The role of NAA(1-Naphthaleneacetic acid) and BA(6-Benzyladenine) in the adventitious shoot regeneratlon from Populus leaf segments and changes in the pattern of RNA and protein synthesis were investigated. The adventitious shoot regeneration octured at the basal cut end of Populus leaf segments. This process was effected by many factors, including wounding culture conditions, light and plant growth regulators etc. The highest adventitious shoot regeneration frequency was obtained at $0.01mg/\ell$ NAA with $0.2mg/\ell$ BA. In this condition adventitious shoot starved to regenerate on the 13th day of oullure. The most optimal hormone composition for RNA and protein synthesis was $0.01mg/\ell$ NAA with $0.2mg/\ell$ BA. The content of RNA and protein was greater at the proximal part. In the course of adventitious shoot regeneration, the proteins associated with polar-regeneration appeared at the proximal part of populus leaf segment.
Rhodiola sachalinensis is one of the most popular oriental medicines in East Asia. It is a perennial herb, belonging to the family Crassulaceae, which is mainly distributed in mountains at the altitudes of 1700-2500 m in Baek-Du mountain. Cultivation of this species for the production of medicine materials is not easy in nature, because of restrict habitats. In vitro production of roots can be applicable for the production of medicinal materials. Here, we investigated the optimal conditions for induction and proliferation of adventitious roots in in vitro culture system. Leaf, stem and root segments from R. sachalinensis were cultured on Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with the various concentrations of IBA(Indole-3-butyric acid)(0.5, 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L) and sucrose(10, 30, 50, and 100 g/L). The optimal explant for adventitious root induction was leaf segment. Induction of adventitious roots was highest on MS medium supplemented with 5.0 mg/L IBA and sucrose 30 g/L. In liquid culture, fresh weight of adventitious roots was highest(15.65 g) on 1/3 strength MS liquid medium supplemented with 5.0 mg/L IBA with 30 g/L sucrose. These results revealed the first attempt for the production of adventitious roots in R. sachalinensis.
Calli were induced by culturing the leaf segment of Actinidia deliciosa ${\times}$ A. arguta clone 118 on MS medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA and 0.05 mg/L BA for 8 weeks in light condition. The induced calli were inoculated in liquid MS medium containing 0.5 mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA, 0.05 mg/L BA and 3% sucrose to establish cell suspension culture. The cells at the exponential stage and the stationary stage could be observed between 5-11 days and after that 12 days in culture, respectively. The fresh weight of callus induced from the suspended cells did not vary much among the media containing eight different combinations of plant growth regulators tested. The highest frequency of shoot induction (88.3%) was observed in MS medium containing 2.0 mg/L zeatin. Either BA or zeatin mixed with thidiazuron (TDZ) seemed to be effective in shoot induction. The induced shoots were transferred to MS medium containing 0.2 mg/L zeatin for further shoot growth. And then the shoots were transferred to Standardi (ST) medium containing 1.0 mg/L indolebutyric acid (IBA) for rooting. Plantlets could be obtained through cell suspension culture of Actinidia deliciosa ${\times}$ A. arguta clone 118.
Plant regeneration from the stem tissue of Houttuynia cordata Thunberg was investigated. The medium supplemented with the combination of 2, 4-D 1 mg/L and kinetin 0. 5 mg/L was the most effective for the embryogenic callus formation. The internode segment produced more callus formation than the leaf segment. ${\frac{1}{2}}\;MS$ medium was the most effective for the embryogenic callus formation. The medium supplemented with the 1% activated charcoal produced the whole plant directly without the callus formation from the nodes. The medium supplemented with the combination of NAA 0. 2 mg/L and BA 1 mg/L was the most effective for the plant regeneration from the embryogenic callus.
In order to product the saikosaponin which is one of the secondary product from Bupleurum falcatum efficiently through the tissue culture, several levels of agar and gellan gum as the gelling agent, 2,4-D as the growth regulator, and L-phenylalanine as the precursor were used with single or combination treatment on MS basal medium. Gellan gum was more effective than agar as the gelling agent in fresh and dry weight increase of callus induced from Bupleurum falcatum leaf segment. Gellan gum medium supplemented with L-phenylalanine produced 1.6 times of fresh weight more than that of agar. The fresh weight was remarkably high in gellan gum when the calli was treated with the combination of 2,4-D and L-phenylalanine similar to the single treatment of 2,4-D or L-phenylalanine. However, the saikosaponin content in callus was high in gellan gum with the single treatment of L-phenylalanine. Especially, the saikosaponin content in gellan gum supplemented with 1.0mg/L L-phenylalanine was 2 times(2.4 mg/g) higher than that in agar medium supplemented with 0.1 mg/L 2,4-D(0.9 mg/g).
The factors affecting direct somatic embryogenesis from different parts of explant in liquid culture of Scrophularia buergeriana were investigated. Direct somatic embryogenesis was dependent on the explant tissues and stem was the most efficient explant. Rapid shoot development occurred on stem after 3-week culture but roots were not developed yet. Plantlets were not formed through somatic embryogenesis after 3-week culture of petiole. Though direct somatic embryo was not observed from leaf segment culture for 3 weeks, normal plantlets were developed after 8-week culture. BA played the main role for somatic embryogenesis in liquid culture and adding of either IAA or NAA caused rather adverse effects. Culture of stem segments in MS liquid medium with BA at 0.5 mg/ l or 0.1 mg/ l was proved to be the most efficient method for producing plantlets through direct somatic embryos.
Aerenchyma development in rice (Oryza sativa L.) roots is quite important for adaptation to waterlogged or reduced soil conditions. Anatomical observations were carried out to clarify the development of schizogenous and lysigenous aerenchyma in elongating crown roots of rice. The crown roots of 3rd and 4th phytomer were taken from rice plants of the 8th leaf stage grown by hydroponic culture. The schizogenous intercellular spaces in the cortex of crown root tip were observed using a light microscope with semi ultra-thin sections and the lysigenous aerenchyma in mature tissue of crown root were observed using a cryo scanning electron microscope (cryo-SEM) with freezing fracture method. The schizogenous intercellular spaces in the root tip exist obviously in the middle portion of cortical cell layers close to the root-root cap junction, but not in root cap, stele and outer cell layers of cortex. The air spaces were formed at the junction of four neighbouring cells of inner cortex in the transverse sections, and between longitudinal cell layer connected along the root axis. Although many of those spaces were filled with liquid, some spaces seem to exist as air spaces. The lysigenous aerenchyma in the cortex, which hardly filled with liquid, emerged at 3-4 cm segment from the root tip and increased toward the basal region of root axis. The developing process of lysigenous aerenchyma was primarily separation of a radial row of cells caused by the shrinking and collapsing of cortical cells and then formation of septa along the radial cell rows by the fusion of cell wall with each other. These results suggest that the schizogenous and lysigenous aerenchyma playa role as a passage for the movement of oxygen into the root tip region where oxygen is required for respiration.
This study was carried out to research microorganisms having the antifungal activity against ginseng Alternaria blight pathogen Alternaria panax and ginseng anthracnose pathogen Colletotrichum gloeosporioides. Eleven Bacillus strains. were isolated from Korean traditional soybean paste and Kimchi. Among the 11 isolates, DJ5, KC1, KC2 and KC4 showing antagonistic activity on the mycelial growth of A. panax and C. gloeosporioides in pairing culture were finally selected as the antagonistic microorganisms. Based on 16s rRNA sequence and phylogenetic tree analysis, they were identified as Bacillus spp.. The selected microorganisms were investigated antagonistic activity by measured leaf-segment colonization in pot test. When Bacillus sp. were injected after A. panax treatment, KC1, KC2 and KC4 showed similar effect to chemical pesticides treated control. To measure preventive effect of Bacillus sp, antagonistic microorganisms were injected and C. gloeosporioides was treated in pot. When measuring the effectiveness for the prevention of Anthracnose, All Bacillus spp. showed approximately 83~90 % degree of superior preventive effect. In general, The four Bacillus spp. isolated from Korean traditional fermented foods showed therapeutic effect of Alternaria blight and preventive effect of Anthracnose.
Eun, Jong-Seon;Kim, Young-Seon;Park, Jong-Suk;JIN, Song Nan;CAO, Hounan
Journal of Plant Biotechnology
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v.29
no.3
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pp.179-183
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2002
This study was carried out to investigate the influence of medium composition for in vitro mass propagation of Lycoris squamigera Max. After the disks of short stems, segments of leaf within bulb and scale were cultured on MS basal medium supplemented with various plant growth regulators, they were examined for the extent of callus formation, shoot and root regeneration. In the culture of stem disks, adventitious shoots were regenerated from the basal tissue of bulb scales, and combined medium of 1.0 mg/L 2,4-D or NAA+2.0 mg/L BA or kinetin showed the the best response and 4∼6 shoots per explant formed. In the culture of leaf segments within bulbs, both MS medium supplemented with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ and with 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA were produced callus profusely on the base of leaf tissue and 3∼6 shoots were regenerated per explant. In the scale segments culture, calli were produced on the basal tissue on medium with 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA. The best result were shown on MS medium with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ, and 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA. Maximum number of regenerated shoots was up to 10∼12. Adventitious root formation from explants were formed profusely on MS medium with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L kinetin. The most desirable method for mass propagation of plantlets was the shoot regeneration from scale segments then subsequently subcultured on medium for rooting.
Leaf segments of tomato (Lycopersicum escullentum Mill) were cultured on the MS medium supplemented with the concentration of 0, 0.2, 0.5, 2.0 or $5.0mg/{\ell}$ NAA, 2,4-D and/or BA. The treatments were able to induced callus, however the best combinations for the induction of callus were $2.0mg/{\ell}$ BA and 2.0 or $0.5mg/{\ell}$ NAA. Shoot formation was stimulated at the treatment of 2.0 or $5.0mg/{\ell}$ BA, and root formation was stimulated on the medium of 0.2, 0.5, 2.0 or $5.0mg/{\ell}$ NAA plus 0, 0.2 or $0.5mg/{\ell}$ BA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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