Yellow tail (Seriola quinqueradiata) infected by Pasteurella piscicida have been occurred to mass mortality without showing apparent surface lesions in cage culture farms. In this case, it is necessary to consider countermeasure by rapid diagnosis of infected fish. The purpose of the present study was to investigate usefulness of the direct fluorescent antibody technique(FAT) for rapid diagnosis of pseudotuberclosis of cultured yellowtail caused by P. piscicida. Antibody produced by inoculating rabbit with formalin killed pseudotuberclosis bacteria antigen(strain KNP-2). Immunoglobulin-G(IgG) was purified from antisera by DEAE-cellulose column chromatography and conjugate with fluorescein isothiocyanate. Fluorescein-labeled antisera was purified by sephadex G-25 gel column chromatography. The fluorescein/protein molar ratio of labeled antisera was determined as 8.8-9.5. Diagnosis of cultured yellowtail was examined in cage culture farms which located in Tongyung, kyungnam from July to October 1990. The causative bacteria of pseudotuberclosis could be detected within two hours after the specimens were transferred to the laboratory for FAT, and it showed that FAT could be adapted as a rapid and accurate diagnostic method of pseudotuberclosis in yellowtail.
It is very important to differentiate of DNA derived from live or dead bacteria within mixed microbial communities in aquatic environments. Ethidium monoazide (EMA) is a DNA intercalating agent and the treatment of EMA with strong visible light cleaves the genomic DNA of bacteria. In dead bacterial cells, EMA intercalates into the genomic DNA, induces the cleavage of DNA, and inhibits the PCR amplification. In this study, we developed the EMA-PCR and EMA real-time PCR to detect the DNA derived from viable Escherichia coli (E.coli) in mixed cultures of live and dead E.coli. The treatment of EMA, $50{\mu}g/mL$, and 650 W visible halogen light exposure for 2 minutes cleaved the genomic DNA derived from heat killed E.coli but did not those of live E.coli. EMA-PCR could detect the DNA from live E.coli in mixed culture samples of live and dead E.coli at various ratio and there was no DNA amplification in only dead E.coli cultures. Similar results were observed in EMA real-time PCR. Further studies are needed to develop various EMA-PCR methods to detect viable waterborne pathogens such as Helicobacter pylori, Giardia lamblia, and so on.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are ubiquitous in the environment. They are highly toxigenic and carcinogenic. Probiotic bacteria isolated from fermented foods were tested to check their ability to degrade and/or detoxify PAHs. Five probiotic bacteria with distinct morphologies were isolated from a mixture of 26 fermented foods co-cultured with benzo(a)pyrene (BaP) containing Bushnell Haas minimal broth. Among them, B. velezensis (PMC10) significantly reduced the abundance of BaP in the broth. PMC10 completely degraded BaP presented at a lower concentration in broth culture. B. velezensis also showed a clear zone of degradation on a BaP-coated Bushnell Haas agar plate. Gene expression profiling showed significant increases of PAH ring-hydroxylating dioxygenases and 4-hydroxybenzoate 3-monooxygenase genes in B. velezensis in response to BaP treatment. In addtion, both live and heat-killed B. velezensis removed BaP and naphthalene (Nap) from phosphate buffer solution. Live B. velezensis did not show any cytotoxicity to macrophage or human dermal fibroblast cells. Live-cell and cell-free supernatant of B. velezensis showed potential anti-inflammatory effects. Cell-free supernatant and extract of B. velezensis also showed free radical scavenging effects. These results highlight the prospective ability of B. velezensis to biodegrade and remove toxic PAHs from the human body and suggest that the biodegradation of BaP might be regulated by ring-hydroxylating dioxygenase-initiated metabolic pathway.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.43
no.3
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pp.306-312
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2016
Gargle solution has typically been used for the prevention of oral infectious disease such as dental caries and periodontitis. However, the use of most gargle solutions is controversial in application for children because some gargle solutions have harmful side effects. Electrolyzed water is generated by passed an electric current and has antimicrobial activity. The purpose of this study was to investigate and compare the efficacy of electrolyzed water in various conditions for eliminating cariogenic bacteria. Electrolyzed water was generated by a platinum electrode in the presence of sodium chloride at various concentrations. Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus were cultivated into a brain heart infusion broth. After harvesting planktonic bacteria, the pellets were treated with the electrolyzed water and commercial gargle solutions and plated on a mitis-salivarius agar plate. Also, the anti-biofilm activity of the electrolyzed water and commercial gargle solutions was investigated after biofilm formation of S. mutans and S. sobrinus. The bacteria in the biofilm were plated onto a mitis-salivarius agar plate. The plates were incubated, and the colony forming unit was measured. The electrolyzed water containing sodium chloride showed significant antibacterial activity against S. mutans and S. sobrinus as well as some gargle solutions. Furthermore, the electrolyzed water had more disruptive effect on the biofilm of S. mutans and S. sobrinus and killed more bacteria in the biofilm than commercial gargle solutions. The results demonstrate that electrolyzed water may be a useful gargle solution for prevention of dental caries.
The second article of 'Effects of heat treatment on the nutritional quality of milk,' titled 'Destruction of microorganisms in milk by heat treatment' and authored by Dr. Seong Kwan Cha, who worked at the Korea Food Research Institute, covers the heat-stable microorganisms that exist in milk after pasteurization. The article focusses on the microbiological quality of raw milk and market milk following heat treatment, and is divided into four sub-topics: microbiological quality of raw milk, survey and measurement of microorganisms killed in raw milk, effect on psychrophilic and mesophilic microorganisms, and effect of heat treatment methods on thermoduric microorganisms. Bacillus spp. and Clostridium spp. are sporeforming gram-positive organisms commonly found in soil, vegetables, grains, and raw and pasteurized milk that can survive most food processing methods. Since spores cannot be inactivated by LTLT (low temperature long time) or HTST (high temperature short time) milk pasteurization methods, they are often responsible for food poisoning. However, UHT (ultra high temperature) processing completely kills the spores in raw milk by heating it to temperatures above $130^{\circ}C$ for a few seconds, and thus, the UHT method is popularly used for milk processing worldwide.
Kim, Sung-Koo;Lee, Eun-Ju;Park, Keun-Young;Jun, Hong-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.8
no.6
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pp.588-594
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1998
Lactic acid bacteria were isolated from Kimchi and screened for bacteriocin production. Strain SE1, identified as Lactobacillus curvatus sp., showed the strongest inhibitory activity against Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii. The bacteriocin was inactivated by amyloglucosidase, trypsin, or protease K treatment. However, it maintained its activity under heat treatment at $100^{\circ}C$ for 60 min. The production of the bacteriocin had a growth-related mode and decreased around the early-stationary phase. The optimum temperature for the growth of L. curvatus SE1 was $37^{\circ}C$; however, the optimum temperature for bacteriocin production was $30^{\circ}C$. The bacteriocin activity was decreased by treatment with methanol, butanol, acetone, or chloroform, however, it was not affected by treatment with ethanol, iso-propanol, or cyclohexane. The inhibitory activity of bacteriocin was stable over a wide range of pHs (2 to 11). The bacteriocin from L. curvatus SE1 killed the indicator strain by a bactericidal mode of action. The bacteriocin from L. curvatus SE1 was partially purified by ethanol precipitation and ion exchange chromatography. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was used to determine the molecular weight of the bacteriocin by the bacteriocin activity test. The apparent molecular mass of the bacteriocin produced by L. curvatus SE1 was about 14 kDa.
Transactions of the Korean hydrogen and new energy society
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v.24
no.2
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pp.99-106
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2013
The variations of performance and metabolites at an early stage were investigated for the successful start-up technology in continuous fermentative hydrogen production. Unsuccessful start-up was observed when the operation mode was changed from batch to continuous mode after the yield was reached to 0.5 mol $H_2$/mol $hexose_{added}$ by batch mode. $H_2$ production continued till 12 hours accompanied by butyrate production, but did not last with propionate production increase. It was suspected that the failure was due to the regrowth of propionic acid bacteria during batch mode which were inhibited by heat-shock but not completely killed. Thus, successful start-up was tried by early switchover from batch to continuous operation; continuous operation was started after the $H_2$ yield was reached to 0.2 mol $H_2$/mol $hexose_{added}$ by batch mode. Although $H_2$ production rate decreased at an early stage, stable $H_2$ yield of 0.8 mol $H_2$/mol $hexose_{added}$ was achieved after 10 days by lowering down propionate production. And it was also concluded that the reason for $H_2$ production decrease at an early stage was due to alcohol production by self detoxification mechanism against VFAs accumulation.
A psychrotolerant cyanobacterium, Nodularia spumigena KNUA005, was isolated from a cyanobacterial bloom sample collected near Dasan Station in Ny-${\AA}lesund$, Svalbard Islands during the Arctic summer season. To generate an axenic culture, the isolate was subjected to three purification steps: centrifugation, antibiotic treatment and streaking. The broad antibacterial spectrum of imipenem killed a wide range of heterotrophic bacteria, while the cyanobacterium was capable of enduring both antibiotics, the remaining contaminants that survived after treatment with imipenem were eliminated by the application of an aminoglycoside antibiotic, kanamycin. Physical separation by centrifugation and streaking techniques also aided axenic culture production. According to the cold-tolerance test, this mat-forming cyanobacterium was able to proliferate at low temperatures ranging between 15 and $20^{\circ}C$ which indicates the presence of cold-tolerance related genes in N. spumigena KNUA005. This suggests the possibility of incorporating cold-resistance genes into indigenous cyanobacterial strains for the consistent production of algae-based biofuel during the low-temperature seasons. Therefore, it is needed to determine the cold-tolerance mechanisms in the Arctic cyanobacterium in the next research stage.
Park, Min Ah;Jung, So Young;Heo, Seong Eun;Bae, Il Kown
International Journal of Oral Biology
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v.41
no.2
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pp.75-81
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2016
Human mouth environment is known to include a variety bacteria, including Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Actinomyces spp., Lactobacillus spp., Candida spp., Enterobacteriaceae, et al. Human oral microorganisms can cause dental caries, gingivitis, periodontitis, respiratory tract infection, and cardiovascular disease. Thus, right denture cleaning is essential to oral and general human health. The aim of this study was to evaluate the bactericidal effect of a sodium dichloroisocyanurate-based effervescent tablet (Aos Denti Germ, Aos Company, Chungbuk, Korea) against oral microorganisms. A total of 5 species Streptococcus spp. (Streptococcus anginosus, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans, Streptococcus oralis, and Streptococcus sobrinus), Actinomyces oris, Candida albicans, and Escherichia coli were used in this study. All strains were exposed to the distilled water prepared with effervescent tablet. After the exposure, the mixture of strains and effervescent tablet was inoculated onto blood agar or MacConkey agar plate and cultured at $36^{\circ}C$. All strains were killed immediately on exposure to effervescent tablet. The results suggested that effervescent tablet could be used as an effective denture cleanser for dental hygiene.
Fecal material from cattle, which was confirmed to be infected with Johne's disease by clinical and pathological symptoms, was decontaminated with 4% NaOH and inoculated into the $L{\ddot{o}}wenstein$-Jensen media supplemented with 1% of heat-killed Mycobacterium bovis. After 2-4 week-incubation at $37^{\circ}C$, typical acid-fast mycobacteria was isolated. With the results of staining properties, morphological characteristics, the requirement of mycobactin for growth and the other biochemical properties, isolated mycobacteria was identified as Mycobacterium paratuberculosis. Female guinea pigs were sensitized with the isolates, and skin test was done with purified protein derivatives (PPDs) of M. avium, M. bovis and M. paratuberculosis 4 weeks after sensitization. Animals showed the largest reaction to the PPDs of M. avium and M. paratuverculosis.
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