The effects of inorganic salts, inoculum concentration, aeration rate and shaking speed on insoluble phosphate solubilization by Pseudomonas fluorescens RAF15 were investigated. Soluble phosphate production was dependent on the presence of $MgCl_2{\cdot}6H_2O$ and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ in the medium. Supplementation of medium with 0.01% $CaCl_2{\cdot}2H_2O$ and 0.01% NaCl slightly increased soluble phosphate production. The optimal medium compositions for the solubilization of insoluble phosphate by P. fluorescens RAF15 were 1.5% glucose, 0.005% urea, 0.3% $MgCl_2{\cdot}6H_2O$, 0.01% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.01% $CaCl_2{\cdot}2H_2O$ and 0.01% NaCl, respectively. Optimal inoculum concentration was 2.0%(v/v). Maximum soluble phosphate production was obtained with 20-50 ml/250-ml flask and 200 rpm of shaking speed, respectively. The addition of EDTA decreased cell growth and soluble phosphate production.
혈청의 종류에 따른 하이브라도마 2c3.1세포의 성 장과 간염 표면 항원에 대한 단얼클론항체 생산에 미치는 영향을 조사하였다. 혈청은 fetal bovine s sera, newborn bovine calf sera, including supple m mented calf sera, horse serum, goat serum의 종류 를 사용하였다. 혈 청농도를 0.5%, 1.25%, 2.5%, 5%(v/v)로 변화시키고, 초기 세포농도를 $5{\times}10^4, 1{\times}10^5, 2{\times}10^5,$ cells/ml로 변화하여 현탁배양한 후 각각의 배지에서 하이브리도마 세포성장과 생산된 단일클론항체의 최대값을 비교하였다. 초기 세포농도를 $1{\times}10^5,$ cells/mlcells/ml로 일정하게 유지하였을 때 세포성장은 혈청의 종류에 관계없이 혈청농도의 증가와 밀접한 관련이 있었고, 혈청농도의 증가에 따른 서l포성장 증가로 인하여 항체 생산도 또한 증가되였 다. 5%의 혈청농도에셔 세포성장과 항체 생산은 초기 세포농도의 증가함에 따라 증가하였다. 같은 종 류의 혈청이라도 혈청 제조사에 따라 세포성장과 항 체 생산에 따른 영향을 끼침을 알았다. 이들 결과로 부터 하이브라도마 세포성장과 항체 생산을 증가하고 세포배양 비용을 줄일 수 있는 혈청의 종류와 농도를 결정하였다.
목련과 수종인 함박꽃나무의 현탁배양세포로부터 생리활성을 갖는 리그난화합물인 (+)-eudesmin을 효율적으로 생산하기 위한 연구로써 플라스크배양 단계에서의 다양한 배양조건들 즉, 배지, 초기 당농도, 교반속도, 초기 접종농도, 그리고 elicitation 효과를 확인하고자 하였다. MS배지를 포함한 4종의 배지에서는 물질의 생산성과 생중량 모두에서 MS배지가 적합한 것으로 나타났다. 130 rpm으로 교반되는 항온배양기에서 $3\%$ sucrose와 0.5 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS배지에 0.5 mg (DCW)의 농도로 세포를 접종한 실험구에서 8주 후 플라스크 당 3.71 g (DCW)의 생중량을 얻었으며, 지표물질인 (+)-eudesmin의 함량은 $5\%$ sucrose와 200 mg/L chitosan 처리구에서 $3.2{\mu}g/g$ (DCW)으로 대조구에 비해 1.7배의 증가를 나타내었다. 이와 같은 연구결과는 생물반응기를 이용한 목련과 수종에서의 유용물질 생산 연구에 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Plasmodiophora brassicae에 의한 배추 뿌리혹병은 전 세계적으로 발생하여 큰 피해를 주고 있다. 본 연구에서는 관주 접종을 이용한 효율적인 배추 뿌리혹병 저항성 검정법을 확립하기 위하여, 레이스 9인 GN-1 균주를 사용하여 토양 종류, 접종원 농도, 배추 생육시기, 접종 후 배양 기간 등의 발병 조건에 따른 뿌리혹병 발생을 조사하였다. 혼합토양(원예용 상토:밭 토양=1:1, v/v)과 달리, 원예용 상토에서는 P. brassicae 접종농도가 증가함에 따라 배추 뿌리혹병 발생도 증가하였다. 접종원 농도는 폿트 당 $4.0{\times}10^8$개의 포자로 접종하였을 때 그리고 접종을 위한 배추는 파종 후 10일 유묘가 적합하였다. 안정적인 발병을 위해서, 접종한 배추 유묘는 3일 동안 $20^{\circ}C$ 생육상에서 하루에 12시간 광을 처리하며 배양한 후 온실($25{\pm}5^{\circ}C$)에서 5주 동안 재배한 후에 병조사하는 것이 요구되었다. 확립한 배추 뿌리혹병 저항성 검정법을 이용하여, 시판 중인 뿌리혹병 저항성 품종 25종과 감수성 품종3종의 P. brassicae GN-1 균주에 대한 저항성 정도를 실험한 결과, 모든 저항성 품종들은 뿌리혹병에 대하여 뚜렷한 저항성을 나타내었고, 감수성 품종들은 발병도 3.5 이상의 높은 감수성을 보였다. 따라서 이 방법은 배추의 뿌리혹병 저항성을 검정하기 위한 효율적인 검정법임을 알 수 있었다.
윤활유의 생분해도 평가를 위해 개발된 국제규격을 검토하고 국내에서 적용 가능한 방법을 개발하였다. OECD 301B, ISO 9439, ASTM 5864 등의 국외규격 중 윤활유의 생분해도 평가에 적용 가능한 규격은 주로 호기적 조건 및 액상배지 (aqueous medium) 상에서 생분해도를 평가하도록 규정하고 있고, 이들 규격은 공통적으로 이산화탄소 발생법 ($CO_2$ evolution test)에 근간을 두고 있다. 하수처리장 등에서 얻어진 미생물 접종원을 시험화합물과 함께 무기물이 함유된 액상배지에서 배양시키면서 시험화합물의 유기탄소가 미생물의 효소 작용에 의해 분해되고 산화되어 최종적으로 이산화탄소로 무기물화 (mineralization) 되는 바탕을 근거 하에 생분해성 윤활제품의 생분해도를 조사하였다. 배지별로 생분해도를 비교하였을 경우 ASTM 5864에서 규정된 배지성분을 이용할 경우 생분해도가 높았고, 접종원 농도를 $10^4{\sim}10^5$ CFU/mLdm로 하였을 때 생분해도가 높았다. 또한 접종원의 종류가 생분해도 평가에 미치는 영향을 검토하였다. 본 연구에서 제안된 생분해도 시험에 대한 밸리데이션 결과 국제규격에 제시된 밸리데이션 기준을 만족하는 것으로 확인되었다. 이러한 시험결과를 토대로 국내에서 적용 가능한 윤활제품의 생분해도 시험을 위한 표준작업절차를 마련하였다.
The production of xylanase from Aspergillus niger mutant in SSF was optimized by' using statistical experimental designs. An inoculum size of $5{\times}10^5$ spores/g. initial moisture content of 65 %. cultivation time of 5 days and 10 times concentration of basal medium containing 50 times concentration of CSL were optimum for xylanase production ‘ Under the optimized conditions. the activity and productivity of xytanase obtained after 5 days of fermentation were 5.071 IU/gram of rice straw and 14.790 IU/l.h. respectively.
Transformed roots of Schisandra chinensis were obtained following co-cultivation of in vitro cultivated plantlet segments with Agrobaterium rhizogens ATCC15834. This root was examined for its growth and gomisin J contents under various culture conditions. Among the six basal culture media tested, WPM (Lloyd & McCown, 1980) medium supplemented with 5% sucrose was the best roots growth 6.2 (g D.W/flask) and gomisin J accumulation 1.56 $(X10^{-3}\;ug/g\;D.W)$. Initial inoculum size correlated with the yield of biomass while gomisin J contents was not affect. Gomisin J production was influenced by the initial sucrose concentration and the highest production yield was achieved at the concentration of 7%. The optimal shaking speeds for roots growth and gomisin J production was 120 and 140 rpm, respectively.
초산발효조건에 따른 사과주스의 발효특성을 알아보기 위하여 flask scale에서 초기 알코올 농도, 당농도, 초산농도 및 종초접종량 조건에 따른 초산발효를 실시하였다. 초기 알코올농도 3, 5, 7, 9%를 달리하여 사과주스의 초산발효를 12일간 실시한 결과 알코올 함량 5% 일때 발효 10일 째 산도가 최대치 5.88%로 측정되었으며, 알코올 함량이 9%일 경우 초산발효가 정상적으로 진행되지 않았다. 초기 당 농도 1, 5, 10, 14 $^{\circ}Brix$로 달리하여 초산발효를 실시한 결과 1 $^{\circ}Brix$의 경우 산도가 다른 조건에 비해 서서히 증가하여 발효 12일차에 산도 4.48%로 측정되었으며, 5, 10 $^{\circ}Brix$가 상대적으로 빠른 시간 내에 산도 4% 이상 생성됨을 알수 있었다. 초기 산도를 0.3, 0.5, 1, 1.5 및 2%로 달리하여 초산발효를 실시한 결과 초기 산도가 1% 이상일 때는 발효가 원활히 진행되는 것으로 나타났다. 종초 접종량은 10%, 15% 이상일 때 초산발효가 정상적으로 진행되어 발효 8일차에 산도가 각각 5.60, 6.05%에 도달하였다. 따라서, 사과주스를 이용한 초산발효시에는 알코올농도 5%, 초기 당농도 5 $^{\circ}Brix$ 이상, 초기 산도 1.0% 이상 및 종초 접종량 10% 이상이 적절할 것으로 생각된다. 산업적 규모의 초산발효 전단계로서 Mini-jar fermentor를 이용하여 초산발효를 실시한 결과 14 $^{\circ}Brix$ 사과농축액 2L에 알코올 7%와 $30^{\circ}C$, 300 rpm에서 활성화 된 종초 10%(총산함량: 4.03%)를 접종하여 초기산도를 약 1.0%로 조정한 후 $30^{\circ}C$, 300 rpm, 1.0 vvm으로 통기하여 초산발효를 실시한 후 시간대별로 분취하여 분석한 결과 Flask scale에서 보다 시간이 많이 단축되어 48 hr 발효하였을 때 산도 5% 이상의 식초를 생산할 수 있었다.
The pathogenecity of atypical Aeromonas salmonicida was studied in healthy Oreochromis niloticus. Inoculum at concentration of $1.5{\times}10^8CFU/ml$ and $3{\times}10^8CFU/ml$ was injected into healthy fish through intramuscular and intraperitoneal injections. Experimentally infected Oreochromis niloticus showed ulceration at the dorsal musculature and trunk region in addition to black coloration, congested gills, exophthalmia, and ocular hemorrhage. Congested liver and kidney were recorded in post-mortem examination. Mortality of the experimentally infected Oreochromis niloticus reached 100% after intramuscular injection at concentration of $3{\times}10^8CFU/ml$. Histopathological investigation of infected organs was also performed. There was a focal area of bundles of skeletal musculature showing hyalinization. In addition, hyperplasia, congestion, and fusion were noticed in the gill lamellae. There was also congestion in the blood vessels in the ocular chamber. Severe congestion was also noticed in the central vein of liver associated with focal aggregation of the melanin pigmented cells in the parenchyma. Degenerative changes were noticed in the epithelial cells lining of kidney tubules. Plant extracts carvacrol and its biological precursor cymene were found to be effective in treating experimentally infected Oreochromis niloticus at concentration of 100 or 200 ppm.
Kim, Jong-Seol;Frohnhoefer, Robert C.;Cho, Young-Cheol;Cho, Du-Wan;Rhee, G-Yull
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권9호
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pp.1564-1571
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2008
We investigated whether the threshold concentration for polychlorinated biphenyl (PCB) dechlorination may be lower in biosurfactant-amended sediments compared with biosurfactant-free samples. At PCB concentrations of 40, 60, and 120 ppm, the surfactant amendment enhanced the PCB dechlorination rate at all concentrations and the rate was also faster at higher concentrations. On a congener group basis, dechlorination proceeded largely with group A (congeners with low threshold) in both surfactant-free and -amended sediments, accumulating mainly group C (residual products of dechlorination) congeners, and surfactant enhanced the dechlorination rate of group A congeners. Since the PCB threshold concentration for the inoculum in the experiment was lower than 40 ppm, we carried out another experiment using sediments with lower PCB concentrations, 10, 20, and 30 ppm. Sediments with 100 ppm were also performed to measure dechlorination at a PCB saturation concentration. Comparison between the plateaus exhibited that the extent of dechlorination below 40 ppm PCBs was much lower than that at a saturation concentration of 100 ppm. There was no significant difference in the extent of dechlorination between surfactant-free and -amended sediments. Moreover, surfactant did not change the congener specificity or broaden the congener spectrum for dechlorination at PCB concentrations below 40 ppm. Taken together, it seems that at a given PCB concentration, dechlorination characteristics of dechlorinating populations may be determined by not only the congener specificity of the microorganisms but also the affinity of dechlorinating enzyme(s) to individual PCB congeners.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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