Apios americana Medik (hereinafter Apios) has been reported to treat diseases, including cancer, hypertension, obesity, and diabetes. The therapeutic effect of Apios is likely to be associated with its anti-inflammatory activity. This study was conducted to evaluate the protective effects of Apios in animal models of acute lung injury induced by lipopolysaccharide (LPS) or pandemic H1N1 2009 influenza A virus (H1N1). Mice were exposed to LPS or H1N1 for 2-4 days to induce acute lung injury. The treatment groups were administered Apios extracts via oral injection for 8 weeks before LPS treatment or H1N1 infection. To investigate the effects of Apios, we assessed the mice for in vivo effects of Apios on immune cell infiltration and the level of pro-inflammatory cytokines in the bronchoalveolar lavage (BAL) fluid, and histopathological changes in the lung. After induction of acute lung injury, the numbers of neutrophils and total cells were lower in the Apios-treated groups than in the non-Apios-treated LPS and H1N1 groups. The Apios groups tended to have lower levels of tumor necrosis factor-a and interleukin-6 in BAL fluid. In addition, the histopathological changes in the lungs were markedly reduced in the Apios-treated groups. These data suggest that Apios treatment reduces LPS- and H1N1-induced lung inflammation. These protective effects of Apios suggest that it may have therapeutic potential in acute lung injury.
We developed multiplex RT-PCR assays that can detect and identify 12 hemagglutinin (H1-H12) and 9 neuraminidase (N1-N9) subtypes that are commonly isolated from avian, swine, and human influenza A viruses. RT-PCR products with unique sizes characteristic of each subtype were amplified by multiplex RT-PCRs, and sequence analysis of each amplicon was demonstrated to be specific for each subtype with 24 reference viruses. The specificity was demonstrated further with DNA or cDNA templates from 7 viruses, 5 bacteria, and 50 influenza A virus-negative specimens. Furthermore, the assays could detect and subtype up to $10^5$ dilution of each of the reference viruses that had an original infectivity titer of $10^6\;EID_{50}/ml$. Of 188 virus isolates, the multiplex RT-PCR results agreed completely with individual RT-PCR subtyping results and with results obtained from virus isolations. Furthermore, the multiplex RT-PCR methods efficiently detected mixed infections with at least two different subtypes of influenza viruses in one host. Therefore, these methods could facilitate rapid and accurate subtyping of influenza A viruses directly from field specimens.
본 연구는 약병원성 조류인플루엔자 사독백신 개발을 위하여 백신 후보주(ADL0401)로서의 생물학적 특성 및 개발 백신에 대한 면역원성 및 안전성 평가를 실시하였다. 백신 후보주인 ADL0401의 병원성을 조사한 결과 폐사는 없었으며, 임상증상 및 바이러스 재분리율 양상이 국내 표준 야외주인 MS96과 상당히 유사한 생물학적 특성을 나타내어 약병원성 조류인플루엔자의 특징을 갖고 있음을 알 수 있었다. 표준야외주인 MS96과 백신후보주인 ADL0401간의 이종항원의 중화능 실험을 한 결과 r값 = 0.71로 동종항원(r값 = 1)에 비하여 다소 낮은 중화능을 나타내었지만, 두 바이러스간의 항원성엔 큰 차이가 없음을 알 수 있었다. 불활화 능력실험으로 $0.1\%$ Formalin을 $37^{\circ}C$ 조건에서 처리하였을 때 가장 효과적인 결과를 가져왔으며, MS96은 2시간, ADL0401은 1시간만에 다소의 역가 저하는 있었으나 빠르게 불활화가 이루어짐을 확인하였다. 개발 백신의 면역원성 및 안전성 실험 결과 ISA 70 adjuvant 백신 접종시 백신 접종 전후로 폐사율 및 임상증상은 관찰되지 않았으며, 높은 수준의 항체 역가를 형성함으로써 가장 면역원성이 우수한 것으로 확인되었다.
Trong Duc Tran;Suwicha Kasemsuwan;Manakorn Sukmak;Waraphon Phimpraphai;Tippawon Prarakamawongsa;Long Thanh Pham;Tuyet Bach Hoang;Phuong Thi Nguyen;Thang Minh Nguyen;Minh Van Truong;Tuan Pham Dao;Pawin Padungtod
Journal of Veterinary Science
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제25권2호
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pp.20.1-20.15
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2024
Background: Avian influenza (AI) is a contagious disease that causes illness and death in poultry and humans. High pathogenicity AI (HPAI) H5N6 outbreaks commonly occur in Quang Ninh province bordering China. In June 2021, the first HPAI H5N8 outbreak occurred at a Quang Ninh chicken farm. Objectives: This study examined the risk factors associated with HPAI H5N6 and H5N8 outbreaks in Quang Ninh. Methods: A retrospective case-control study was conducted in Quang Ninh from Nov 2021 to Jan 2022. The cases were households with susceptible poultry with two or more clinical signs and tested positive by real-time reverse transcription polymerase chain reaction. The controls were households in the same village as the cases but did not show clinical symptoms of the disease. Logistic regression models were constructed to assess the risk factors associated with HPAI outbreaks at the household level. Results: There were 38 cases with H5N6 clade 2.3.4.4h viruses (n = 35) and H5N8 clade 2.3.4.4b viruses (n = 3). Compared to the 112 controls, raising poultry in uncovered or partially covered ponds (odds ratio [OR], 7.52; 95% confidence interval [CI], 1.44-39.27), poultry traders visiting the farm (OR, 8.66; 95% CI, 2.7-27.69), farms with 50-2,000 birds (OR, 3.00; 95% CI, 1.06-8-51), and farms with ≥ 2,000 birds (OR, 11.35; 95% CI, 3.07-41.94) were significantly associated with HPAI outbreaks. Conclusions: Combining biosecurity measures, such as restricting visitor entry and vaccination in farms with more than 50 birds, can enhance the control and prevention of HPAI in Quang Ninh and its spread across borders.
It's a threat for the public health that H1N1 (Influenza virus A) causes disease and transmits among humans. WHO (world health organization) declared that the infections caused by the new strain had reached pandemic proportions. The approved neuraminidase inhibitors (Zanamivir and Oseltamivir) and related investigative drug (BCX-1812) are potent, specific inhibitors of influenza A and B viruses. These drugs are highly effective to prevent influenza A and B infections. Early therapeutic use reduces illness duration and respiratory complications. Recently, we found one of the potent inhibitor of erystagallin A ($IC_{50}$ of 2.04 ${\mu}M$) for neuraminidase target, this inhibitor shows most similar structure to its natural substrate, sialic acid. Therefore, we chose 1l7f to get the receptor structure for docking study among many crystal structures. A docking study has been performed in Surflex-Dock module in SYBYL 8.1. In the present study, we attempt to compare the docking studies of pterocarpin and erystagallin A with neuraminidase receptor structure. In the previous report, the methoxy group of pterocarpin had H-bonding with Arg residues. The present docking results for erystagallin A showed the backbone of hydroxyl group shows significant H-bonding interactions with Arg152 and Arg292. The results showed that erystagallin A interacts more favorably with distinctive binding site rather than original active site. Therefore, we tried to reveal plausible binding mode and important amino acid for this inhibitor using docking and site id search calculations of Sybyl. The results obtained from this work may be utilized to design novel inhibitors for neuraminidase.
Avian-origin H3N2 canine influenza A viruses (CIVs) have become enzootic in China and Korea and have sporadically transmitted to North America, causing multiple epidemics. We isolated six CIVs in Korea from CIV-infected patients during 2014-2017 and conducted whole genome sequencing and phylogenetic analyses. Results revealed that CIVs have circulated and evolved in Korea since the early 2000s and then diversified into a new clade, probably contributing to multiple epidemics in China, the USA, and Canada. Our findings bridge an evolutionary gap for understanding the global transmission of CIVs, emphasizing the significance of continuous monitoring of CIVs.
Avian influenza(AI) is an epizootic disease of variable severity caused by type A influenza viruses of the orthomyxovirus group. Chickens were the most frequently affected avian species with AI viruses. There were many outbreaks of fowl plague, now known as highly pathogenic AI(HP AI), throughout the world since Perroncito described the fowl plague in 1978 in Italy. In recent years HPAI viruses of different serotypes such as H5, H7 and H9 has been isolated from humans on several occasions either related with outbreak of HPAI in birds or not. In 1997, one of the most noteworthy events in AI history was the human mortality with H5N1 HPAI virus infection in Hong Kong. Six persons of total 18 persons with clinical signs of influenza were died. Recently the human cases with mortality related with HP AI outbreaks in poultry industry has been increased such as outbreaks of HP AI throughout Asia countries including Korea, Japan, China, Vietnam, Thailand and others in 2003. Although these outbreaks revealed the capable of spreading from birds to human, the capability for transmission between people was not clear. Therefore, this report will review the possibility of HP AI infection in human associated with HPAI outbreak in poultry industry.
Avian influenza viruses (AIV) have been isolated from a wide range of domestic and wild birds. Wild birds, predominantly ducks, geese and gulls form the reservoir of AIV in nature. The viruses in wild bird populations are a potential source of widespread infections in poultry. Active surveillance for AIV infection provides information regarding AIV distribution, and global AIV surveillance can play a key role in the early recognition of highly pathogenic avian influenza (HPAI). Since 2003 in Korea, there have been four H5N1 HPAI outbreaks caused by clade 2.5, 2.2 and 2.3.2. Therefore, improvement of AIV surveillance strategy is required to detect HPAI viruses effectively. This article deals with the major events establishing the role of wild birds in the natural history of influenza in Korea. We highlighted the need for continuous surveillance in wild birds and characterization of these viruses to understand AIV epidemiology and host ecology in Korea.
The highly pathogenic avian influenza A (HPAI) viruses of the H5N1 subtype infect poultry and have also been spreading to humans. Although new antiviral drugs and vaccinations can be effective, rapid detection would be more efficient to control the outbreak of infections. In this study, a phage-display library was applied to select antibody fragments for HPAI strain A/Hubei/1/2010. As a result, three clones were selected and sequenced. A hemagglutinin inhibition assay of the three scFvs revealed that none exhibited hemagglutination inhibition activity towards the H5N1 virus, yet they showed a higher binding affinity for several HPAI H5N1 strains compared with other influenza viruses. An ELISA confirmed that the HA protein was the target of the scFvs, and the results of a protein structure simulation showed that all the selected scFvs bound to the HA2 subunit of the HA protein. In conclusion, the three selected scFVs could be useful for developing a specific detection tool for the surveillance of HPAI epidemic strains.
조류 독감바이러스(avian influenza virus, AIV)는 사람에게서 발생하는 인플루엔자 대유행에 중요한 역할을 한다. 특히 최근 AIV H9N2형에 의한 가금류 감염이 빈번히 나타나고 있어 인체 감염이 상당히 우려되는 실정이다. 본 연구에서는 최종적으로 AIV의 HA와 NA 단백질에 특이적으로 반응하는 항혈청을 생산하고자 하였다. 먼저 감염된 닭에서 분리된 AIV H9N2 한국분리주 A/Ck/Kr/MS96/96의 게놈RNA로부터 RT-PCR 방법으로 HA와 NA 단백질 N-말단부위에 해당하는 염기서열을 증폭하였다. 이렇게 증폭된 DNA단편은 E. coli 발현벡터 pGEX4T-1에 삽입한 후, BL21 세포에서 각각의 GST fusion protein (GST-HAln와 GST-NAn) 형태로 발현하였다. GST-HAln와 GST-NAn은 모두 glutathione sepharose column을 사용하여 분리 및 정제하였으며, 정제된 단배질을 항원으로 사용하여 토끼 항혈청을 생산하였다. 생산된 항혈청의 항원특이성은 AIV H9N2 한국분리주 A/Ck/Kr/MS96/96로 감염된 MDCK 세포의 cell extract를 사용하여 immunoblotting을 수행함으로써 확인하였다. 본 실험결과AIV H9N2의 HA와 NA단백질 N-말단부위에 해당하는 재조합GST fusion protein과, 이들 각각의 단백질에 특이적으로 반응하는 항혈청은 앞으로AIV 감염의 진단 뿐만 아니라, AIV에 대한 기초연구에 중요한 재료로 사용될 것으로 기대한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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