• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제29권12호
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• pp.1969-1974
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• 2019

A Gram-staining-negative, aerobic, light brown pigment bacterium, designated strain CE80^T was isolated from marine sponge Callyspongia elegans in Jeju Island, Republic of Korea. Strain CE80^T grew optimally at 25℃, in the range of pH 5.0-11.0 (optimum 7.0-8.0), and with 1.0-5.0% NaCl (optimum 1-3% (w/v)). Phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene sequence showed that strain CE80^T belonged to the genus Labrenzia and was closely related to L. suaedae YC6927^T (98.3%), L. alexandrii DFL-11^T (96.6%), L. aggregata IAM 12614^T (96.6%) L. marina mano18^T (96.5%) and L. alba CECT 5094^T (96.2%). The major fatty acids of strain CE80^T were C_18:1 ω7c, and summed feature. The polar lipids were diphosphatidylglycerol, phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylglycerol, phosphatidylmonomethylethanolamin, one unidentified aminolipid, one phospholipid and four unidentified lipids. The DNA G+C content of strain CE80^T was 55.9 mol%. The major respiratory quinone was Q-10. DNA-DNA relatedness between strain CE80^T and L. suaedae YC6927^T was 56.1±2.8%. On the basis of physiological and biochemical characterization and phylogenetic and chemotaxonomic analysis, strain CE80^T represents a novel species of the Labrenzia, for which the name Labrenzia callyspongiae sp. nov., is proposed. The type strain is CE80^T (=KCTC 42849^T =JCM 31309^T).

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제27권3호
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• pp.317-324
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• 2012

본 연구는 식품원료의 진위여부를 판별하기 위한 시험법으로 일반 프라이머를 이용한 DNA barcode 기법을 도입하였다. 동물성식품원료의 경우 미토콘드리아 DNA 중 cytochrome oxidase subunit I(COI) 부위 검출을 위하여 디자인된 프라이머(LCO1490/HCO2198 및 VF2/FISH R2)와 cytochrome b(cyt b) 부위 검출을 위하여 디자인된 프라이머(L14724/H15915)를 사용하였다. 상기 3 종류의 프라이머를 사용하여 가축류 6종(소, 돼지, 염소, 양, 말 및 사슴), 가금류 4종(닭, 오리, 칠면조 및 타조), 어류 7종(명태, 대구, 청대구, 청어, 송어, 다랑어 및 우럭)을 대상으로 PCR 후 전기영동하여 예상되는 PCR 산물의 생성 유무를 확인하였다. 가축류 6종에 대하여는 LCO1490/HCO2198, VF2/FISH R2 및 L14724/H15915 프라이머를 사용한 경우 COI 및 cyt b가 모두 검출되었으며, 가금류 4종은 LCO1490/HCO2198 및 VF2/FISH R2 프라이머를 사용한 경우만 COI이 검출되었다. 또한 어류 7종은 VF2/FISH R2 프라이머를 사용한 경우에만 COI 부위가 검출됨을 확인하였다. 식물의 경우 엽록체 DNA 부위를 이용하여 디자인된 3 종류의 프라이머(trnH/psbA, rpoB 1F/4R 및 rbcL 1F/724R)를 사용하였다. 각각의 프라이머를 이용하여 식물 5종(마늘, 양파, 무, 녹차 및 시금치)에 대하여 실험한 결과 3종류의 프라이머에서 PCR의 산물을 모두 확인하였으며 trnH/psbA 프라이머의 경우 식물 종마다 PCR 산물의 크기는 다르게 검출되었다. 본 연구에서는 17종의 식품원료별 일반 프라이머 및 PCR 조건을 확립하였으며, 생산된 PCR 산물을 대상으로 염기서열을 결정하고 유전자은행에 있는 염기서열과 DB 비교 분석을 통하여 식품에 사용된 원료의 진위여부 판별에 적용이 가능할 것으로 기대된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제50권3호
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• pp.328-336
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• 2022

Aptamers are short, chemically synthesized, single-stranded DNA or RNA oligonucleotides that fold into unique three-dimensional structures. In this study, we aim to determine the antibiofilm activity and binding specificity of the six polyclonal DNA aptamers (S15K3, S15K4, S15K6, S15K13, S15K15, and S15K20) on Staphylococcus aureus BPA-12 and Escherichia coli EPEC 4. Aptamer S15K6 showed the highest percentage of antibiofilm activity against S. aureus BPA-12 (37.4%) as shown by the lowest OD570 value of 0.313. Aptamer S15K20 showed the highest percentage of antibiofilm activity against E. coli EPEC 4 (15.4%) as shown by the lowest OD570 value of 0.515. Aptamers S15K13 and S15K20 showed antibiofilm activities against both S. aureus BPA-12 and E. coli EPEC4, and thus potentially have broad reactivity. Furthermore, based on the binding capacity and Kd values from our previous study, the binding specificity assay of selected polyclonal DNA aptamers (S15K3 and S15K15) against S. aureus BPA-12, E. coli EPEC 4, S. aureus BPA-6, S. agalactiae, E. coli MHA-6, and Listeria monocytogenes were performed using qPCR. Aptamers S15K3 and S15K15 showed specific binding to S. aureus BPA-12, E. coli EPEC 4, S. aureus BPA-6, and S. agalactiae, but could not bind to E. coli MHA-6 and L. monocytogenes. Therefore, this study showed that the polyclonal DNA aptamers have antibiofilm activity and were able to bind to S. aureus BPA-12 and E. coli EPEC 4 bacteria.

• 한국자원식물학회지
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• 제31권1호
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• pp.37-51
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• 2018

국내에 분포하는 천남성속의 계통학적 유연관계와 한약재 천남성(Arisaematis Rhizoma)으로 사용되는 천남성 3종(둥근잎천남성, 두루미천남성, 일파산남성)에 대한 분류학적 특징을 분석하기 위하여 천남성속 식물에 대한 분자계통학적 연구를 수행하였다. 3개의 범용성 DNA 바코드(ITS, matK, rbcL) 염기서열을 이용하여 국내 분포 천남성속 8분류군과 중국에 분포하는 약전수재 종 1분류군을 포함하는 9종 50개 시료와 같은 과의 Dracunculus vulgaris를 군외군으로 하여 유연관계를 분석하였다. 3개의 개별 DNA 바코드 염기서열과 이들을 유합한 염기서열로 계통학적 유연관계를 분석한 결과, 천남성속의 9 분류군은 6개의 독립적인 분계조를 형성하며 구별되었으며(Clade I, 둥근잎천남성 및 천남성; Clade II, 점박이천남성 및 섬남성; Clade III, 큰천남성; Clade IV, 일파산남성; Clade V, 두루미천남성; Clade VI, 무늬천남성 및 거문천남성), 이들 6개의 분계조는 각각 Pedatisecta절, Sinarisaema절, 및 Tortuosa절로 분류되었다. 또한 이들 DNA 바코드 구간의 비교 결과는 천남성속 식물의 종 및 종 이하 분류 단위의 분류학적 재검토의 필요성에 대한 중요한 정보를 제공하였다. 하지만 대한민국약전에 수재되어 한약재로 사용가능한 3종의 천남성 기원종의 종내 분류학적 연관성이나 분자계통학적 특징은 확인되지 않았다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제20권9호
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• pp.1322-1330
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• 2010

Three types of nuruk were made from rice, wheat, and a rice-glasswort (6:4) mixture. Nuruk, makgeolli, and vinegar were manufactured with rice nuruk (RN), wheat nuruk (WN), and rice-glasswort nuruk (RGN). The variable region of 18S or 16S rDNA amplified with genomic DNA extracted directly from nuruk-, makgeolli-, and vinegar-making cultures was analyzed via temperature gradient gel electrophoresis (TGGE). The sequence of the 18S rDNA variable region extracted from the TGGE gel for nuruk was 99% homologous with Aspergillus sp. and that for the makgeolli-making culture was 99% homologous with Saccharomyces sp. and Saccharomycodes sp. The sequence of the 16S rDNA variable region extracted from TGGE gel for the vinegar-making culture was 98% homologous, primarily with the Acetobacter sp. The eukaryotic and prokaryotic diversities in the nuruk-, makgeolli-, and vinegar-making cultures was not significantly altered by the addition of glasswort. Prokaryotic diversity was higher than eukaryotic diversity in the nuruk, but eukaryotic diversity was higher than prokaryotic diversity in the makgeolli-making culture, on the basis of the TGGE patterns. No 18S rDNA was amplified from the DNA extracted from the vinegar-making culture. The diversity of the microbial community in the process from nuruk to vinegar was slightly affected by the type of raw material utilized for nuruk-making. The saccharifying activity and ethanol productivity of nuruk, polyphenol content in makgeolli, and acetic acid and polyphenol content in the vinegar were increased as a result of the addition of glasswort. In conclusion, the glasswort may be not simply an activator for the growth of microorganisms during the fermentation of nuruk, makgeolli, or vinegar, but also a nutritional supplement that improves the quality of vinegar.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제10권6호
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• pp.881-884
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• 2000

A polymerase chain reaction (PCR) was performed to rapidly identify Lactobacillus plantarum from type strains and kimchi samples. The PCR experiments were carried out using specific oligonucleotide primer sets based on the 16S rRNA gene sequences of L. plantarum. The expected DNA amplificate of 419 bp was obtained when either purified DNA or whole cells of L. plantarum strains reacted with LP primers, yet not with any of the other strains. The PCR product was confirmed by DNA sequencing. Accordingly, since the PCR method used is simple, specific, and rapid, it will be useful for monitoring and evaluation L. plantarum in the mixed microbial population found in kimchi.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제46권6호
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• pp.937-946
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• 2004

Duroc 품종은 돼지 사육에 있어 산육성과 육질 향상을 위해 이용되고 있다. 본 연구는 육종에 많이 이용되는 Duroc 품종의 모계 특이적인 서열의 검색과 계통유전학적 유연관계의 정립을 위하여 미토콘드리아 유전체의 전체 염기서열을 결정하고 집단 내 다형성을 조사하였다. mtDNA 전체 서열의 길이는 16,584-bp 이고, D-loop과 tRNA, rRNA 유전자 영역에서는 삽입/결실이 확인되었다. 4개의 coding gene (COⅡ, COⅢ, ND3, ND4)에서 불완전한 종결코돈을, ND4L과 ND2 유전자는 선택적 개시코돈 양상을 보였다. Duroc 집단에 대한 분석 결과 조절영역에서의 특이적인 11-bp 중복 단위가 일부 개체(15.2%)에서 발견되었고, ND2의 개시코돈과 CYTB 유전자에서도 다형현상을 보였다. 각각의 유전자 영역에서의 다형성은 서로 연관되어 있었고, 그 결과 Duroc 집단은 크게 두 가지 haplotype으로 구분되었다. 계통수에서 Duroc mtDNA 서열은 유럽계열 cluster에 위치하였으나, haplotype 분석과 기존에 연구결과들을 종합해 보면 Duroc 품종은 여러 모계선조 집단에서 기원한 것으로 보이며, 유럽과 아시아 계열 모두가 품종 형성에 이용된 것으로 사료된다된 것으로 사료된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권3호
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• pp.469-474
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• 2001

The actinomycete strain AMLK-335 was antagonistic to vancomycin-resistant enterococci (VRE). Based on the diaminopimelic acid (DAP) type, and morphological and physiological characteristics revealed by scanning electron microscopy (SEM), AMLK-335 was confirmed to belong to the genus Streptomyces. Analysis of the 16S rDNA nucleotide sequences found AMLK-335 to have a relationship with Streptomyces platensis. The production of antibiotic from this strain was most favorable when cultured on glucose, polypeptone, yeast extract (PY) medium for 6 days at $27^{\circ}$. The antibiotic was identified as cyclo(L-phenylalanyl-L-prolyl) by comparing ti with the reported MS and NMR spectral data. Cyclo(phe-pro) from the PY cultures of AMLK-335 was most effective (K-98-258). Futhermore, cyclo(phe-pro) had antimicrobial activity against Bacillus subtilis, Microcuccs luteus, Staphylococcus aureus, and Saccharomyces cerevisiae, but it wa ineffective against Candida albicans, Streptomyces murinus, and Aspergillus niger.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권1호
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• pp.92-101
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• 2006

The bacterial diversity of the bovine rumen was examined using a PCR-based approach. 16S rDNA sequences were amplified and cloned from three fractions of rumen (solid, fluid, and epithelium) that are likely to represent different bacterial niches. A total of 113 clones were sequenced, and similarities to known l6S rDNA sequences were examined. About $47.8\%$ of the sequences had $90-97\%$ similarity to 16S rDNA database sequences. Furthermore, about $62.2\%$ of the sequences were $98-100\%$ similar to 16S rDNA database sequences. For the remaining $6.1\%$, the similarity was less than $90\%$. Phylogenetic analysis was also used to infer the makeup of the bacterial communities in the different rumen fractions. The Cytophaga-Flexibacter-Bacteroides group (CFB, $67.5\%$), low G+C Gram-positive bacteria (LGCGPB, $30\%$), and Proteobacteria $(2.5\%)$ were represented in the rumen fluid clone set; LGCGPB $(75.7\%)$, CFB$(10.8\%)$, Proteobacteria $(5.4\%)$, high G+C Gram-positive bacteria (HGCGPB, $5.4\%$), and Spirochaetes $(2.7\%)$ were represented in the rumen solid clone set; and the CFB group $(94.4\%)$ and LGCGPB $(5.6\%)$ were represented in the rumen epithelium clone set. These findings suggest that the rumen fluid, solid, and epithelium support different microbial populations that may play specific roles in rumen function.

• 한국식품과학회지
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• 제47권1호
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• pp.44-50
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• 2015

본 연구에서는 시판 생막걸리에서 분리한 유산균의 probiotics 특성을 연구하기 위해 내산성, 내담즙성, 장 부착능에 효능이 있는 6개 균주를 선별하여 동정하였다. 생막걸리에서 분리한 유산균을 pH 2.5의 산성 및 담즙산(0.3% oxgall) 조건에서 내산성과 내담즙성을 측정한 결과 BSM-2, BSM-3, GSM-3, TJH-1, EHJ-1, EHJ-2의 6개 균주에서 각각 $10^7$, $10^8CFU/mL$ 높은 생존률을 나타내어 우수한 내산성과 내담즙성을 확인할 수 있었다. 내산성과 내담즙성에 효능이 있는 6개 균주의 16S rDNA 분석 결과, L. plantarum (BSM-2, EHJ-1) L. casei (GSM-3, EHJ-2), L. brevis (BSM-3), P. pentosaceus (TJH-1)의 4개 group이 동정되었다. 장부착능에서는 다른 유산균에 비해 장내 부착능이 뛰어난 것으로 알려진 L. rhamnosus GG를 대조군으로 사용하였으며 HT-29 cell에 대해 6종의 유산균이 모두 장 부착능을 보였으며 L. casei(GSM-3, EHJ-2)가 가장 장 부착능이 높았다. 항산화능력은 L. plantarum BSM-2와 EHJ-1에서 각각 32.44%, 24.65%의 DPPH radical 소거능을 보였다. 시판 생막걸리에서 분리된 유산균은 다양한 식중독 원인 세균에 대하여 항균활성을 지니고 있었으며, 본 연구에서는 유산균이 생성하는 항균물질인 bacteriocin이 아닌 유산균 발효 중 젖산을 생성하면서 pH의 저하로 항균활성을 보인다는 결과를 확인할 수 있었다. Probiotics로의 기능성을 가진 6개 균주의 콜레스테롤 저하능력은 L. plantarum BSM-2와 EHJ-1에서 각각 68.82%, 56.38%의 높은 감소율을 나타내었다. 시판 생막걸리에서 분리한 유산균의 probiotic 특성을 조사해 본 결과 L. plantarum BSM-2, EHJ-1, L. brevis BSM-3, L. casei GSM-3, EHJ-2, P. pentosaceus TJH-1 모두 프로바이오틱스의 기본특성을 지니고 있어 프로바이오틱 균주로서 이용가치가 충분하다고 판단되어지며, L. plantarum BSM-2가 내산성, 내담즙성이 가장 우수한 결과를 나타내었고, 장 부착성이 우수하였으며, 뛰어난 항산화 능력과 항균력을 지니며, 콜레스테롤 저하능도 뛰어나 가장 우수한 프로바이오틱 균주라고 판단된다.