The objective of this study was to determine a simple and reliable ploidy identification protocol for the rainbow trout (RT), Oncorhynchus mykiss, in the field condition. To evaluate the ploidy level and compare different detection protocols, triploid RT and gynogenesis were induced by UV irradiation and/or heat shock. The hatching rate at day 30 was 85.2% and the survival rate at day 90 was 69.4% (fingerling). The sex ratio of female RT was 93.75% in the gynogenesis group, illustrating that the UV irradiation inactivated the sperm DNA. The hatching rate and survival rate were 82.0 and 74.7%, respectively, in the triploid-induced group. The triploid induction rate by heat shock procedure was 73.9%. Cytogenetic protocols for ploidy identification such as chromosome counting, erythrocyte nuclear size comparison, and analysis of nucleolar organizing regions (NORs) by silver staining were compared. Silver nitrate staining showed the greatest success rate (22/23 and 32/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively), followed by erythrocyte nuclear size comparison (16/23 and 19/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively) and, lastly, chromosome preparation (2/23 and 6/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively) with the lowest success rate. Based on our findings, silver staining for RT ploidy identification is speculated to be highly applicable in a wide range of research conditions, due to its cost-effectiveness and simplicity compared to other numerous ploidy detection protocols.
방사선 조사 전분류의 확인방법 연구의 일환으로 0, 1.5, 3.0, 4.5 및 6.0 kGy의 감마선을 조사한 옥수수 전분, 고구마 전분 및 감자 전분을 대상으로 일정 조건에서 조사선량별 점도를 Brookfield DV-III programmable rheometer를 사용하여 측정하였다. 전분 현탁액의 농도를 옥수수 전분 8.0%(건물량 7.2%), 고구마 전분 8.5%(건물량 7.3%) 및 감자 전분 9.0%(건물량 7.3%)로 조제하여 100rpm에서 점도를 측정한 결과, 모든 시료에서 조사선량이 증가함에 따라 점도가 유의적으로 감소하였고 (p<0.05), 각각 $R^2$ 0.9754, 0.9618 및 0.9888의 높은 상관성이 확인되었다. 또한 1.5 kGy 조사선량에서도 옥수수 전분 34%, 고구마 전분 57%, 감자전분 51%의 점도 감소가 일어나 저선량 조사의 경우에도 뚜렷한 점도 변화가 관찰되어 방사선 조사 전분류의 확인방법으로써 적용 가능성이 높은 것으로 나타났다. 점도 측정에 의한 조사여부 판별의 신뢰도를 높일 수 있는 보조적인 확인 marker로써 용해도, 팽윤력, 청가 및 알칼리수를 검토한 결과, 조사선량이 증가함에 따라 용해도 및 알칼리수는 유의적으로 증가(p<0.05)한 반면, 팽윤력은 유의적으로 감소(p<0.05)하는 경향이 확인되었다.
곡류 및 전분류, 채소 및 과일류, 생선, 육류 및 콩류 및 향신류 등의 시료에 대한 감마선 조사에 의한 검지 특성을 물리적 검지 방법인 photostimulated luminescence (PSL), electron spin resonance (ESR) 및 thermoluminescence (TL) 분석을 통하여 검지 가능성을 확인하였다. PSL 분석 결과 곡류 및 전분류 시료군 가운데 옥수수 전분, 소맥분과 채소 과일류 시료군의 미역 등의 시료는 비 조사군(negative, ${\leq}700$)으로 판정되었으며, 생선, 육류 및 콩류 시료군의 흰 강낭콩 추출분말 및 향신료 시료군의 칠리 파우더를 포함한 9종의 시료는 감마선 조사군(positive, ${\geq}5000$)으로 판정되었다(전체 시료의 3.2%). 이외에 39종의 시료군에서는 방사선 조사 가능성이 있는 700~5,000 범위의 photon counts (intermediate)를 나타내었다(전체 시료의 15.6%). 이들 시료에 대한 TL 분석 결과, 칠리 파우더를 비롯한 미네랄이 분리된 5종의 시료에서는 $150{\sim}250^{\circ}C$ 전후에서 TL glow curve ($TL_1$)을 나타내어 감마선 조사 여부의 확인이 가능하였다. ESR 분석 결과 2차 검증 시료군에서 방사선 유래 특이적인 signal이 관찰되지 않아서 추출물 시료에는 ESR 분석법의 적용이 불가능한 것으로 나타났다.
Bong, Jin Jong;Kang, Yu Mi;Choi, Seung Jin;Kim, Dong-Kwon;Lee, Kyung Mi;Kim, Hee Sun
Journal of Radiation Protection and Research
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제38권4호
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pp.166-171
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2013
While high-dose ionizing radiation results in long term cellular cytotoxicity, chronic low-dose (<0.2 Gy) of X- or ${\gamma}$-ray irradiation can be beneficial to living organisms by inducing radiation hormesis, stimulating immune function, and adaptive responses. During chronic low-dose-rate radiation (LDR) exposure, whole body of mice is exposed to radiation, however, it remains unclear if LDR causes changes in gene expression of the whole brain. Therefore, we aim to investigate expressed genes (EGs) and signaling pathways specifically regulated by LDR-irradiation ($^{137}Cs$, a cumulative dose of 1.7 Gy for total 100 days) in the whole brain. Using microarray analysis of whole brain RNA extracts harvested from ICR and AKR/J mice after LDR-irradiation, we discovered that two mice strains displayed distinct gene regulation patterns upon LDR-irradiation. In ICR mice, genes involved in ion transport, transition metal ion transport, and developmental cell growth were turned on while, in AKR/J mice, genes involved in sensory perception, cognition, olfactory transduction, G-protein coupled receptor pathways, inflammatory response, proteolysis, and base excision repair were found to be affected by LDR. We validated LDR-sensitive EGs by qPCR and confirmed specific upregulation of S100a7a, Olfr624, and Gm4868 genes in AKR/J mice whole brain. Therefore, our data provide the first report of genetic changes regulated by LDR in the mouse whole brain, which may affect several aspects of brain function.
During laser irradiation, mechanically deformed cartilage undergoes a temperature dependent phase transformation resulting in accelerated stress relaxation. Clinically, laser-assisted cartilage reshaping may be used to recreate the underlying cartilaginous framework in structures such as ear, larynx, trachea, and nose. Therefore, research and identification of the biophysical transformations in cartilage accompanying laser heating are valuable to identify critical laser dosimetry and phase transformation of cartilage for many clinical applications. quasi-elastic light scattering was investigated using Ho : YAG laser $(\lambda=2.12{\mu}m\;;\;t_p\sim450{\mu}s)$ and Nd:YAG Laser $(\lambda=1.32{\mu}m\;;\;t_p\sim700{\mu}s)$ for heating sources and He : Ne $(\lambda=632.8nm)$ laser, high-power diode pumped laser $(\lambda=532nm)$, and Ti : $Al_2O_3$ femtosecond laser $(\lambda=850nm)$ for light scattering sources. A spectrometer and infrared radiometric sensor were used to monitor the backscattered light spectrum and transient temperature changes from cartilage following laser irradiation. Analysis of the optical, thermal, and quasi-elastic light scattering properties may indicate internal dynamics of proteoglycan movement within the cartilage framework during laser irradiation.
Fresh (raw roots), white (dried), and red (steamed-drid) ginseng samples were gamma-irradiated at 0 to 7 kGy. Electron spin resonance (ESR) technique was used to characterize the irradiation status of the samples, targeting the radiation-induced cellulose radicals after different sample pretreatments. All non-irradiated samples exhibited a single central signal (g=2.006), whose intensity showed significant increase upon irradiation. The ESR spectra from the radiation-induced cellulose radicals, with two side peaks (g=2.0201 and g=1.9851) equally spaced (${\pm}3mT$) from the central signal, were also observed in the irradiated samples. The core sample analyzed after alcoholic-extraction produced the best results for irradiated fresh ginseng samples. In the case of irradiated white and red ginseng samples, the central (natural) and radiation-induced (two-side peaks corresponding to cellulose radical) signal intensities showed little improvement on alcoholic-extraction. The water-washing step minimized the effect of $Mn^{2+}$, but reduced the intensity of side peaks making them difficult to indentify. The effect of different origins was negligible, however harvesting year showed a clear effect on radiation-induced ESR signals.
Three physical methods, photostimulated luminescence (PSL), thermoluminescence (TL), and electron spin resonance (ESR), have been applied to detect the irradiation treatment for the non- and steamed sesame seed samples. PSL successfully screened the irradiated samples from the non-irradiated control by comparing their photon counts (PCs) with the lower (less than 700 count/60 sec) and upper threshold values (higher than 5,000 count/60 sec). TL signals were still detected in all irradiated samples even after steaming, which was reconfirmed with TL ratios [integrated area of $TL_1$ (the first glow)/$TL_2$ (the second glow)] through re-irradiation step. ESR spectrometry showed that radiation-induced cellulose radicals were detected in all the irradiated samples irrespective of steaming treatment. Identification of the irradiated sesame seeds was possible even after steaming by analyzing PSL, TL, and ESR.
We have used cDNA microarray hybridization to identify gene regulated in response to gamma-irradiation in U-937 cell. The cDNA-chip was composed entirely of 1,000 human cancer related gene including apoptosis and angiogenesis etc. In gamma-irradiated U-937 cell, highly charged protein, ribosomal protein L32, four and a half LIM domains 3, lipocalin 2 (oncogene 24p3) and interleukin 15, ataxia telangiectasia mutated (includes complementation groups A, C and D) genes showed increased level of its transcription, and cell division cycle 25A, dihydrofolate reductase, topoisomerase (DNA) II beta(180kD), kinase suppressor of ras and strarigin genes showed reduced level of its transcription compared to untreated U-937 cell. The significant change of level of transcription was not found in well-known ionizing radiation(IR)-responsive gene, such as transcription factor TP53 and p53 related gene, except ataxia telangiectasia mutated gene.
시판 냉동 다진 마늘 5종(중국산 3종, 국산 2종)을 대상으로 DEFT/APC, 전자코 분석, PSL, TL 및 ESR 분석을 이용하여 사전살균처리 및 조사 여부를 모니터링 하였다. DEFT/APC 분석 결과 중국산 시료에서 DEFT값(생균수+사균수)은 7.9~8.3 log CFU/g으로 높은 값을 나타내었으나, APC(생균수)는 4.2~4.8 log CFU/g으로 낮은 값을 나타내어 사전살균처리 가능성이 확인되었다. 그러나 국산 시료는 DEFT값과 APC 값의 차이가 크게 나타나지 않아 사전살균처리되지 않은 것으로 판단되었다. 전자코를 이용한 조사여부 스크리닝 결과, 중국산 시료는 미지시료와 1 kGy 조사시료간에 있어서 차이가 불분명하여 조사여부 확인이 어려운 반면, 국산 시료는 그 차이가 명확히 구분되어서 사전 조사처리 되지 않았음을 확인할 수 있었다. PSL 분석 결과, 미지시료 5종 모두 700 이하의 PCs(-)을 나타내었으며, 1 kGy의 선량으로 재조사하여 얻은 PSL ratio 역시 10배 이상으로 나타나, 모든 시료가 사전 조사되지 않은 시료로 확인되었다. 한편 TL 분석에서 $TL_1$ 발광곡선은 국산 2종의 미지시료는 $300^{\circ}C$ 이상에서, 중국산 3종은 $240{\sim}250^{\circ}C$에서 약한 발광곡선을 나타내었다. 이상의 결과를 검증하기 위하여 재조사(1 kGy)에 의한 $TL_2$ 발광곡선을 측정한 결과, 국산 및 중국산 모두 $150{\sim}250^{\circ}C$에서 발광피크를 나타내면서 TL ratio($TL_1/TL_2$)가 0.1 이하로 비 조사(negative)로 나타났다. 그러나 중국산 3종의 $TL_1$ 발광곡선의 온도범위를 고려해 본다면 조사처리의 가능성이 높게 나타났다. 그리하여 ESR 분석을 실시한 결과, 중국산 3종 시료는 미지시료 및 1 kGy 조사시료 모두 방사선 유래의 특이적인 cellulose signal이 관찰되어 $TL_1$ 결과를 잘 뒷받침하였다. 이와 같이 냉동 다진 마늘의 조사여부를 효과적으로 확인하기 위해서는 물리적 분석법의 다중적 활용이 필요한 것으로 나타났다.
본 연구에서는 감마선 조사가 총목피 추출물의 생리활성에 미치는 영향을 검토하였다. 감마선 조사한 총목피의 감마선 조사여부를 확인하기 위하여 전자스핀공명(ESR) 분석을 시행한 결과 대칭적인 unspecific central ESR 신호 좌우로 cellulose를 함유한 조사 식품에서 나타나는 한 쌍의 peak가 6.0 mT의 공간을 두고 나타나 감마선을 조사한 시료로 판별되었다. 감마선 조사된 총목피의 최적 추출조건은 10 kGy를 조사한 시료를 50% ethanol을 사용하여 15시간 추출이었다. 감마선을 조사한 총목피의 항산화 효과를 확인한 결과 DPPH radical 소거효과와 ABTS radical 저해는 총목피의 물 추출물과 50% ethanol 추출물의 경우, 비조사구와 조사구를 저 농도인 $50{\mu}g/m{\ell}$ 처리하였을 때 각각 80%와 98% 이상의 매우 높은 저해 효과를 나타내었다. 지용성 물질의 항산화 활성의 지표인 antioxidant Protention Factor (PF)는 2.18~2.78 PF로 매우 높은 PF값을 나타내었다. TBARs의 경우 물과 ethanol 추출물 모두 높은 TBARs값을 나타내었다. 물 추출물은 감마선의 조사에 의한 TBARs 저해능의 상승은 관찰되지 않았으나, ethanol 추출물은 10 kGy의 감마선조사에 의해 TBARs 저해능의 상승이 약하게 관찰되었다. 이상의 결과 총목피는 감마선의 조사에 의해서 총목피의 phenolic 성분들의 용출율과 항산화 효과가 증대되는 현상을 확인하였다. 또한 감마선 조사가 식물체로부터 생리활성물질의 용출 증대와 항산화 활성을 증폭시킬 수 있는 수단으로 활용이 가능할 것이라 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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