In the present study, we examined the changes of uptake and efflux of taurine under various conditions inducing oxidative stress using rat conditionally immortalized syncytiotrophoblast cell line, TR-TBT cell, as blood-placental barrier in vitro model. In addition, we identified the characteristics of taurine transport in TR-TBT cells including general features, besides effect of calcium ion on taurine transport. Taurine uptake showed time, $Na^+$ and $Cl^-$ dependency, and was decreased by PKC activator in TR-TBT cells. Also, calcium free condition decreased taurine uptake and evoked taurine efflux in the cells. Oxidative stress induced the change of taurine transport in TR-TBT cells, but the changes were different depending on the types of stimulation inducing oxidative stress. The taurine uptake was increased by TNF-$\alpha$, LPS and DEM stimulation but decreased by $H_2O_2$ and NO stimulation. Also, the taurine efflux was regulated by TNF-$\alpha$ stimulation. In conclusion, the taurine transport through the blood-placental barrier was regulated in oxidative stress conditions, and these results demonstrated that oxidative stress affected the taurine supplies to fetus and taurine level of fetus.
Rhodopsins belong to a family of membrane-embedded photoactive retinylidene proteins. One opsin gene was isolated from ${\beta}$-proteobacterium (IMCC9480) which had been collected at the North Pole. It is very similar to Xanthorhodopin (XR) of HTCC2181. In this study, we carried out basic characterization of the rhodopsin. It has ${\lambda}max$ of 536, 554, and 546 nm at pH 4.0, 7.0, and 10.0, respectively. Since the pKa of its proton acceptor is around 6.27, we measured its proton pumping activity and photocycling rate at pH 8.0. It has a typical proton acceptor (D99) and donor (E110) which mediate proton translocation from intracellular to extracellular region when deduced from the sequence alignments. On the basis of in vitro proton pumping activity, it was proposed to have fast photocycling rate with M and O intermediates, indicating that it is a typical ion-pumping rhodopsin. Since the XR has not yet been expressed in any other heterologous expression system, we tried to get much more information about the XR through the XR-homologue rhodopsin.
Taurine is the most abundant amino acid in many tissues and is found to be enhancing the bone tissue formation or inhibits the bone loss. Although it is reported that taurine reduces the alveolar bone loss through inhibiting the bone resorption, its functions of taurine and expression of taurine transporter (TauT) in bone have not been identified yet. The purpose of this study is to clarify the uptake mechanism of taurine in osteoblast using mouse osteoblast cell lines. In this study, mouse stromal ST2 cells and mouse osteoblast-like MC3T3-E1 cells as osteoblast cell lines were used. The activity of taurine uptake was assessed by measuring the uptake of [$^3H$]taurine in the presence or absence of inhibitors. TauT mRNA was detected in ST2 and MC3T3-E1 cells. [$^3H$]Taurine uptake by these cells was dependent on the presence of extracellular calcium ion. The [$^3H$]taurine uptake in ST2 cells treated with 4 mM calcium was increased by 1.7-fold of the control which was a significant change. In contrast, in $Ca^{++}$-free condition and L-type calcium channel blockers (CCBs), taurine transport to osteocyte was significantly inhibited. In oxidative stress conditions, [$^3H$]taurine uptake was decreased by TNF-$\alpha$ and $H_2O_2$. Under the hyperosmotic conditions, taurine uptake was increased, but inhibited by CCBs in hyperosmotic condition. These results suggest that, in mouse osteoblast cell lines, taurine uptake by TauT was increased by the presence of extracellular calcium, whereas decreased by CCBs and oxidative stresses, such as TNF-$\alpha$ and $H_2O_2$.
Byeong Hee Kang;Woon Ji Kim;Sreepama Chowdhury;Chang Yeok Moon;Sehee Kang;Bo-Keun Ha
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2022.10a
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pp.261-261
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2022
Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp] is one of the most important grain legumes that enhance soil fertility and is well-adapted to various abiotic stress. Also, it is cultivated worldwide as a tropical annual crop, and the semi-arid regions are known as the main cowpea-produced regions. However, accumulation of soil salinity induced by low rainfall in these regions is reducing crop yields and quality. In general, plants exposed to soil salinity cause an accumulation of high ion chloride, which leads to the degradation of root and leaf proteins. In this study, we identified candidate genes associated with salinity tolerance through an analysis of differentially expressed genes (DEGs) in four cowpea germplasms with contrasting salinity tolerance. A total of 553,776,035 short reads were obtained using the Illumina Novaseq 6000 platform for RNA-Seq, which were subsequently aligned to the reference genome of cowpea Vunguiculata v1.2. A total of9,806 DEGs were identified between NaCl treatment and control of four cowpea germplasms. Among these DEGs, functions related to salt stress such as calcium transporter and cytochrome-450 family were associated with salt stress. In GO analysis and KEGG analysis, these DEGs were enriched in terms such as the "phosphorylation", ''extracellular region", and "ion binding". These RNA-seq results will improve the understanding of the salt tolerance of cowpea and can be used as useful basic data for molecular breeding technology in the future.
Kim, Young-Hoon;Lee, Sang-Kyeong;Rhee, Chung-Goo;Kim, Jeong-Ik
Korean Journal of Biological Psychiatry
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v.6
no.1
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pp.3-11
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1999
At the beginning, researches on the biology of depression or affective illness have focused mainly on the receptor functions and neuroendocrine activities. And the studies of the past years did not break new theoretical background, but the recent advances in the research on the molecular mechanisms underlying neural communication and signal transduction do add some insights to many established ideas. This article will overview some of the more recent advances in the clinical researches of depression. Our major concerns to be presented here include the followings : (1) alterations in the post-synaptic neural transduction ; (2) changes in the neurons of hypothalamic neuropeptides ; (3) decreased peptidase enzyme activities ; (4) associations of hypothalamic-pituitary-adrenal axis abnormalities with serotonin neurotransmission ; (5) role of serotonin transporter ; (6) changes in the responsiveness of intracellular calcium ion levels ; (7) the inositol deficiency theory of lithium and depression ; (8) the transcription factors including immediate early genes ; (9) recent genetic studies in some families. This brief overview will suggest that changes in DNA occur during antidepressant therapy. These changes at the DNA level initiating a cascade of events underlying antidepressant modality will give us the insights on the molecular biological basis of the pathogenesis of depression and cues for a new class of antidepressants.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2003.11a
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pp.109-109
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2003
Taurine is present in a variety of tissue and exhibits many important physiological functions in many tissues. Although it is known that many tissues mediate taurine transport, its functions of taurine transport in bone have not been identified yet. In the present study, we investigated the expression of taurine transporter (TauT) and taurine uptake using mouse stromal ST2 cells and osteoblast-like MC3T3-El cells, which is bone related cells. Detection of TauT mRNA expression in these cells were performed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The activity of TauT was assessed by measuring the uptake of [$^3$H]taurine in the presence or absence of inhibitors. TauT mRNA was detected in these cells. [$^3$H]Taurine uptake was dependent upon the presence of extracellular sodium, chloride and calcium ions, and inhibited by cold-taurine and ${\beta}$-alanine. These results suggest that taurine has biological functions in bone and some effect on the bone cells.
Kim, Min-Hoo;Jeong, Choon-Sik;Yoon, Hye-Ran;Kim, Gun-Hee;Lee, Yong-Soo
Biomolecules & Therapeutics
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v.14
no.3
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pp.137-142
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2006
Apigenin, a natural flavonoid found in a variety of vegetables and fruits, has been shown to possess many biological functions. In this study we investigated the role of apigenin in the production of reactive oxygen species (ROS) through the modulation of activity of $K^+-Cl^-$-cotransport (KCC) in IMR-32 human neuroblastoma cells. Apigenin induced $Cl^-$-dependent $K^+$ efflux, a hallmark of KCC activity, which was markedly prevented by different kinds of KCC inhibitors (calyculin-A, genistein and $BaCl_2$). These results indicate that KCC is functionally present, and activated by apigenin in the IMR-32 cells. Treatment with apigenin also induced a sustained increase in the level of intracellular ROS. The KCC inhibitors also significantly inhibited the apigenin-induced ROS generation. Taken together, these results suggest that apigenin can modulate ROS generation through the activation of a membrane ion transporter, KCC. These results further suggest that the alteration of KCC activity may play a role in the mechanism of degenerative diseases and/or carcinogenesis in neuronal tissues through the regulation of ROS production.
Apigenin, a natural flavonoid found in a variety of vegetables and fruits, has been shown to possess many biological functions. In this study we found that apigenin stimulated melanin synthesis in a dose-dependent manner in B16 murine melanoma cells. Since in our previous study $K^+$-$Cl^-$-cotransport (KCC) has been shown to mediate the mechanism of action of apigenin in neuronal cells, we further investigated the role of KCC in the melanogenesis-stimulating effect of apigenin in B16 cells. At nontoxic concentrations apigenin induced $Cl^-$-dependent $K^+$ efflux, a hallmark of KCC activity, which was markedly prevented by a specific KCC inhibitor R-(+)-[(2-n-butyl-6,7-dichloro-2-cyclopentyl-2,3-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)oxy]acetic acid (DIOA). These results indicate that KCC is functionally present, and activated by apigenin in the B16 cells. In addition, the apigenin-induced stimulation of melanogenesis was also significantly inhibited by DIOA. NEthylmaleimide (NEM), a known KCC activator, induced $Cl^-$ efflux and stimulated melanogenesis in a concentration-dependent fashion. Both effects of NEM were significantly inhibited by DIOA. Taken together, these results suggest that apigenin can modulate melanogenesis through the activation of a membrane ion transporter, KCC in B16 cells. These results further suggest that apigenin may be a good candidate in the therapeutic strategy for hypopigmentation disorders, such as vitiligo.
Morchella is a genus of fungi with the ability to concentrate Cd both in the fruit-body and mycelium. However, the molecular mechanisms conferring resistance to Cd stress in Morchella are unknown. Here, RNA-based transcriptomic sequencing was used to identify the genes and pathways involved in Cd tolerance in Morchella spongiola. 7444 differentially expressed genes (DEGs) were identified by cultivating M. spongiola in media containing 0.15, 0.90, or 1.50 mg/L Cd2+. The DEGs were divided into six sub-clusters based on their global expression profiles. GO enrichment analysis indicated that numerous DEGs were associated with catalytic activity, cell cycle control, and the ribosome. KEGG enrichment analysis showed that the main pathways under Cd stress were MAPK signaling, oxidative phosphorylation, pyruvate metabolism, and propanoate metabolism. In addition, several DEGs encoding ion transporters, enzymatic/non-enzymatic antioxidants, and transcription factors were identified. Based on these results, a preliminary gene regulatory network was firstly proposed to illustrate the molecular mechanisms of Cd detoxification in M. spongiola. These results provide valuable insights into the Cd tolerance mechanism of M. spongiola and constitute a robust foundation for further studies on detoxification mechanisms in macrofungi that could potentially lead to the development of new and improved fungal bioremediation strategies.
Follicular cystic ovary (FCO) is one of the major causes of reproductive failure in cattle. Genetic alterations affect the function of diverse cells and/or tissues, which could be present in cystic ovaries. A microarray analysis was performed to screen differential gene expressions in follicular cystic follicles of cattle. In this study, we hypothesized that follicular cysts may be induced by changes in ion- and transporter-related gene expression. Microarray data showed that fibrinogen-gamma (FGG) and low density lipoprotein receptor-related protein 8 (LRP8) were up-regulated, while choline transporter-like protein 4 (SLC44A4), very long-chain acyl-CoA synthetase homolog 2 (SLC27A5), annexin 8 (ANXA8), and aquaporin 4 were down-regulated in follicular cystic follicles. A semi-quantitative RT-PCR was carried out to validate DEGs altered in follicular cystic follicles. Of six DEGs, three DEGs (FGG, SLC44A4, and aquaporin 4) showed a positive correlation between microarray and semi-quantitative PCR data. We focused on FGG, among three DEGs, which was highly up-regulated in follicular cystic follicles. The FGG mRNA was upregulated by 8.4-fold and by 1.7-fold in the bovine follicular cystic follicles as judged by microarray and RT-PCR analysis, respectively. However, there was no significant changes in the expression level of FGG protein in both follicular cystic follicles and granulosa cells isolated from follicular cystic follicles by Western blot analysis. Although this study does not reveal a positive correlation between the mRNA and protein level, FGG appears to be an important biomarker in the discrimination of follicular cyst from normal ovary.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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