To investigate the anti-cancer effects of aqueous extract of Cheonkumwikyung-tang (CKWKT) on the growth of human lung carcinoma cell line A549, we performed various biochemical experiments such as the effects of CKWKT on the cell proliferation and viability, the morphological changes, the effects on expression of apoptosis and cell growth-regulatory gene products. Results obtained are as follow; CKWKT treatment declined the cell viability and proliferation of A549 cells in a concentration-dependent manner. The anti-proliferative effect by CKWKT treatment in A549 cells was associated with morphological changes such as membrane shrinking and cell rounding up. CKWKT treatment induced apoptotic cell death of A549 cells in a concentration-dependent manner, which was associated with inhibition and/or degradation of apoptotic target proteins such poly(ADP-ribose) polymerase, β-catenin and phospholipase C-γ1. Western blot analysis revealed that the levels cyclin-dependent kinase inhibitor p21 expression were induced by CKWKT treatment in A549 cells. Taken together, these findings suggest that CKWKT-induced inhibition of human lung cancer cell proliferation is associated with the induction of apoptotic cell death via regulation of several major growth regulatory gene products and CKWKT may have therapeutic potential in human lung cancer.
한국독성학회 2002년도 Current Trends in Toxicological Sciences
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pp.91-91
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2002
We have examine the effect of all trans retinoic acid and 9-cis-retinoic acid on human breast cancer cell proliferation using SRB assay and cell cycle analysis. 1)In MCF-7 cells, in the presence of phenol red, either all trans retinoic acid or 9-cis-retinoic acid treatment showed the inhibition of the cell proliferation over control cells and also inhibit the estrogen stimulated cell proliferation when it was given together with estrogen.(omitted)
본 연구의 목적은 다양한 생리활성물질을 함유한 비트 추출물의 다양한 농도를 이용하여 인체 유래 암세포 증식 저해를 살펴보기 위하여 실시하였다. 실험에 사용한 인체 유래 암세포는 6종으로 전립샘암세포 DU145, 폐암세포 A549, 유방암세포 MCF-7, 자궁암세포 HeLa, 간암세포 SNU-182, 담도암세포 SNU-1196을 사용하였으며, 비트 추출물의 다양한 농도에 대한 암세포증식 저해를 CCK-8 방법으로 측정하였다. 암세포증식 저해를 살펴본 결과 비트 추출물은 전립샘암세포 DU145를 모든 농도에서 유의성있게 농도 의존적으로 저해하였으며, 폐암세포 A549, 전립샘암세포 DU-145는 100ug/mL, 1000ug/mL에서 자궁암세포 HeLa, 간암세포 SNU-182, 담도암세포 SNU-1196는 1000ug/mL에서 유의한 증식 저해를 보였다. 실험 결과, 다양한 인체 유래 암세포를 이용한 비트 추출물의 암세포증식 저해는 암 예방 효과 및 기능성 식품 개발의 가능성을 제공한다고 볼 수 있다.
It has been known that adenine is a very important material in living cells. Because, adenine is a member of nucleotide base, so it takes part in DNA, RNA and ATP synthesis. There are many reports that adenine participated in ingredients, especially DNA, RNA, NADH and ATP, affect on the cell. As well adenosine, conjugated adenine to glycoside, was known to anti-wrinkle compound. But there is no report whether adenine shows a good effect on the skin, especially anti-wrinkle. So, in this study, we tested whether adenine affects cell proliferation, collagen synthesis, collagenase synthesis inhibition in human dermal fibroblasts. In addition, we performed clinical study with adenine cream. Cell proliferation effect was tested by MTT assay. Collagen and collagenase synthesis were measured by Immunoassay with ELISA kit. Clinical study was performed by IECK according to KFDA Functional Cosmetic method. The results of cell proliferation show that 10$^{-6}$ ~10$^{-8}$ % of adenine increases cell proliferation about 50 % compare with non-treated control. At 10$^{-7}$ ~10$^{-10}$ %, adenine increases type I collagen synthesis about 50%, decreases type I collagenase about 22% compare with non-treated control. The results of clinical study show that 0.05% adenine treated group reduces wrinkle significantly compare with placebo treated group. Therefore adenine may be a new anti-wrinkle candidate, through increases cell proliferation and collagen synthesis dramatically. And it decreases collagenase synthesis. So adenine could be used as a new anti-wrinkle agent.
Objective : Spatholobus Suberectus Dunn stems, Chinese vine plants, have been used for the relief of menstrual disorders and rheumatic arthralgia. In this study, we investigated the antitumor effect of Spatholobus Suberectus Dunn on cervical cancer in vitro. Methods : HeLA cervical cancer cell lines were used as targets. We examined the effect of water extract from Spatholobus Suberectus Dunn on cell proliferation, cell cycle regulation and cell cycle-regulating gene expression. Further, we investigated the apoptotic effects of Spatholobus Suberectus Dunn on cervical cancer cell lines. Results : Spatholobus Suberectus Dunn significantly inhibited the proliferation of cervical cancer cell lines in a dose-dependent and time dependent manner. Fluorescence activated cell sorter (FACS) analysis indicated that Spatholobus Suberectus Dunn induced G1 cell cycle arrest. Spatholobus Suberectus Dunn enhanced the expression of $p21^{waf1}$ and $p27^{kip1}$ with cell cycle arrest. Further, Spatholobus Suberectus Dunn stimulated apoptosis via caspase3 pathway. Conclusions : These findings suggest that Spatholobus Suberectus Dunn is a candidate agent for the treatment of cervical cancer. p21waf1 and $p21^{waf1}$ and $p27^{kip1}$ may play an important role in Spatholobus Suberectus Dunn-induced cell cycle arrest and cell growth inhibition.
본 연구에서는 치주질환과 관련이 깊은 것으로 알려진 구강내 spirochetes 균 중 Treponema denticola(TDC)와 가장 최근에 분리 배양된 Treponema lecithinolyticum(TLC)이 치주인대세포에 미치는 영향을 알아보기 위하여 두 spirochtes 균주를 배양한후 MTT test를 이용한 치주인대 세포의 증식 억제효과를 알아보았다. 또한, 위상차 현미경을 이용한 세포형태의 변화를 관찰 하였으며, LDH(lactate dehydrogenase) test를 이용한 세포독성 실험과, gelatin zymography를 시행하여 교원질 분해효소의 하나인 gelatinase의 활성화 여부를 측정한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 일정한 반응시간에서 농도에 따른 세포증식 억제효과에서는 TLC의 경우 높은 농도$(150{\mu}g/well)$에서부터 세포증식 억제 효과가 나타났으며, TDC에서는 낮은 농도$(9.4{\mu}g/well)$에서도 억제 효과가 나타났다. 2. 일정한 농도에서 시간에 따른 세포증식 억제효과에서는 TLC의 경우 2일째 $150{\mu}g/well$ 농도에서부터 세포증식 억제효과가 나타났으며, TDC에서는 $9.4{\mu}g/well$ 농도에서는 2일째에 세포증식 억제효과가 나타났다. 3. 열처리한 세균의 세포증식 억제 효과에서는 TDC의 경우에서 열처리 시킨 경우와 그렇지 않은 경우에 차이가 나타났으나, TLC의 경우에는 차이가 없었다. 4. 위상차현미경으로 관찰한 치주인대세포의 형태변화는 대조군에 비해 실험군에서 세포 형태의 손상으로 방추형이 소실되었고 세포증식이 억제되었으며, 세포끼리의 연결 또한 끊어져 분리되어 있었다. 5. 세포독성을 알아보기 위한 LDH test에서는 대조군, 실험군 모두 큰 차이가 없었다. 6. Zymography를 통한 교원질 분해에 미치는 영향에서는 TDC와 TLC에 의한 분자량 72kDa의 progelatinase A가 활성형으로 발현되었다. 이상의 결과를 보아 TLC와 TDC는 세포증식 억제효과를 통해 치주인대세포에 영향을 미치며, 교원질 분해 효소 Type IV의 하나인 progelatinase A를 활성형으로 발현시킴을 확인하였다.
Objectives: Benign prostatic hyperplasia (BPH) is a progressive pathological condition characterized by excessive proliferation of the prostate. In this study, we evaluated the effect of Corni Fructus water extract (CF) on the promotion of prostate cell proliferation by dihydrotestosterone (DHT). Methods: The effect of CF on the proliferation of LNCaP prostate cells was evaluated, and DHT was treated to induce an in vitro BPH model. To study the mechanism of inhibition of cell proliferation and BPH by CF, changes in the expression of key factors related to cell cycle and BPH were investigated. We further investigated the effect on the production of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory efficacy of CF. Results: Inhibition of LNCaP cell proliferation by CF was associated with decreased expression of cyclin D1 and cyclin A and increased expression of cyclin-dependent kinase inhibitor p21. CF also suppressed expression of BPH inducing factors such as 5α-reductase type 2 and androgen receptor (AR) as well as prostate specific antigen (PSA). Furthermore, CF significantly blocked DHT-induced LNCaP cell proliferation and effectively attenuated DHT-induced expression of BPH mediators and cyclins. In addition, CF inhibited DHT-induced oxidative and inflammatory reactions by inhibiting production of ROS and NO. Conclusion: Our results demonstrated that CF probably acted as 5α-reductase type 2 inhibitor, preventing the 5α-reductase type 2-AR signaling pathway, thereby reducing the conversion of testosterone to DHT and the expression of PSA, which is at least correlated with the antioxidant and anti-inflammatory activities of CF.
Previous studies have shown that miR-454 plays an important role in a variety of biological processes in various human cancer cells. However, the underlying mechanisms of this microRNA in colorectal cancer (CRC) cells remain largely unknown. In the present study, we investigated the miR-454 role in CRC cell proliferation. We found that miR-454 expression is markedly upregulated in CRC tissues and CRC cells compared with the matched tumor adjacent tissues and the FHC normal colonic cell line. Ectopic expression of miR-454 promoted the proliferation and anchorage-independent growth of CRC cells, whereas inhibition of miR-454 reduced this effect. Bioinformatics analysis further revealed cylindromatosis (CYLD), a putative tumor suppressor as a potential target of miR-454. Data from luciferase reporter assays showed that miR-454 directly binds to the 3'-untranslated region (3'-UTR) of CYLD mRNA and repressed expression at both transcriptional and translational levels. In functional assays, CYLD-silenced in miR-454-in-transfected SW480 cells have positive effect to promote cell proliferation, suggesting that direct CYLD downregulation is required for miR-454-induced CRC cell proliferation. In sum, our data provide compelling evidence that miR-454 functions as an onco-miRNA, playing a crucial role in the promoting cell proliferation in CRC, and its oncogenic effect is mediated chiefly through direct suppression of CYLD expression.
Aim: ATF3, a member of the ATF/CREB family of transcription factors, has been found to be selectively induced by calcineurin/NFAT inhibition and to enhance keratinocyte tumor formation, although the precise role of ATF3 in human skin cancer and possible mechanisms remain unknown. Methods: In this study, clinical analysis of 30 skin cancer patients and 30 normal donors revealed that ATF3 was accumulated in skin cancer tissues. Functional assays demonstrated that ATF3 significantly promoted skin cancer cell proliferation. Results: Mechanically, ATF3 activated Stat3 phosphorylation in skin cancer cell through regulation of p53 expression. Moreover, the promotion effect of ATF3 on skin cancer cell proliferation was dependent on the p53-Stat3 signaling cascade. Conclusion: Together, the results indicate that ATF3 might promote skin cancer cell proliferation and enhance skin keratinocyte tumor development through inhibiting p53 expression and then activating Stat3 phosphorylation.
Purpose : This study was aimed to investigate the inhibitory effect of Corydalis Tuber on the proliferation of human uterine leiomyoma cell and the expression of gene related the mechanism of cell apoptosis. Methods : We counted the number of suvival cells treated with indicated concentration of Corydalis Tuber and investigated cell viability by MTS assay. Furthermore, flow cytometric analyis were used to dissect between necrosis and apoptosis related with cell cycle and then we observed the differential gene expression by western blot analysis. Results : 1) The inhibitory effect on the proliferation of uterine leiomyoma cell treated with Corydalis Tuber was increased in a concentration and time proportional. 2) The result of flow cytometry analysis, subG1 phase arrest related cell apoptosis was not investigated in uterine leiomyoma cell treated Corydalis Tuber but showed G2/M phase prolongation. 3) The gene expression of p27, p21 related cell cycle was increased according to increasing concentration, but p53 was not exchanged. 4) The dephosphorylation of pRb gene were increased dependent on treatment concentration and pro-caspase 3, CDK4 were not exchanged. Conclusion : This study showed that Corydalis Tuber have the inhibitory effect on the proliferation of human uterine leiomyoma cell but the effect was thoughted no relationship with apoptosis. The inhibitory effect was suggested that dephosphorylation of pRb gene induced with increasing p21, p27 prolonged cell division in G2/M phase.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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