The oocytes from most of animal species accumulate genetic information and other necessary materials during oogenesis for the later use in the early development. Over the years oocyte maturation has been studied extensively both in vitro and in vivo. Particularly, maturation of follicular oocyte in vitro becomes one of the important tools for the studies of basic cell biology, the in vitro technology of animal production, and in particular, the somatic cell cloning by nuclear transfer. We examined meiotic maturation and cumulus expansion in the presence of translation or transcription inhibitors for varying periods of in viかo maturation (IVM) of pig oocyte. In Experiment 1, the results revealed that translation and transcription inhibitors inhibited cumulus expansion and meiotic maturation during 35h of IVM. However, 50 to 60% of the oocytes underwent nuclear maturation without cumulus expansion during 75h of IVM. The rest of the oocytes were arrested at metaphase I (40-50%) in the presence of the inhibitors. In Experiment II, the OCCs were exposed to the drugs only for 15h to examine translation and transcription inhibitors on cumulus expansion and meiotic maturation. Transcription inhibitors for 15h did not arrest meiotic maturation when the oocytes were cultured for subsequent, necessary period of IVM, whereas cumulus expansion was completely inhibited, suggesting that initial 15h is critical transcription activity far cumulus expansion. Translation inhibitors for 15h exposure did not alter cumulus expansion and meiotic maturation during subsequent culture in the absence of the drugs. In Experiment III, the OCCs were exposed to the drugs only for later 30h to examine the influence of transcription and translation inhibitors on oocyte maturation. Interestingly, all meiotic maturation underwent normally with full expansion of cumulus. Similar results were obtained from Experiment IV where 5h of exposure from 15 to 20h of IVM culture to the drugs was performed and subsequently cultured for same period in fresh medium. Taken there results together, both transcription and translation are necessary for nuclear maturation and cumulus expansion, and first 15h IVM for cumulus expansion is critical. The arrested oocytes by the drugs were still capable of undergoing nuclear maturation, although cumulus expansion was affected.
JSTS:Journal of Semiconductor Technology and Science
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제5권1호
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pp.11-16
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2005
This paper presents fabrication process and experimental results of two different types of flexible MEMS biosensors based on polymer/metal multilayer processing techniques. One type of a biosensor is a microelectrode array (MEA) for nerve signal monitoring through implanting the MEA into a living body, and another is a tactile sensor capable of being mounted on an arbitrary-shaped surface. The microelectrode array was fabricated and its electrical characteristics have been examined through in vivo and in vitro experiment. For sensitive skin, flexible tactile sensor array was fabricated and its sensitivity has been analyzed. Mechanical flexibility of these biosensors has been achieved by using a polymer, and it is verified by implanting a MEA to an animal and mounting the tactile sensor on an arbitrary-shaped surface.
It is known that 2-methyl-1,4-naphtoquinone(menadione, MD) induces hepatotoxicities both in vivo and in vitro. These toxic effects are believed to result from oxidative damages to hepatocytes by "active oxygen" species via one-electron reduction of the naphtoquinone. The ginsenoside(GS) is a complex mixture of individual ginsenosides which is known to produce a range of effects on the cardiovascular and central nervous systems. In particular, GS has an antioxidant effect. In this experiment we studied the effect of GS from red panax ginseng(red ginseng total saponin, RGTS) on free radical-induced liver injuries by MD. Administration of MD($150{\mu}M$) caused an increase in aspartate aminotransferase(AST) activities and lipid peroxidation, decrease in alkaline phosphatase(ALP) activities and total bilirubin levels in blood, caused depletion of GSH and changes of antioxidant enzyme(superoxide dismutase, catalase) activities are shown in liver tissue. Administration of RGTS restored the AST levels that increased by MD, but catalase showed no significant changes. RGTS also had an effect of restoring the GSH level and had some synergistic effects with SOD. These data suggest that RGTS may have some protective effects on liver injury which is related with the oxygen free radical.
Kim, Dong Jin;Kim, Yong Jin;Kim, Woong-Han;Kim, Soo-Hwan
Journal of Chest Surgery
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제45권5호
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pp.287-294
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2012
Background: Biologic valved grafts are important in cardiac surgery, and although several types of graft are currently available, most commercial xenografts tend to cause early disfiguration due to intimal proliferation and calcification. We studied the graft failure patterns on non-fixed and glutaraldehyde-fixed pulmonary xenograft in vivo animal experiment. Materials and Methods: Pulmonary valved conduits were obtained from the right ventricular outflow tract of eleven miniature pigs. The grafts were subjected to 2 different preservation methods; with or without glutaraldehyde fixation: glutaraldehyde fixation (n=7) and non-glutaraldehyde fixation (n=4). The processed explanted pulmonary valved grafts of miniature pig were then transplanted into eleven goats. Calcium quantization was achieved in all of the explanted xenograft, hemodynamic, histopathologic and radiologic evaluations were performed in the graft which the transplantation period was over 300 days (n=7). Results: Grafts treated with glutaraldehyde fixation had more calcification and conduit obstruction in mid-term period. Calcium deposition also appeared much higher in the glutaraldehyde treated graft compared to the non-glutaraldehyde treated graft (p<0.05). Conclusion: The present study suggests that xenografts prepared using glutaraldehyde fixation alone appeared to have severe calcification compared to the findings of non-glutaraldehyde treated xenografts and to be managed with proper anticalcification treatment and novel preservation methods. This experiment gives the useful basic chemical, histologic data of xenograft failure model with calcification for further animal study.
Mostly, hypercholesterolemia has been focused on atherosclerosis and coronary heart disease and can be produced by intake of high cholesterol diet. However, toxic effects of cholesterol itself on liver and relationship between intake of high cholesterol diet and hepatic fibrosis have not been clearly investigated. Male Wistar rats were fed diet supplemented with 1.0 % cholesterol and 0.3 % sodium cholate for 12 weeks. Rats were sacrificed at 0, 3, 6, 9 and 12, respectively. Histopathological and blood chemical studies were performed on these animal sets. Total cholesterol, AST, ALT and LDH levels increased from week 3 and maintained around that level throughout the experiment compared to control. However, TG and albumin levels were the same or lower than those of control. Intake of high cholesterol and sodium cholate diet caused hepatic necrosis, macrophage infiltration, steatosis and fibrosis. Following feeding this diet to rats, hepatic necrosis, macrophage infiltration and steatosis markedly increased throughout the experiment, comparing to control. Collagen deposition and myofibroblasts were detected from at week 9 to 12 in the liver. Mast cell increased in proportion to the degree of hepatic damages. In conclusion, these results suggest that intake of high cholesterol diet is a risk factor on hepatic steatosis and fibrosis as well as atherosclerosis and coronary heart disease. Furthermore, this animal model for hepatic fibrosis can be use for application of anti-fibrogenic agents screening in vivo.
Park, Yong-Tae;Park, Si-Yeok;Kim, Min-Keun;Kim, Seong-Gon;Park, Young-Wook;Kwon, Kwang-Jun
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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제35권5호
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pp.284-293
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2013
Purpose: For reconstruction of craniomaxillofacial defects caused by tumor, trauma, infection etc, free flap transplantation with microvascular surgery is a very useful method. Thrombus formation at the anastomosis site is the major cause of graft failure. 4-Hexylresorcinol (4-HR) is generally known as an antiseptic and antiparasitic agent. This study was conducted in order to evaluate the effect of 4-HR on blood coagulation in vitro. In addition, we investigated thrombus formation and endothelial repair of an injured vessel in an animal model. Methods: In the in vitro experiment, we compared blood coagulation time between the 4-HR treated group and normal blood. Thirty rats were used for in vivo animal experiments. After exposure of the right femoral vein, a micro vessel clamp was placed and the femoral vein was intentionally cut. Microvascular anastomosis was performed on all rats using 10-0 nylon under microscopy. The animals were divided into two groups. In the experimental group (n=15), 4-HR (250 mg/kg) mixed with olive oil (10 mL/kg) was administered per os daily. Animals in the control group (n=15) were given olive oil only. The animals were sacrificed at three days, seven days, and fourteen days after surgery and rat femoral vein samples were taken. Vascular patency and thrombus formation were investigated just before sacrifice. Histologic analysis was performed under a microscope. Results: Results of an in vitro blood coagulation test showed that coagulation time was delayed in the 4-HR treated group. The results obtained from an in vivo 4-HR administered rat model showed that the patency of all experimental groups was better at thirty minutes, seven days, and fourteen days after microvascular anastomosis than that of the control group at seven and fourteen days after anastomosis, and the amount of thrombus in the experimental groups was much less than that of the control group. Endothelial repair was observed in the histologic analysis. Conclusion: Findings of this study demonstrated that blood coagulation was delayed in the vitro 4-HR treated group. In addition, good vascular patency, anti-thrombotic effect, and repair of venous endothelial cells were observed in the vivo 4-HR administered rat group.
Vranic, Marina;Knezevic, Mladen;Perculija, Goran;Bosnjak, Kresimir;Leto, Josip
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제22권2호
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pp.225-231
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2009
The objective of this experiment was to study the effects of grass maturity at harvest on the nutritive value of grass silage (GS) in relation to voluntary intake, digestibility, nitrogen (N) utilization and in sacco dry matter (DM) degradability. Silage was cut from a sward dominated by orchardgrass (Dactylis glomerata L.) at the late-vegetative (early-cut), internode elongation (mediumcut) and flowering (late-cut) stages of growth. The DM yield at harvest was the lowest for early-cut silage (5.4 t/ha) and increased to 6.5 and 7.0 t/ha for the medium and late-cut silage respectively. As the crop matured, the crude protein (CP) concentration decreased significantly (p<0.05) and there was a marked increase in acid detergent fiber (ADF) concentration (p<0.001). The three different silages were offered to four 18-month old Charolais wether sheep to measure the voluntary intake, in vivo digestibility and N retention over four 21-day periods in an incomplete changeover design. Silage degradability characteristics were determined using four fistulated sheep to measure DM degradability over 3, 6, 12, 24, 48 and 72 h. There was a linear decrease in the voluntary intake of silage fresh matter, DM, organic matter (OM) and neutral detergent fiber (NDF), digestibility of DM, OM, NDF, ADF and CP, and digestibility of OM in DM (Dvalue) ($P_L<0.01$) as harvesting of grass was delayed. Nitrogen intake, N output in urine, N output in faeces and N balance also linearly decreased ($P_L<0.01$) with postponed harvesting of grass for silage. DM degradability and effective degradability (ED) significantly decreased with increasing maturity of grass at harvest. The results suggest that harvesting date has a significant influence on the nutritive value of GS in terms of intake, digestibility, N balance and in sacco degradability in the rumen. It was concluded that early harvest GS ensured higher intake, digestibility, N intake and DM degradability in comparison with the medium and the late cut GS as a result of improved rumen N efficiency and utilization probably due to a better balance of available energy and protein.
본 연구는 유우의 생산성 향상을 위하여 유우 사료에 fibrolytic enzyme을 첨가하여 반추위내 발효 성상과 비유중인 젖소의 생산성에 미치는 영향을 평가하였다. 본 실험의 결과를 요약하면 다음과 같다. In vitro 실험을 통하여 NDF 함량 수준이 다른 TMR 사료에 fibrolytic enzyme을 3가지 수준(0, 0.05, 0.1%)으로 달리하여 첨가하였을 때 나타난 NDF 소화율은 효소 첨가시 다소 증가하는 경향을 보였으며 NDF 수준별로는 NDF 38 및 43% 수준보다 NDF 34% 수준에서 NDF 소화율이 낮은 경향을 나타내었는데 이는 본 시험 사료의 조성 성분으로 보아 NDF 성분 구성상 hemicellulose 함량이 높아 이 점이 반추위내 NDF 소화율에 영향을 주었다고 사료된다. 반추위액의 pH는 fibrolytic enzyme의 첨가 수준에 의한 영향보다는 NDF 수준에 의해 영향을 더 받은 것으로 나타났으며(P<0.001) NH3-N 생성도 전체적으로 fibrolytic enzyme 첨가에 따른 효과가 나타나지 않았다. Acetic acid의 생성량은 NDF 수준에 의해 유의한 영향을 받았으나 (P<0.05) propionic acid의 생성량은 처리구간에 큰 차이를 나타내지 않았다. Acetic acid와 propionic acid 생성량 모두 효소 첨가에 의한 영향은 유의하게 나타나지 않았고 A/P ratio는 NDF 34% 수준의 fibrolytic enzyme 첨가구에서 무첨가구에 비해 다소 높은 경향을 나타내었다. CMCase의 효소 활성은 NDF 34 및 43% 수준에서 fibrolytic enzyme 첨가구(0.05, 0.1%)가 무첨가구에 비해 높은 효소 활성을 보였다. Xylanase의 효소 활성은 배양 개시 후 0시간대부터 12시간대까지는 효소 활성이 완만히 감소하였고 24시간 이후부터는 급격히 감소하였다. In vivo 실험을 이용하여 fibrolytic enzyme 첨가에 따른 착유우의 생산성 변화 결과는 다음과 같다. Fibrolytic enzyme 첨가에 의한 산유량은 enzyme 첨가구와 무첨가구에서 각각 25.80 및 23.90kg/d로서 enzyme 첨가구에서 약 8% (1.90kg/d) 증가하는 결과를 나타내었다. 유지방 및 유단백 함량의 경우는 fibrolytic enzyme 첨가구와 무첨가구간 차이가 없었으나 일일 생산량으로 환산하여 평가하면 enzyme 첨가시 유성분 생산량이 유의하게 증가하는 결과를 보였다 (P<0.01). 이상의 결과들로 볼 때, in vitro 실험의 경우 fibrolytic enzyme 첨가시 반추위내 발효성상에 명확한 변화를 보여주지 못했지만 enzyme 첨가에 따라 전반적으로 NDF 소화율이 다소나마 증가하는 경향을 보였다. In vivo 실험 결과를 종합하면 착유우 사료에 fibrolytic enzyme을 첨가시 유성분의 변화보다 유량의 증가 효과가 나타났으며 이는, 사료섭취량을 제한한 본 실험의 특성상, 사료섭취량 증진 효과가 아니라 체내 영양소 이용성 증진에 따르는 효과라고 판단되었다. 반추동물의 생산성 향상을 위한 방안으로서 fibrolytic enzyme 이용 효과는 연구자에 따라 다양한 결과를 나타내므로 효소의 적용 방법에 대한 연구가 더 필요하다고 사료된다.
본 논문에서는 카제인 가수분해물의 in vivo 상에서 혈압강하 효과를 알아보고, 혈압강하 기능을 갖는 기능성 펩타이드로서의 활용 가능성을 검토하기 위하여 안전성 검사를 실시하였다. 카제인 가수분해물의 소화관 단백질 분해효소 (펩신, 트립신, 카이모트립신) 내성 시험 결과 카제인 가수분해물은 소화관 효소 처리에 의하여 ACE 저해효과에 차이가 없었으며, 자연발증고혈압쥐를 이용한 혈압강하 실험에서 500 mg/kg을 경구 투여한 결과 12.9% (-28.88 mmHg, P<0.05) 저하하였고, 이들 가수분해물을 30% 난황으로 유화할 경우 15.9% (-30.76 mmHg, P<0.01)의 혈압이 감소하여 난황으로 유화에 의해 다소 혈압강화 효과가 증가하였다. 장기 투여에 의한 혈압강하 효과에서 35일 부터 수축기혈압 감소효과가 나타났으며 12.46% (P<0.05) 감소하였다. 가수분해물의 장기투여에 의한 자연발증고혈압쥐의 체중변화는 대조구와 비교하여 차이가 없었다. 혈압강하 효과를 가지는 카제인 가수분해물의 안전성을 조사한 결과 간장장애 지표로서 사용되는 GOT, GPT 활성에 차이가 없었다. 간장 비대 등의 장기 비대 현상도 없었고 조직병리학적 검사에서도 차이가 없었다. ACE 저해활성을 가지는 카제인 가수분해물은 혈압강하제와 비교하였을 때 비교적 낮은 활성을 나타내지만 항상 섭취하는 식품 중에 존재한다는 점에서 그 유용성이 기대되며, 고혈압 예방을 위한 기능성 식품이나 의약품으로서 개발하기 위해서 앞으로 ACE 저해 펩타이드에 대한 체계적인 안전성 검사가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
The purpose of this study was to investigate effects of increased levels of eugenol, thymol and malate on pH and the concentrations of VFA, lactate and ammonia-N during in vitro ruminal incubation. One Hanwoo beef steer (741 kg) fitted with a rumen cannula was used and fed 0.5 kg/day rice straw and 10 kg/day corn-based concentrate (ratio of concentrate to rice straw = 95 : 5 on DM basis). Three different doses of thymol, eugenol and malate were used. Treatments of the experiment were as follows: Treatments of thymol were control (1g D-glucose/40ml), T1 (1g D-glucose + 40 mg thymol/40 ml), T2 (1g D-glucose + 50 mg thymol/40 ml) and T3 (1g D-glucose + 60 mg thymol/40 ml). Treatments of eugenol were control (1g D-glucose/40 ml), E1 (1g D-glucose + 55 mg eugenol/40 ml), E2 (1g D-glucose + 65 mg eugenol/40 ml) and E3 (1g D-glucose + 75 mg eugenol/40 ml). Treatments of malate were control (1g D-glucose/40ml), M1 (1g D-glucose + 25 mg malate/40ml), M2 (1g D-glucose + 50 mg malate/40 ml) and M3 (1g D-glucose + 100 mg malate/40 ml). The results of this study showed that eugenol and thymol have improved stability of the ruminal fermentation by decreasing lactic acid concentration and increasing ruminal pH. However, it inhibited the production of total VFA, acetate and propionate. Malate also improved stability of the ruminal fermentation by decreasing lactic acid concentration and increasing ruminal pH, but it had a very little effect on ruminal lactate concentrations and pH. On the other hand, malate did not decrease the concentrations of total VFA, acetate and propionate. Therefore, at the low ruminal pH expected in high-concentrate diets, thymol, eugenol, and malate are potentially useful in Hanwoo finishing diets. Further studies are necessary for determining the effectiveness of these additives on in vivo rumen fermentation and animal performance in Hanwoo finishing steers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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