• 제목/요약/키워드: ion exchange chromatography

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앵커 그룹으로서 아자크라운 에테르를 포함한 새로운 이온교환체에 의한 리튬 동위원소의 농축 (Enrichment of Lithium Isotope by Novel Ion Exchanger Containing Azacrown Ether as Anchor Group)

  • 김동원;이남수;정영규;류해일;김창석;김봉균
    • 분석과학
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    • 제11권4호
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    • pp.231-234
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    • 1998
  • $N_3O_3$가 앵커 그룹으로 포함된 이온교환체를 사용하여 $^6Li$$^7Li$의 분리인자를 측정하였다. 이온교환체의 이온교환 용량은 2.0 meq/g 이었다. 3M 염화암모늄 수용액을 용리액으로 하였으며, 내경 0.3 cm, 높이 30 cm의 칼럼을 이온교환크로마토그래피에 사용하였다. 가벼운 동위원소 $^6Li$는 유체상에, 무거운 동위원소 $^7Li$는 수지상에 농축되었다. 용리곡선과 동위원소 비를 가지고 Glueckauf의 이론에 따라 분리인자를 구하였으며, 그 값은 1.018이었다.

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참치자숙액 추출물 중의 히스티딘계 저분자 펩타이드 및 산화촉진물질 함량에 미치는 추출방법의 영향 (Effects of Extraction Method on the Histidine Containing Low Molecular Weight Peptide and Pro-oxidants Contents of Tuna Boiled Extracts)

  • 강옥주
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제24권3호
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    • pp.349-357
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    • 2008
  • In an effort to augment extractability of carnosine and anserine at the levels of pro-oxidants such as iron and protein in Tuna boiled extracts(Skipjack, Yellowfin and Bigeye), we assessed the effects of heated and ion exchange chromatography(IEC) and ultrafiltration(UF) using a MW 500 cut-off(500 MWCO). We also evaluated the antioxidant activity of these extracts processed as free radical scavengers and reducing agents. Tuna boiled extracts of dark and ordinary muscle protein and total iron were reduced, whereas carnosine and anserine concentrations and antioxidant activity were increased. The carnosine and anserine concentrations of the ion exchange and permeate UF(IEC-UF) extracts were higher than those observed in the heated and permeate UF(heat-UF), whereas the protein and total iron contents were lower than that observed in the heat-UF. The quantity of carnosine and anserine in ordinary muscle was higher than that detected in dark muscle. HPLC analysis and SDS-PAGE were shown to removes the effect of UF on high molecular weight impurities in the tuna boiled extracts. The major free amino acids(FFAs) from Skipjack, Yellowfin and Bigeye tuna IEC-UF extracts were anserine, histidine and carnosine. These three peptides constituted more than 80~85%. of the detected amino acid. The IEC-UF treated ordinary muscle extracts evidenced the highest levels of DPPH radical scavenging activity and the highest levels of reducing power among the various extracts. The IEC-UF extracts evidenced a DPPH radical scavenging effect equal to that of 1mM ascorbic acid.

Calcium-binding Peptides Derived from Tryptic Hydrolysates of Cheese Whey Protein

  • Kim, S.B.;Lim, J.W.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제17권10호
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    • pp.1459-1464
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    • 2004
  • The purpose of this research was to investigate the potential use of cheese whey protein (CWP), a cheese by-product. The physiological activity of calcium-binding peptides in CWP may be used as a food additive that prevents bone disorders. This research also examined the characteristics of calcium-binding peptides. After the CWP was heat treated, it was hydrolyzed by trypsin. Then calcium-binding peptides were separated and purified by ion-exchange chromatography and reverse phase HPLC, respectively. To examine the characteristics of the purified calcium-binding peptides, amino acid composition and amino acid sequence were analyzed. Calcium-binding peptides with a small molecular weight of about 1.4 to 3.4 kDa were identified in the fraction that was flowed out from 0.25 M NaCl step gradient by ion-exchange chromatography of tryptic hydrolysates. The results of the amino acid analysis revealed that glutamic acid in a calcium-binding site took up most part of the amino acids including a quantity of proline, leucine and lysine. The amino acid sequence of calcium-binding peptides showed Phe-Leu-Asp-Asp-Asp-Leu-Thr-Asp and Ile-Leu-Asp-Lys from $\alpha$-LA and Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys and Val-Tyr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys from ${\beta}$-LG.

Bacillus sp.가 세포외로 생산하는 Inulinase의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of Extracellular Inulinase from Bacillus sp.)

  • 김경남;최용진
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제18권5호
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    • pp.490-495
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    • 1990
  • 토양 분리균인 Bacillus spp.가 생산하는 inulinase를 ammonium sulfate 분획, 열처리, DEAE Sephadex Cl-6B ion exchange chromatography, Sephadex G-100 및 Sephadex G-150 gel 여과 등의 과정을 거쳐 단일 단백질로 분리 정제하였다. 정제 inulinase는 분자량이 약 56,000인 효소로서 pH6.0,$50^{\circ}C$에서 최대 활성을 나타내었으며 $Co^{2+}$$Mn^{2+}$에 의해서 현저한 활성화 효과를 보였다. 또한 본 효소는 sucrose와 raffinose에 대해서도 높은 활성을 나타내므로 $\beta$-D-fructofuranosidase(EC 3.2.1.26)로 분류되는 exo-inulinase인 것으로 확인되었다. 한편 효소활성에 필수적인 아미노산 잔기는 tryptophan과 histidine인 것으로 분석되었으며 inulin과 sucrose에 대한 $K_m$값은 각각 $2.0 \times 1.0^[-3}M, 1.0 \times 10^[-2}M$로 산출되었다.

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인시목곤충의 성충체액 단백질에 관한 생리.생화학적 연구 II. 누에의 성충특이체액 단백질의 분리.정제 및 분자적 특성 (Physiological and Biochemical Studies on the Adult Heamolymph Proteins in Lepidoptera II. Purification and Molecular Properties of Adult Specific Protein in the Silkworm, Bombyx mori)

  • 이상몽;성수일
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제34권1호
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    • pp.30-34
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    • 1992
  • 누에의 성충특이체액단백질(adult specific protein : ASP)의 생리 생화학적 특성 및 성충화 발육에 따른 기능을 구명하기 위한 연구의 일환으로 ASP의 분리·정제 및 분자적 특성을 조사하였다. ASP는 Sephadex G-100 gel 여과 및 CM52 ion exchange chromatography에 의해 분리·정제되었으며, 정제된 단백질의 순도는 native-PAGE 및 면역전기영동에 의해 확인되었다. ASP는 분자량 19.5kDa 및 17.5kDa으로 추정되는 2종류의 subunits으로 구성되어 있고 또한 당 및 지질을 포함하지 않는 단순단백질임이 밝혀졌다.

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Aspergillus ficuum 조효소액으로부터 Endoinulinase의 정제 및 특성 (Purification and Properties of Aspergillus ficuum Endoinulinase)

  • 한상배;유향숙;노민환;이태규;손희숙;우순자;엄태붕
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.158-162
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    • 1991
  • Endoinulinase was purified from a commercial inulin preparation produced by Aspergillus ficuum using ion exchange chromatography on CM-Sephadex C-50 and DEAE-Sepharose 6B, HPLC gel filtration on a Protein Pak 125 Colum and HPLC ion exchange chromatography on a TSK DEAE-5pw Column. The endoinulinase had a molecular weight of 72,000${\pm}$1,000 and was glycoprotein with 23 to 25% w/w sugar content. The enzyme was much more active on inulin with random cleavage mode than on sucrose and on palatinose: The ration of activity on inulin and sucrose (I/S ratio) was 10~14.

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Bacillus stearothermophilus 가 생산하는 Xylanase의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of an Extracellular Xylanase of Bacillus stearothermophilus)

  • 배성호;최용진
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.592-597
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    • 1991
  • 토양 분리균인 B.stearothermophilus가 생산하는 xylanase를 ammonium sulfate 분획, DEAE-Sepharose CL-6B ion exchange chromatography, Sephadex G-100 gel 여과 및 열처리 등의 과정을 거쳐 단일 단배질로 분리 정제하였다. 170,000의 분자량을 본 정제 xylanase는 pH8과 pH10 사이의 넓은 최적 pH를 보였으며 $55^{\circ}C$에서 최대 활성을 나타내었다. $55^{\circ}C$에서 2시간의 열처리에 의해서도 활서의 손실이 거의 없을 정도로 열에 매우 안정하였으며 $co^{2+}$$Mn^{2+}$에 의해서 현저한 활성화 효과를 보였다.

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Cellulomonas가 생산하는 균체의 Cellulase의 분리 및 분리된 효소의 작용기작 (Fractionation of Extracellular Cellulase Pproduced by Cellulomonas and Reaction Mechanisms of the Isolated Enzymes)

  • Kim Byung Hong;Wimpenny, J.W.T.
    • 미생물학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.25-33
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    • 1985
  • Cellulomonas flavigena KIST 321이 생산하는 균체외 cellulose 분해효소를 gel filtration법과 ion-exchange chromatography법으로 3종의 다른 효소를 분리하여 이들을 A, B, 및 C 효소로 명명하였다. 분리된 각 효소를 결정적 기질에 처리하여 일어나는 기질의 구조변화를 적회전 분광법과 X-ray crystallography법으로 측정하여 다음 결론을 얻었다. B효소는 결정성 cellulosem이 구성단위인 glucopyranose의 불안정화로 그 결정도를 감소시키는 $C_1$형의 효소이며 A 및 C 효소는 $C_x$형의 효소로 B 효소의 반응생성물에 작용하여 glucose를 생산하였다. 이들 각 효소의 작용에서 본균의 cellulase의 작용기작을 고찰하였다.

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Characterization of Thioltransferase from Kale

  • Sa, Jae-Hoon;Yong, Mi-Young;Song, Byung-Lim;Lim, Chang-Jin
    • BMB Reports
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    • 제31권1호
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    • pp.20-24
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    • 1998
  • Thioltransferase, also known as glutaredoxin, is an enzyme that catalyzes the reduction of a variety of disulfides, including protein disulfides, in the presence of reduced glutathione. Thioltransferase was purified from kale through ammonium sulfate fractionation, DE-52 ion-exchange chromatography, Sephadex G-75 gel filtration, and Q-Sepharose ion-exchange chromatography. Its molecular size was estimated to be about 31,000 daltons on SDS-PAGE. The purified enzyme has an optimum pH of about 8.0 with 2-hydroxyethyl disulfide as a substrate. The enzyme also utilizes L-sulfocysteine, L-cystine, bovine serum albumin, and insulin as substrates in the presence of GSH. The enzyme has $K_m$ values of 0.24-0.67 mM for these substrates. The enzyme was partly inactivated after heating at $80^{\circ}C$ or higher temperature for 30 min. The enzyme was stimulated by various thiol compounds such as reduced glutathione, dithiothreitol, L-cysteine, and $\beta$-mercaptoethanol. This is a second example of a plant thioltransferase which was purified and characterized.

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모기유충에 살충력이 있는 Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis 73E10-2의 내독소의 용혈성 인자의 정제 (Purification of hemolysin in mosquitocidal delta-endotoxin from Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis 73E10-2)

  • 김광현;이기희;홍용기
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.303-307
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    • 1991
  • B.thuringiensis subsp. darmstadiensis 73E10-2의 내독소에 존재하는 hemolysin이 Sephadex G-100 gel filtration과 DEAE-cellulose ion exchange column chromatography에 의해 정제되었으며, 그 순도는 SDS-PAGE와 Ouchterlony test로 확인하였다. 그 결과 정제된 hemolysin의 분자량은 64KDa 의 단백질 이었으며, in vivo 상태에서는 전혀 모기유충에 독작용을 나타내지 않았다는 점이 28KDa 단백질의 차이가 있었다. 또한 정제된 hemolysin과 B.thuringiensis subsp. israelensis의 내독소를 효소항체법으로 검토해 본 결과 양단백질 사이에는 면역학적으로 전혀 상관이 없었다.

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