In order to examine the interaction of albumin with the sperm during capacitation in mouse, proteins of cauda epididymal sperm were extracted under various conditions and analyzed with SDS-PAGE. Sperm surface labeling patterms were also examined using fluorochroin~conjugated wheat germ agglutinin (WGA) and bovine serum albumin (BSA). Albumin was detached from the sperm surface during the incubation and seemed to be constituted the major protein components of the conditioned media in which sperm incubated for 90 mm. Detachment of albumin from the sperm was not affected by the Ca2+ in the medium. WGA-FITC labeling confirmed that Triton X-100 permeabilired plasma membrane overlaying the apical segment of sperm head and detached plasma membrane associated proteins having negatively charged glycoconjugates. BSA-FITC labeling of epididymal sperm occurred on the apical segment of periacrosoinal region and postacrosomal region of the head. BSA-FITC labeling was not observed in periacrosoinal region of the sperm treated with Ca2+-ionophore ~3187 (10 MM)~ whereas the postacrosome region of acrosome-reacted sperm was still labeled after the AR. These results suggest that albumin bound to the surface of epididymal sperm is detached during the capacitation process, and it might be involved In physiological change of sperm plasma membrane accompanying the capacitation.
Kim, Yu.A.;Park, Kyeong-Mee;Kyung, Jong-Su;Hyun, Hak-Chul;Song, Yong-Bum;Shin, Han-Jae;Park, Hwa-Jin
Journal of Ginseng Research
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v.20
no.2
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pp.168-172
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1996
Ginsenoside Rb,, at a concentration of 10 $\mu\textrm{g}$/ml and over, initiated the cycle of oscillation of ion flux in erythrocytes after the cells had been treated with a protonophore, carbonyl cyanide p-trifluoro-methoxyphenyl hydrazone (FCCP) and then with a $Ca^{2+}$ ionophore, A23,3,. Its action was similar to the additional portion of $Ca^{2+}$-ionophore or $Ca^{2+}$ ion to the erythrocytes. Effects of $Rg_1$ and Rf were different from that of Rb,. They did not induce the oscillation. They, however, increased the extracellular $K^{+}$ concentration and pH without returning to the initial state in the erythrocytes processed with FCCP and $A_{23187}$. We established that ginsenosides from 20-(5)-panaxatriol family induced the membrane hyperpolarization in erythrocytes, which was attenuated by the pretreatment of $Rb_1$, a major component of 20-(5)-panaxadiol.
The suppressive effect of monensin as an ionophore-feed additive on enteric methane (CH4) emission and renewable methanogenesis were evaluated. To clarify the suppressive effect of monensin a respiratory trial with head cage was performed using Holstein-Friesian steers. Steers were offered high concentrate diets (80% concentrate and 20% hay) ad libitum with or without monensin, galacto-oligosaccharides (GOS) or L-cysteine. Steers that received monensin containing diet had significantly (p < 0.01) lower enteric CH4 emissions as well as those that received GOS containing diet (p < 0.05) compared to steers fed control diets. Thermophilic digesters at 55℃ that received manure from steers fed on monensin diets had a delay in the initial CH4 production. Monensin is a strong inhibitor of enteric methanogenesis, but has a negative impact on biogas energy production at short retention times. Effects of the activity of coprophagous insects on CH4 and nitrous oxide (N2O) emissions from cattle dung pats were assessed in anaerobic in vitro continuous gas quantification system modified to aerobic quantification device. The CH4 emission from dungs with adults of Caccobius jessoensis Harold (dung beetle) and the larvae of the fly Neomyia cornicina (Fabricius) were compared with that from control dung without insect. The cumulative CH4 emission rate from dung with dung insects decreased at 42.2% in dung beetles and 77.8% in fly larvae compared to that from control dung without insects. However, the cumulative N2O emission rate increased 23.4% in dung beetles even though it reduced 88.6% in fly larvae compared to dung without coprophagous insects. It was suggested that the antibacterial efficacy of ionophores supplemented as a growth promoter still continued even in the digested slurry, consequently, possible environmental contamination with the antibiotics might be active to put the negative impact to land ecosystem involved in greenhouse gas mitigation when the digested slurry was applied to the fields as liquid manure.
Kim H. J.;Choi S. H.;Han M. H.;Son D. S.;Ryu I. S.;Kim I. C.;Lee J. H.;Kim I. H.;Im K. S.;Cho S. R.
Journal of Embryo Transfer
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v.20
no.1
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pp.25-33
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2005
This study is a part of research that development of effective genetic resources preservation system using the in vitro spermatogenesis, in vitro insemination and culture system. We aimed for establishment of in vitro culture system with in vitro activated porcine oocytes. The porcine oocytes were matured for 48 hours in $TCM199+10\%$ FCS and activated with $7\%$ ethanol. The activated oocytes were cultured for 7 days in $TCM199+10\%$ FCS or $NCSU23+0.4\%$ BSA medium. The activated oocytes were not developed to the blastocyst stage in $TCM199+10\%$ FCS medium. However in $NCSU23+0.4\%$ medium, those were developed to blastocyst with $3\%$ of treated oocytes. We extended maturation duration of porcine follicular oocytes fur 48, 52, 56, 60, 64, 68, and 72 hours and activated with $7\%$ ethanol and cultured using $NCSU23+0.4\%$ BSA medium. The six percents of activated oocytes were developed to blastocyst in 48 hours and $10\%$ in 52 hours with comparatively low rates suggested to be not fully activated by regenerated MPF. Maturation durations from 56 hours to 68 hours supported to develop upto $11.9\~18.3\%$ of blastocysts. However the developmental rate was declined to $7.2\%$ at 72 hours of maturation duration because of cytoplasmic deterioration. The assumed time window for activation will be $56\~68$ hours of maturation duration. When the matured oocytes were activated with electric pulse of 1, 1.2, 1.4, 1.6, 1.8 and 2.0kV/cm for $80{\mu}s$, although appling the electric current once was not enough for activation, appling twice with 1.6kV/cm for $80{\mu}s$ was shown the highest developmental rate with $11.3\%$. When those were compared with activating methods, $15.7%$ of blastocyst rate was obtained in the $7\%$ ethanol. That was higher than those in electric pulse with $9.5\%$ and calcium ionophore method with $5.8\%$. In this experimental condition, the $7\%$ ethanol treatment was the most effective method for activating porcine oocytes.
Nonactin, known as an ionophore antibiotic, was antagonized by the actibity of quercetin, an oxygen radical scavenger. This compound generated superoxide radicals in Bacillus subtilis lysates. A recombination-deficient mutant strain of B. subtilis was more sensitive than a wild strain, and this hypersensitivity was reduced in the presence of dithiothreitol as an antioxidant. These results suggest that superoxide radical is important in the antibacterial action of this agent.
Polygoni cuspidati Rhizoma (PCRH) has been used in treatment of menoxenia, skin burn, gallstone, hepatitis, hyperlipidaemia, favus athlete's foot, supperative dermatitis and inflammation. However, its effect in experimental models remains unknown. In this present study, the effect of PCRH for stability on mast cell was analyzed. Two g/kg PCRH inhibited the compound 48/80-induced anaphylaxis by 75%. In addition, PCRH inhibited the tumor necrosis factor-$\alpha$ and interleukin-8 secretion as compared with the phorbol 12-myristate 13-acetate plus calcium ionophore A23187 stimulated human mast cell line, HMC-1 cells. These results suggested PCRH may inhibit mast cell-mediated anaphylactic reaction.
Methane emitted from ruminant livestock is regarded as a loss of feed energy and also a contributor to global warming. Methane is synthesized in the rumen as one of the hydrogen sink products that are unavoidable for efficient succession of anaerobic microbial fermentation. Various attempts have been made to reduce methane emission, mainly through rumen microbial manipulation, by the use of agents including chemicals, antibiotics and natural products such as oils, fatty acids and plant extracts. A newer approach is the development of vaccines against methanogenic bacteria. While ionophore antibiotics have been widely used due to their efficacy and affordable prices, the use of alternative natural materials is becoming more attractive due to health concerns regarding antibiotics. An important feature of a natural material that constitutes a possible alternative methane inhibitor is that the material does not reduce feed intake or digestibility but does enhance propionate that is the major hydrogen sink alternative to methane. Some implications of these approaches, as well as an introduction to antibiotic-alternative natural materials and novel approaches, are provided.
Recently we have reported a novel class of anion receptors which are based on 2n-crown-n topology. Trioxane derivatives are capable of anion sensing through pure aliphatic C-H hydrogen bonding. In this work, we highlight another interesting property, i.e., they can also recognize cations as normal crown ethers (3n-crown-n topology). Since the same functional moiety can recognize anions and cations, these coronands are predicted to be amphi-ionophores. However, we could not detect cations even in the gas phase. Considering trioxane is analogous to [$1_6$]starand, this was rather counter-intuitive. The calculation results show that these coronands can detect alkali metals with very low affinity. The low affinity toward cations should be responsible for this failure of experimental detection. With careful theoretical study, we found that this low affinity toward cations could be explained by the unfavorable charge-dipolar moiety orientations as proposed by Cui et al. As in the case of [$1_6$]starand, this is an example that underscores the importance of charge-dipolar moiety orientation in supramolecular interactions.
Considering the stimulatory effects of ginsenosides from Panax ginseng C. A. Meyer on the release of nitric oxide from bovine aortic endothelial cells in vitro and vasodilatation of rabbit pulmonary artery in vivo, the present study is designed to investigate the mechanism of nitric oxide release by ginsenosides in calf pulmonary artery endothelial cells, Nitric oxide release was determined in endothelial cells treated with ginsenosides and compared with those of the receptor-dependent agonists, bradykinin and ADP and the receptor-independent calcium ionophore $A_{23187}$. The results showed that total saponin and ginsenoside $Rg_1$, not $Rb_1$, stimulated nitric oxide release measured as conversion to L-citrulline. The nitric oxide releasing properties of total saponin and ginsenoside $Rg_1$ were different; total saponin stimulated only conversion to L-citrulline, like $A_{23187}$, while ginsenoside $Rg_1$ stimulated both L-arginine transport and conversion to L-citrulline, as bradykinin or ADP did.
Ferritin heavy chain 1 (FTH1) is an ubiquitous and highly conserved protein which plays a major role in iron homeostasis. The expression of FTH1 was specifically enhanced under various condition of endoplasmic reticulum (ER) stresses drugs such as Brefeldin A (BFA), DTT (Dithiothreitol), calcium ionophore A23187 and tunicamycin. We firstly report here that ER-stress induces up-regulated expression of FTH1 in FRTL-5 culture thyrocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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