• Title/Summary/Keyword: in vivo and in vitro test

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Inhibition of Wntless/GPR177 suppresses gastric tumorigenesis

  • Seo, Jaesung;Kee, Hyun Jung;Choi, Hye Ji;Lee, Jae Eun;Park, Soo-Yeon;Lee, Seung-Hyun;Jeong, Mi-Hyeon;Guk, Garam;Lee, SooYeon;Choi, Kyung-Chul;Choi, Yoon Young;Kim, Hyunki;Noh, Sung Hoon;Yoon, Ho-Geun;Cheong, Jae-Ho
    • BMB Reports
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    • 제51권5호
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    • pp.255-260
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    • 2018
  • Wntless/GPR177 functions as WNT ligand carrier protein and activator of $WNT/{\beta}$-catenin signaling, however, its molecular role in gastric cancer (GC) has remained elusive. We investigated the role of GPR177 in gastric tumorigenesis and provided the therapeutic potential of a clinical development of anti-GPR177 monoclonal antibodies. GPR177 mRNA expression was assessed in GC transcriptome data sets (GSE15459, n = 184; GSE66229, n = 300); protein expression was assessed in independent patient tumor tissues (Yonsei TMA, n = 909). GPR177 expression were associated with unfavorable prognosis [log-rank test, GSE15459 (P = 0.00736), GSE66229 (P = 0.0142), and Yonsei TMA (P = 0.0334)] and identified as an independent risk predictor of clinical outcomes: GSE15459 [hazard ratio (HR) 1.731 (95% confidence interval; CI; 1.103-2.715), P = 0.017], GSE66229 [HR 1.54 (95% CI, 1.10-2.151), P = 0.011], and Yonsei TMA [HR 1.254 (95% CI, 1.049-1.500), P = 0.013]. Either antibody treatment or GPR177 knockdown suppressed proliferation of GC cells and sensitized cells to apoptosis. And also inhibition of GPR177 suppresses in vitro and in vivo tumorogenesis in GC cells and inhibits $WNT/{\beta}$-catenin signaling. Finally, targeting and inhibition of GPR177 with antibody suppressed tumorigenesis in PDX model. Together, these results suggest GPR177 as a novel candidate for prognostic marker as well as a promising target for treatment of GC patients.

단백질 전달 영역 융합-Bone Morphogenetic Protein-2가 백서 두개골 결손부에서 골 조직 재생에 미치는 효과 (Effect of protein transduction domain fused-bone morphogenetic protein-2 on bone regeneration in rat calvarial defects)

  • 엄유정;조규성;김종관;최성호;채중규;김창성
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제38권2호
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    • pp.153-162
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    • 2008
  • Purpose: Recombining bone morphogenetic protein (BMP) is usually acquiredfrom high level animals. Though this method is effective, its high cost limits its use. The purpose of this study was to evaluate the effect of bone morphogenetic protein-2 with protein transduction domain (BMP-2/PTD;TATBMP-2) on bone regeneration. Rat calvarial defect model and osteoblastic differentiation model using MC3T3 cell were used for the purpose of the study. Materials and Methods: MC3T3 cells were cultured until they reached a confluence stage. The cells were treated with 0, 0.1, 1, 10, 100, 500 ng/ml of BMP-2/PTD for 21 days and at the end of the treatment, osteoblastic differentiation was evaluated usingvon Kossa staining. An 8mm, calvarial, critical-size osteotomy defect was created in each of 48 male Spraque-Dawley rats (weight $250{\sim}300\;g$). Three groups of 16 animals each received either BMP-2/PTD (0.05mg/ml) in a collagen carrier, collagen only, or negative surgical control. And each group was divided into 2 and 8 weeks healing intervals. The groups were evaluated by histologic analysis(8 animals/group/healing intervals) Result: In osteoblastic differentiation evaluation test, a stimulatory effect of BMP-2/PTD was observed in 10ng/ml of BMP-2/PTD with no observation of dose-dependent manner. The BMP-2/PTD group showed enhanced local bone formation in the rat calvarial defect at 2 weeks. New bone was observed at the defect margin and central area of the defect. However, new bone formation was observed only in 50% of animals used for 2weeks. In addition, there was no new bone formation observed at 8 weeks. Conclusion: The results of the present study indicated that BMP-2/PTD(TATBMP-2) have an positive effect on the bone formation in vitro and in vivo. However, further study should be conducted for the reproducibility of the outcomes.

Open Pulled Straw(OPS) 방법에 의한 체외배양 동결수정란의 경산돈 이식 : 예비실험 결과 (Sow Transfer of Cultured Freezing Embryos by Open Pulled Straw(OPS) Methods : Preliminary Results)

  • 김인덕;안미현;허태영;홍문표;석호봉
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.155-163
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    • 2004
  • 본 연구는 도축돈의 난소로부터 난자를 채취하여 체외배양시킨 후 세포 안정제와 원심분리 그리고 OPS를 이용한 유리화동결 하였다. 동결 융해한 수정란을 경산돈에 외과적 또는 비외과적으로 이식하여 자돈을 생산하는 것을 목적으로 수행하였다. ${\cdot}$ 도축돈 난소로부터 채란되어진 돼지 미성숙난은 Funahashi 등(1994) 방법에 따라 체외 성숙-수정-배양하였다. 체외배양액은 glucose-free NCSU 23을 이용하였으며, 5일째에 10% Fatal bovine serum (FBS)을 첨가 배반포로 발달을 유도하였다. ${\cdot}$ 체외배양된 수정란은 7.5${\mu}$g.mL cytochalasin B에 30분 처리 후 13,000 rpm에 13분간 원심 분리하였고, ethylene glycol(EG) 동결액으로 처리한 뒤 OPS를 이용하여 동결${\cdot}$융해하였다. ${\cdot}$ 동결수정란과 비동결수정란을 plastic straw에 loading 한 후 3두에는 경산돈에 외과적 방법으로 각각 100개, 100개의 동결수정란과 대조군으로 34개의 비동결수정란을 이식하였고 다른 3두에는 비외과적 방법으로 각각 150개, 150개의 동결수정란과 대조군으로 100개의 비동결수정란을 각각 이식하였다. 외과적이식돈의 대조군에 사용한 신선수정란은 비경산돈 3두에서 채란하였다. ${\cdot}$이식 결과 6두 모두 지연성 발정을 보였으며 이중 동결수정란 이식돈은 임상적으로 정상이였으나 비동결수정란은 이식한 경우는 자궁내막염과 복강탈장이 관찰되었다. 주요 원인은 시술시 기술의 미숙과 야외수술에 의한 감염, 난자의 이동과 수송에 의한 영향 그리고 주입 미숙 등이 주요 원인인 것으로 생각되며 융해 후 생존효율이 높은 수정란의 준비, 이식 기술의 개선과 자궁상태가 청결한 비경산돈의 이식으로 임신율을 높일 수 있을 것으로 기대된다.

In vitro and in vivo anti-inflammatory activities of Korean Red Ginseng-derived components

  • Baek, Kwang-Soo;Yi, Young-Su;Son, Young-Jin;Yoo, Sulgi;Sung, Nak Yoon;Kim, Yong;Hong, Sungyoul;Aravinthan, Adithan;Kim, Jong-Hoon;Cho, Jae Youl
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제40권4호
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    • pp.437-444
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    • 2016
  • Background: Although Korean Red Ginseng (KRG) has been traditionally used for a long time, its anti-inflammatory role and underlying molecular and cellular mechanisms have been poorly understood. In this study, the anti-inflammatory roles of KRG-derived components, namely, water extract (KRG-WE), saponin fraction (KRG-SF), and nonsaponin fraction (KRG-NSF), were investigated. Methods: To check saponin levels in the test fractions, KRG-WE, KRG-NSF, and KRG-SF were analyzed using high-performance liquid chromatography. The anti-inflammatory roles and underlying cellular and molecular mechanisms of these components were investigated using a macrophage-like cell line (RAW264.7 cells) and an acute gastritis model in mice. Results: Of the tested fractions, KGR-SF (but not KRG-NSF and KRG-WE) markedly inhibited the viability of RAW264.7 cells, and splenocytes at more than 500 mg/mL significantly suppressed NO production at $100{\mu}g/mL$, diminished mRNA expression of inflammatory genes such as inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, tumor necrosis factor-${\alpha}$, and interferon-${\beta}$ at $200{\mu}g/mL$, and completely blocked phagocytic uptake by RAW264.7 cells. All three fractions suppressed luciferase activity triggered by interferon regulatory factor 3 (IRF3), but not that triggered by activator protein-1 and nuclear factor-kappa B. Phospho-IRF3 and phospho-TBK1 were simultaneously decreased in KRG-SF. Interestingly, all these fractions, when orally administered, clearly ameliorated the symptoms of gastric ulcer in HCl/ethanol-induced gastritis mice. Conclusion: These results suggest that KRG-WE, KRG-NSF, and KRG-SF might have anti-inflammatory properties, mostly because of the suppression of the IRF3 pathway.

한약박 및 유기셀레늄이 체내 중금속 축적도에 미치는 영향의 모발 분석과 혈액 및 장기 분석간의 상관도 연구 (A Study of the Efficacy of Hair Analysis Relative to Serum and Organ Analysis for Assessing Heavy Metal Reduction in Living Animals Treated with an Herbal Medicine Remnant and Organic Selenium)

  • 손영희;유지은;허지연;장성표;이병수;이보름;윤선기;이치호
    • 한국축산식품학회지
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    • 제28권2호
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    • pp.222-231
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    • 2008
  • 모발에 축적되는 중금속은 한약박 및 유기셀레늄 같은 기능성 원료에 의해 효과적으로 억제되며, 이는 간 및 혈액으로 대별되는 조직 분석과도 밀접한 상관관계가 보여진다. 또한, 기능성 원료의 여타 효과 즉, 항산화 효과, 항염증 효과 등 부가적인 기능성도 동시에 부여할 수 있는 가치가 있어 산업적인 효용성이 충분히 보장된다고 할 수 있다. 더불어 침체 되어있는 국내 사료산업에 고 부가가치 산업으로서의 기능성 원료를 공급하여 사료산업 활성화에 일조할 수 있으리라 전망한다.

Dependence Potential of the Synthetic Cannabinoids JWH-073, JWH-081, and JWH-210: In Vivo and In Vitro Approaches

  • Cha, Hye Jin;Lee, Kwang-Wook;Song, Min-Ji;Hyeon, Yang-Jin;Hwang, Ji-Young;Jang, Choon-Gon;Ahn, Joon-Ik;Jeon, Seol-Hee;Kim, Hyun-Uk;Kim, Young-Hoon;Seong, Won-Keun;Kang, Hoil;Yoo, Han Sang;Jeong, Ho-Sang
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제22권4호
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    • pp.363-369
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    • 2014
  • Synthetic cannabinoids (CBs) such as the JWH series have caused social problems concerning their abuse liability. Because the JWH series produces euphoric and hallucinogenic effects, they have been distributed illegally under street names such as "Spice" and "Smoke". Many countries including Korea have started to schedule some of the JWH series compounds as controlled substances, but there are a number of JWH series chemicals that remain uncontrolled by law. In this study, three synthetic CBs with different binding affinities to the $CB_1$ receptor (JWH-073, 081, and 210) and ${\Delta}^9$-tetrahydrocannabinol (${\Delta}^9$-THC) were evaluated for their potential for psychological dependence. The conditioned place preference test (unbiased method) and self-administration test (fixed ratio of 1) using rodents were conducted. $K_i$ values of the three synthetic cannabinoids were calculated as supplementary data using a receptor binding assay and overexpressed $CB_1$ protein membranes to compare dependence potential with $CB_1$ receptor binding affinity. All mice administered JWH-073, 081, or 210 showed significantly increased time spent at unpreferred space in a dose-dependence manner in the conditioned place preference test. In contrast, all tested substances except ${\Delta}^9$-THC showed aversion phenomenon at high doses in the conditioned place preference test. The order of affinity to the $CB_1$ receptor in the receptor binding assay was JWH-210 > JWH-081 >> JWH-073, which was in agreement with the results from the conditioned place preference test. However, no change in self-administration was observed. These findings suggest the possibility to predict dependence potential of synthetic CBs through a receptor binding assay at the screening level.

Lactobacillus spp의 Salmonella enteritidis KU 101에 대한 보호 효과와 L. casei YIT 9018의 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Region 염기배열 특성 (Protective Activities of Lactobacillus casei YIT 9018 against Salmonella enteritidis KU101 and Characteristics of 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Region Sequence)

  • 배진성;윤영호
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제45권3호
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    • pp.473-482
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    • 2003
  • Lactobacillus spp. 급여에 의하여 Salmonella enteritidis 감염에 의한 치사율의 저하 성향, 시험관내 억제활성, 장액 내의 총 IgA 농도변화와 Lactobacillus casei.의 16S-23S rRNA intergenic spacer region의 sequence를 측정 비교한 결과는 다음과 같다. Lactobacillus spp. 5균주는 시험관내 Salmo- nella enteritidis 억제활성 측정 결과 모든 시험균주가 억제활성을 나타내었고 그 억제활성의 차이가 통계적인 유의성을 보였으며, 억제활성의 차이는 L. helveticus CU 631 > L. rhamnosus GG ATCC 53103 > L. johnsonii C-4 > L. acidophilus ATCC 4356 > L. casei YIT 9018 인 것으로 나타났다. Lactobacillus spp. 급여에 의하여 Salmonella enteritidis challenge에 의한 치사율 저하효과는 Lb. helveticus CU 631은 대조구의 생존률 62%에 대하여 100%로서 가장 높은 치사율 저하효과를 나타내었고, L casei YIT 9018, L johnsonii C-4의 생존률이 70%와 50%를 나타내었다. Lactobacillus spp.의 16S-23S rRNA intergenic spacer region의 sequence를 측정하고 gene bank에 등록된 균주의 sequence와 비교한 결과 homology의 차이를 나타내었다.

목단피 추출물의 혈당 강하 효과 (Hypoglycemic Effects of Crude Extracts of Moutan Radicis Cortex)

  • 박선민;전동화;박춘희;장진선;박성규;고병섭;김보중;최수봉
    • 한국식품과학회지
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    • 제36권3호
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    • pp.472-477
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    • 2004
  • 한의학에서 당뇨병(소갈) 처방으로 사용되는 육미지황환의 성분 중의 하나인 목단피의 혈당 강하 효과를 조사하기 위해서 목단피를 70% 에탄올로 추출한 후 XAD-4 column으로 분획하여 인슐린 민감성을 향상시키고 ${\alpha}-glucoamylase$ 활성을 억제하는 분획층이 있는지를 조사하였다. 3T3-L1 지방세포에서 소량의 인슐린(1 ng/mL)의 존재하에서 20, 40, 60% 메탄올 분획층은 인슐린 작용을 증가시켜 포도당 흡수를 효과적으로 증가시키는 인슐린 민감성 성분이 함유되어 있었다. 또한 20, 40, 60, 80% 메탄올 분획층에는 ${\alpha}-glucoamylase$의 활성을 억제하여 말토즈와 dextrin의 ${\alpha}-glucoamylase$ 결합이 분해되는 것을 억제시키는 성분이 함유되어 있었다. In vivo에서 실험동물에게 목단피의 70% 메탄올 추출물을 투여한 후 말토즈와 dextrin로 경구부하 검사를 하였을 때 dextrin만이 투여하였을 때에 대조군인 셀룰로즈에 비해 혈당의 상승이 현저하게 낮았고 이것은 dextrin의 소화 흡수의 감소에 의한 것으로 추정된다. 앞으로 효과가 있는 분획층을 더 분리하여 인슐린 민감성 물질과 ${\alpha}-glucoamylase$의 활성을 억제시키는 유효성분을 분리하고자 한다.

천마 괴경썩음병 방제에 효과적인 유기농업자재 선발 (Screening for Effective Organic Farming Materials for the Control of Tuber Rot of Gastrodia elata Caused by Fusarium spp.)

  • 김창수;이한나;김효진;서상영;조종현;이은숙;안민실;김희준
    • 한국유기농업학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.561-574
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    • 2021
  • 본 연구는 Fusarium spp.에 의해 발생하는 천마 괴경썩음병에 대하여 유기농업자재의 방제효과를 검정하기 위해 수행되었다. 유기농업자재 15품목을 대상으로 실내에서 항균활성 검정과 실내시설에서 천마 자마에 포자현탁액 접종을 통한 자마검정을 실시하였다. 이중 미생물제인 7품목의 유기농업자재가 Fusarium spp.의 균사생장을 억제하였다. 천마 자마를 이용한 검정에서 3품목의 유기농업자재가 70% 이상의 우수한 방제효과를 나타냈다. 그 중에서 sulfur가 유효성분인 광물질 제제의 억제효과가 가장 뛰어났다. 그 다음으로 3품목의 유기농업자재를 선발하여 예방적 효과와 치료적 효과를 검정하기 위해 적용하였는데, 예방적 처리를 했을 때 3품목 모두 병 발생에 대한 억제 효과가 상당히 높았다. 특히 sulfur와 B. subtilis의 예방적 효과는 각각 93.2%, 86.9%로 탁월하였으며, 치료적 효과는 73.3%, 60.2%로 상대적으로 낮게 나타났다. 반면, citronella + paraffin oil + ethyl alcohol은 예방적 효과와 치료적 효과가 각각 73.3%, 67.0%로 비슷한 효과를 나타냈다. 이 연구를 통해 시설하우스 내 연작 재배지에서 잘 발생하는 천마 괴경썩음병은 유기농업자재로 충분히 방제될 수 있으며, 예방적 처리가 더욱 중요하며 효과적임이 확인되었다.

사염화탄소를 투여한 흰쥐의 간세포에 대한 식물 추출물들의 보호효과 (Protective Effects of Plant Extracts on the Hepatocytes of Rat Treated with Carbon Tetrachloride)

  • 함영국;김성완
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권8호
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    • pp.1246-1251
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    • 2004
  • 본 실험은 사염화탄소 독성에 대한 몇 가지의 식물소재들- 솔잎, 콩나물, 인진쑥, 표고버섯 - 의 간보호 효과를 조사하기 위하여 수행되었다. 우선적으로 일차 간세포 배양실험에서 식물추출물(열수 또는 에탄올)을 첨가(20 mg/mL 배지)하고 2시간 후에 사염화탄소를 처리(50$\mu$L)한 결과, 배지내의 AST와 ALT 효소활성은 다음과 같았다. 솔잎은 에탄올 및 열수 추출물(P<0.05)에서, 표고버섯은 열수 추출물(p<0.01∼0.05)에서, 그리고 콩나물과 인진쑥은 추출방법에 따라 유의성 있는(p<0.01) 감소를 보였다. 또한, 3주간의 식물 추출물을 첨가한 사료를 사전급여하고 사염화탄소를 2일간 복강주사(1 mg/kg 체중)한 동물실험에서 혈청내의 AST 및 ALT 활성은 간세포 배양의 결과와 유사하게 솔잎과 콩나물에서 낮은 활성효과(p<0.01)를 보였다. 정상군에 대한 사염화탄소의 투여는 지질과산화물과 cytochrome P-450의 함량, 그리고 xanthine oxidase(XOD) 활성을 크게 증가시켰다. 그러나 식물소재 중에서 솔잎, 콩나물, 인진쑥 등을 추출물을 첨가한 실험군에 대한 사염화탄소 처리는 일반적으로 지질과 산화와 XOD 활성증가를 억제하는 것(p<0.01)으로 나타난 반면에, cytochrome P-450의 함량 증가는 솔잎과 인진쑥의 첨가군에서 관찰되었다. 따라서 본 실험에서 cytochrome P-430의 함량증가에 대한 식물 추출물들의 효과는 확실하지 않았지만, 솔잎과 콩나물의 추출물은 항산화관련 실험에서 대부분 탁월한 효과를 나타내었다.