity on the same cultures.
[ $^{31}PNMR$ ] spectroscopy revealed the adenylate kinase-like activity and the phosphotransferase activity from $F_1-ATPase$ of Escherichia coli. Incubation of $F_1-ATPase$ with ADP in the presence of $Mg^{2+}$ shows the appearance of $^{31}P$ resonances from AMP and Pi, suggesting the generation of AMP and ATP by adenylate kinase-like activity and the subsequent hydrolysis to Pi. Incubation of $F_1-ATPase$ with ADP in the presence of methanol shows additional peak from methyl phosphate, suggesting phosphotransferase activity of $F_1-ATPase$. Both adenylate kinase-like activity and the phosphotransferase activity has not been reported from $F_1-ATPase$ from Escherichia coli. $^{31}P$ NMR proved that it could be a valuable tool for the investigation of phosphorous related enzyme.
In order to explore the anti-oxidization effect of oriental medicine and cereal medium(OCM) where Tricholoma matsutake mycelia were cultured, measurement of hot water extract and UMPM(extraction method using ultra sonic waves, micro waves, micro bubble) extract, the total polyphenol content of crude polysaccharide from each extract, SOD-like activity, electron donating ability(EDA), xanthine oxidase inhibitory activity, and tyrosinase inhibitory activity was conducted. The total polyphenol content of each extract was found to be 16.36% for hot water extract(HE) group and 15.73% for UMPM extract(UE) group and the amount of crude polysaccharide precipitated into ethanol of extracts was found to be 8.79% for UMPM ethanol extract(UEE) group and 6.48% for hot water ethanol extract(HEE) group. As a result of measurement of SOD-like activity by concentration of each extract, it was found to be 96.17% for UE group, 91.23% for HE group, 91.33% for UEE group, and 87.11% for HEE group at 20 mg/mL. In the case of EDA, it was found to be 47.55% for UE group, 44.93% for HE group, 25.38% for UEE group, and 18.36% for HEE group. And in the cases of the rates of xanthine oxidase inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity, as the concentration of each extract increased, the inhibition rate increased accordingly. As a result of comparison between hot water extract method and UMPM extract method using extracts obtained from oriental medicine compound medium where Tricholoma matsutake mycelia were cultured, all of the extracts were judged to have a high anti-oxidization effect. In particular, UMPM extracts were found to have higher polyphenol content, SOD-like activity, EDA, xanthine oxidase inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity compared to hot water extract method. In this regard, extracts obtained from OCM where Tricholoma matsutake mycelia were cultured are considered to have high availability as functional material when and if they are prepared using UMPM extract method.
Ginseng seeds were treated with different autoclaving temperatures and autoclaving times, and extracted with 80% methanol to measure changes in antioxidant activity. The antioxidant activity of ginseng seeds treated by autoclaving was measured by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity, 2,2'-aziono-bis(3-ethylbenzthiazoline)-6-sulfonic acid radical scavenging activity, superoxide dismutase SOD-like activity, ferric reducing antioxidant power (FRAP), and total phenolic compound content. As autoclaving temperature and time were increased, the L lightness value decreased and the redness value tended to increase. Total phenolic compound content was about three times higher in ginseng seeds treated with autoclaving at 130°C than in ginseng seeds that were not treated. DPPH radical scavenging activity and ABTS radical scavenging activity increased as autoclaving temperature and time were increased. In particular, when the concentration was 100 ppm, the ABTS radical scavenging activity was 91.80% in ginseng seeds treated by autoclaving at $130^{\circ}C$, which was the highest antioxidant activity. FRAP and SOD-like antioxidant activity tended to increase significantly as autoclaving temperature and time were increased.
Optimizing the conditions for stem cell culture is an essential prerequisite for the efficient utilization of stem cells. In the culture of fish embryonic stem cells (ESCs) or ESC-like cells, embryo extracts are important for stable growth, but there is no rule for determining the developmental stage of the embryos used to obtain extracts. Therefore, this study investigated the effects of the developmental stage of extract donor embryos on the culture of Oryzias dancena ESC-like cells. O. dancena ESC-like cells were cultured in different media containing each of four types of embryo extract depending on the developmental stage of the extract donor embryos. Growth, morphology, colony-forming ability, alkaline phosphatase (AP) activity, and embryoid body (EB) formation of the cells were investigated. While the developmental stage of the extract donor embryos did not influence the growth, morphology, AP activity, or EB formation of ESC-like cells, colony-forming ability was affected and the pattern of the effects differed completely between the two ESC-like cells investigated. These results suggest that the developmental stage of extract donor embryos should be selected carefully for the culture of ESC-like cells, according to the research purpose and type of cell line.
Previously, we have isolated authentic bombesin and another bombesin like peptide named bombesin like immunoreactivity (BLI)-K2 from the skin of Korean fire-bellied toad, Bombina orientalis. In the present study, we have newly purified three heterogeneous forms of BLI named BLI-K3, BLI-K4, and BLI-K5 from side fractions obtained in previous isolation of bombesin like peptide. The BLIs were separated into five peaks on a column of $C_{18}$ preparative HPLC. Among them, three minor peaks containing BLI-K3, K4, and K5 were purified by means of sequential chromatography on the columns of SP cation exchange HPLC and $C_{18}$ reverse phase HPLC. The purified BLI-K3 and K4 showed high binding affinity to an anti-bombesin serum (LBE 2G-2) with binding potency of 72 and 95%, respectively, relative to that of bombesin. However, they did not possess any distinctive biological activity of bombesin like peptide. On the contrary, the biological activity of BLI-K5 was similar to that of bombesin but its binding affinity to an anti-bombesin serum was low. The results indicate that three heterogeneous forms of BLI were coexpressed with bombesin and BLI-K2 in the skin of B. orientalis. All forms of the purified BLI in the present study were immunologically active but only BLI-K5 possessed the distinctive biological activity of bombesin like peptide.
Objectives : The Zanthoxylum pericarpium has been used as oriental spicy seasoning and a medicinal plant from old times. This study was performed to determine the anti-oxidant efficacy of Zanthoxylum pericarpium extract and the anti-microbial effects. Methods : We got Zanthoxylum pericarpium extract using PSE (pressurized solvent extraction) method. The anti-microbial effect of Zanthoxylum pericarpium extract was assessed on Streptococcus mutans(S. mutans) and anti-oxidant effect of the extract was assessed by measuring DPPH radical scavenging activity and SOD like activity. Results : 1. Zanthoxylum pericarpium extract had high anti-microbial activity on S. mutans. 2. DPPH radical scavenging activity significantly increased in the Zanthoxylum pericarpium extract. 3. SOD like activity also significantly increased in the Zanthoxylum pericarpium extract. Conclusions : The PSE extract from Zanthoxylum pericarpium has good anti-microbial and anti-oxidant effects in a concentration-dependent manner.
Depending on the degree of exocrine pancreatic insufficiency, there are inconsistent values in the serum trypsin-like immunoreactivity (TLI), hematology, and serology. To determine the correlation between those values and complete pancreatic insufficiency, 10 pancreatectomized dogs as the treated group and 10 sham operation dogs as control group were used. The entire treated group showed significant decrease in serum TLI level from 2.63$\pm$0.20 ng/ml (day 0) to 1.81$\pm$0.43 ng/ml at day 1 after the pancreatectomy (p<0.05) and the decline maintained till the end of the experiment. Blood glucose level gradually increased, but albumin level showed significant decrease (p<0.05) at day 1 and maintained the decline. Three clinical signs were observed such as depression, vomiting, and diarrhea. The entire treated group showed diarrhea throughout the experiment, but depression and vomiting were gradually diminished. The activity of serum alkaline phosphatase in the treated group increased till day 2 then decreased, on the other hand, control group showed continuous increase till day 4, and then decreased. Only experimental group showed the increased alanine aminotransferase activity at day 1. Serum lipase activity in the treated group jumped up at day 1 and then dropped down, which was even lower than the control. Regarding serum amlyase activity gradually decreased. According to these results, the assay of trypsin-like immunoreactivity showed the consistent result, so it suggests that TLI is an useful tool to determine the pancreatic exocrine function and possible diagnosis of exocrine pancreatic insufficiency compared to the simple assay of plasma amylase and lipase.
헛개나무의 추출물을 이용하여 alcohol과 acetaldehyde, fusel oil류 대한 분해효과를 검정한 결과 alcohol 분해 및 숙취해소에 효과가 높은 것으로 확인하였으며, 체내 독성물질 제거를 위한 GST activity를 측정한 결과 헛개나무 추출물이 GST 효소와 비교 시 약 2배 정도의 활성을 나타내었다. 또한 헛개나무 추출물의 간암세포의 성장에 미치는 효과를 알아본 결과 $1\;mg/m{\ell}$에서 간암세포의 성장을 억제하는 것을 확인하였다.
Park, Kwan Ho;Choi, Young Cheol;Nam, Sung Hee;Kim, Won Tae;Kim, A Young;Kim, Sin Young
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제25권2호
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pp.181-185
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2012
Chymotrypsin serine protease is one of the main digestive proteases in the midgut of and is involved in various essential processes. In a previous study, a gene encoding a chymotrypsin-like protease, Hi-SP1, was cloned from the larvae of Hermetia illucens and characterized. In this study, we produced the recombinant chymotrypsin-like protease Hi-SP1 in Escherichia coli cells. The molecular weight of the recombinant Hi-SP1 was estimated to be approximately 26 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and Western-blotting. Chymotrypsin activity was detected when AAPF was used as the substrate. Examination of the effects of temperature and pH revealed that the proteolytic activity of recombinant Hi-SP1 decreased markedly at temperatures above $30^{\circ}C$, and the optimum pH was found to be 10.0.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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