전통발효식초의 면역증진 활성을 규명하기 위하여 서로 다른 원재료로부터 제조된 국내외산 6종의 발효식초로부터 다당류를 분리하고 이들의 화학 특성과 면역증진 활성에 대해 평가하였다. 6종의 발효식초 유래 조다당 중에서 국내 현미 식초 유래 조다당(KBV-0)과 일본 현미식초 유래 조다당(JBV-0) 및 국내 감식초 유래 조다당(KPV-0)에서 발효식초 대비 높은 수율이 얻어졌으며, in vitro 상에서 대식세포를 활성화하여 우수한 interleukin(IL)-6의 생산 유도 활성을 보여 고 면역활성 다당으로 선별하고 이후의 실험에 사용하였다. 한편 선별된 발효식초 유래 3종의 다당 획분 KBV-0, KPV-0 및 JBV-0는 비특이적 면역계에 있어 중요 역할을 담당하고 있는 보체계에 대하여 모두 농도 의존적으로 높은 항보체 활성을 보였지만 KBV-0와 KPV-0의 경우 $1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 각각 $ITCH_{50}$ 62% 및 65%의 활성을 보여 JBV-0에 비해 높은 항보체 활성을 나타냈다. 한편 KBV-0, JBV-0 및 KPV-0는 mouse 복강 macrophage에 대해 특별한 세포독성은 나타내지 않았으며, 대식세포를 자극하여 IL-6, IL-12 및 TNF-${\alpha}$의 생산을 농도 의존적으로 증가시켰다. 하지만 KPV-0의 활성이 각 처리 농도에서 상대적으로 가장 양호한 것으로 나타났다. 이러한 결과로부터 국내산 전통발효식초에는 타 영양성분 외에 특이 다당류를 함유하고 있으며 이들 발효식초 유래 다당이 인체 건강유지에 필수적인 면역기능을 증진시킬 수 있음을 추정하게 하였다.
Vegetable soup has been reported to have anti-inflammatory, anti-oxidative and anti-cancer effects. In this study, five kinds of vegetable soup were developed using a new manufacturing process and compositional changes in raw material, and anti-cancer and immuno-stimulatory activities were evaluated. Cytotoxicity tests based on MTT assay revealed that all vegetable soups had strong inhibitory effects against CT26 mouse colon cancer cells, with soups including Solomon's seal being most effective based on comparison of $IC_{50}$ values. Apoptosis in response to vegetable soup was occurred by 3-5 fold on cancer cells compared to normal cells. Mouse splenocytes increased by 266-541% in response to addition of vegetable soup in an in vitro proliferation experiment. In co-culture with splenocytes and CT26 cancer cells, splenocytes increased by more than 280% in every vegetable soup treatment, while cancer cells decreased by about 60% and cytokines such as $IFN- {\gamma}$ and IL-12 were secreted from splenocytes in high levels only in response to vegetable soup including Solomon's seal. In conclusion, all vegetable soups developed in this study had anti-cancer effects, and vegetable soup including Solomon's seal showed the strongest anti-cancer and immuno-stimulatory effects. These results suggest that functionality of vegetable soup could be increased by changes in manufacturing processes and raw materials composition.
Objectives : Samul-tang(SM). Sagunja-tang(SG). Pamul-tang(PM) and Sipjeondaebo-tang(SJ) was used many diseases such as sterility. menstrual disorder. general prostration. recruitment in Korea. We investigated the immune stimulatory activities of SG. SM. PM and SJ in in vitro. Methods: For comparision for effective of SM. SG. PM and SJ. this study examined anti-inflammation(NO. PGE2 assay). anti-oxidation(DPPH assay) and immune response in in vitro assay. For immune response activities. this study used NO synthesis on RAW 264.7 cells, splenocyte proliferation and cytokine assay(IL-2, IL-4) in splenocyte. Results: The results showed that SG. SM. PM and SJ were no significant effect anti-oxidation and anti-inflammatory effects. For immune response. they showed the splenocyte proliferation and macrophage proliferation. We confirmed that they synthesised NO a dose-dependent manner significantly and secreted the IL-4. Conclusions : These results suggested the SG, SM, PM and SJ had immune stimulatory activity. A efficacy of immune response in them had produced similar results.
Two compounds from Gomisin N and Gomisin A were isolated from the fruits of Schizandra chinensis Baillon. The highest extraction yield as 21.36% was observed in the ethanol extract, compared to the yield obtained form the water extract. The extraction yields of the single compounds were measured to be 0.13 and 0.014 Gomisin A and Gomisin N, respectively. Approximately, 90% of the growth of human stomach adenocarcinoma cancer cells was inhibited after adding 1.0 g/l of the ethanol extract. The growth of the human normal lung cell was limited to 24% after adding the ethanol extract. The water extract lowered the specific secretion of $TNF-\acute{a}$ and IL-6 from T cells, $10.3{\times}10^{-4}\;pg/cell\;and\;12.1{\times}10^{-4}\;pg/cell$, respectively, compared to the ethanol extracts. On the other hand, a treatment with the ethanol extract increased the specific secretion of $TNF-\acute{a}$ and IL-6 from human T cells, to $11{\times}10^{-4}\;pg/cell\;and\;14.3{\times}10^{-4}\;pg/cell$, respectively. The crude ethanol extract had the highest effect on the differentiation of human promyelocytic leukemia cells compared to the other extracts and Gomisin A and N. In general, the biological activities of the extracts gradually decreased as the purification process proceeded, which suggests that higher immunostimulatory activities can be maintained by adding the crude extracts of the fruits rather than by adding a single compound.
본 연구에서는 한국산 생약재인 마황과 복분자를 이용하여 추출과정 중 4$0^{\circ}C$, 6$0^{\circ}C$, 10$0^{\circ}C$로 온도를 달리 하여 기존의 열수 추출방법과 초음파를 병행한 추출을 통하여 면역활성 증진에 다르게 나타나는 효과를 비교 실험하였다. 추출시 모든 열수 추출물들에 비해 초음파 병행 추출물의 추출 수율이 높게 나타났고, 마황 4$0^{\circ}C$ 초음파 병행 추출물이 물 추출물에 비해 2.34배로 가장 높은 추출 수율이 나타냈으며, 10$0^{\circ}C$ 복분자 추출물은 물 추출물에 비해 초음파 병행 추출물이 1.27배 증가한 것으로 나타나 10$0^{\circ}C$ 복분자 추출물을 제외한 모든 추출물들에서 초음파 병행 추출물이 물 추출물에 비하여 1.6배 이상 증가한 것으로 나타났다. 이는 추출시 추출되지 않았던 여러 활성 물질이 초음파 처리에 의해 액체간의 상호 탈기 작용에 의해 추출 수율의 상승 효과를 가져온 것으로 사료된다. 또한, 면역세포의 생육활성 측정결과 모든 조건에서 초음파 병행 추출물이 열수 추출만을 가한 추출물에 비해 생육도가 20∼25% 가량 더 높게 관찰되었다. 더불어 인간 면역세포인 B, T cell을 이용한 cytokine 분비량 측정실험에서도 마찬가지로, 열수 추출물에 비해 초음파를 병행한 추출물에서 그 분비량이 1.5배 정도 더 높게 나타났다. 그 중에서도 복분자 6$0^{\circ}C$, 40 KHz 초음파 병행 추출물이 가장 높은 cytokine 분비량 증가 효과를 나타내었다. 이러한 결과를 비추어 보면, 앞으로 더 많은 실험을 통하여 초음파의 병행 효과와 이를 통한 기능성 소재 및 기능성 식품으로의 고부가가치 창출을 위해 더 많은 연구가 이루어져야 할 것으로 생각되어진다.
백수오의 국내 재배활성화와 함께 농가소득을 높이기 위한 기능성 식품소재로서의 우수성을 산업적으로 응용하고자 백수오 추출물의 면역증진 활성을 평가하였다. 낮은 온도에서 액체상태의 추출물을 효과적으로 농축하고 정제하기 위하여 비열처리 공정인 한외거르기를 통해 분자량(MWCO)이 30 kDa인 여과막을 이용하여 고분자 분획물(CWUF>30) 및 저분자 분획물(CWUF<30)을 얻었으며 이를 큰포식세포 활성화를 통한 면역 증진 효과를 알아보기 위해 RAW 264.7 세포를 이용하여 면역활성의 지표가 되는 산화질소(II) 생성량 및 사이토카인인 TNF-${\alpha}$, 인터루킨-6의 생성량을 측정한 결과, 정상대조군(CON)에 비해 CWUF>30을 처리하였을 때 농도 의존적으로 유의하게 증가하였다. 세포실험을 통해 면역증강활성이 높은 CWUF>30은 정상동물모델에서 면역기관인 비장 및 흉선의 무게를 증가시켰고 비장세포 유래 림프구 증식도 유의하게 증가시켰다. 이는 CWUF>30의 투여가 비장세포를 증식시키는 mitogen 활성이 있음을 보여주며 외부의 항원에 노출 시 항원에 대한 면역반응을 유도하는 면역세포의 수를 증가시켜 항원에 대한 효과적인 방어에 도움을 줄 것으로 보여진다. 또한 CWUF>30을 투여한 마우스 비장세포(splenocyte)의 Yac-1 세포 살해 정도를 측정한 결과, 200 mg/kg BW의 농도로 CWUF>30을 투여한 마우스의 비장세포는 정상대조군(CON)에 비하여 effector 세포와 target 세포의 비율이 10:1에서 유의적으로 증가하였으며 이는 양성대조군(PC)과 유사한 높은 활성을 보이는 것을 확인 할 수 있었다. 이와 같은 결과를 통해 백수오 고분자 분획물(CWUF>30)이 강력한 면역활성 증진효능을 갖고 있으며 각종 바이러스 등 외부 항원들에 대응하여 초기 면역세포를 자극하고 면역매개물질을 생성함으로써 인체의 비특이적 면역반응을 증가시키는데 중요한 역할을 할 수 있을 것으로 기대된다.
Park, Jin-Hong;Lee, Hyun-Soo;Mun, Chul-Hyung;Kim, Dae-Ho;Lee, Hyeon-Yong
한국생물공학회:학술대회논문집
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한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XIII)
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pp.195-199
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2003
물 추출과 초음파를 병행한 모든 조건 중 $60^{\circ}C$에서 초음파 병행 추출물이 보다 높은 추출 수율을 보였고 그 중 복분자가 가장 높은 추출 수율을 보였다. 또한 총 5일간 인간 면역세포인 T-cell의 생육도와 Cytokine 분비량을 확인한 결과도 마찬가지로 물 추출물보다는 초음파를 병행한 추출물을 더 높은 면역 증진 효과를 보였다. 이는 초음파를 통해 발생되는 액체 상호간의 상승작용으로 인하여 생약재중에 함유되어 있는 많은 phenol성 물질 및 식물성분의 증가로 생리활성 물질의 증가를 가져오기 때문이다. 더욱이 $100^{\circ}C$가 아닌 $60^{\circ}C$에서 더 높은 면역 증진활성을 보인 이유는 액체 상태의 과도한 열로 인하여 내부 식물성분의 파괴 및 열 변성을 가져와 이런 결과를 가져온 것으로 생각된다. 이상의 결과로 기존의 $100^{\circ}C$ 물 추출물보다는 $60^{\circ}C$의 비교적 낮은 온도에서 초음파 추출을 통한 생약재의 추출물들이 더 높은 활성을 나타내므로 초음파 추출에 대한 다양한 실험 모델을 통해 더 많은 실험이나 기능성 식품 및 소재 개발에 이용되고자 한다.
토란에 존재하는 점질다당의 새로운 이용방안을 모색하기 위하여 토란으로부터 다당을 분리하여 항보체 활성을 평가하고 구조 분석을 행하였다. 토란으로부터 분리한 조다당 CE를 이온교환수지와 Sephadex G-100 column를 이용하여 정제하였고, 그 중 수율과 활성이 양호한 CE-4a를 최종 획분으로 선정하였다. 초기 면역반응에 중요한 역할을 하는 보체계에 대한 토란 다당의 활성화 여부를 측정한 결과 양성대조군인 PSK에 준하는 강력한 항보체 활성을 보였고, 시료의 농도차이를 두어 실험한 결과 농도 의존적임을 알 수 있었다. CE-4a는 분자량 약 182.4 kDa의 다당체로 구성당 조성을 확인한 결과 Man, Gal 및 GalA를 높은 비율로 함유하고 있었다. 본 당쇄의 결합양식을 규명하기 위하여 methlyation analysis를 행한 결과 CE-4a는 terminal Galp. 3-linked-Galp, 4-linked Manp, 2,4,6-linked Manp를 포함한 총 10종의 결합으로 구성되어 있었다. 또한 CE-4a의 전체구조를 추정하기 위하여 endo-α-(1→4)-polygalacturonase, exo-α-galactosidase 및 endo-β-(1→4)-mannanase를 이용한 연속 가수분해 처리 및 해석을 행하였다. 결과를 종합하면, 토란 유래 다당 CE-4a는 (1→4)-mannan 주쇄로 존재하며 주쇄인 mannose의 C(O)6 위치에서 한가닥 또는 C(O)2, C(O)6 위치에서 동시에 두가닥의 측쇄가 연결되어 존재하고, 측쇄는 주로 galacto oligo당이 측쇄로 분지된 특징이 있음을 확인할 수 있었다.
Objectives: Kyungok-go (KOG) is a traditional multi-herbal medicine commonly used for enforcing weakened immunity for long time. Recently, there are several reports that KOG has anti-inflammatory and immuno-stimulatory activities in many experimental models. However, the protective effects of KOG on neuronal inflammation are still undiscovered. Thus, we investigated the neuro-protective activity of KOG on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated mouse microglia cells. To find out KOG's anti-neuroinflammatory effects on microglial cells, we examined the production of nitrite using griess assay, and mRNA expressions of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2 and interleukin (IL)-1β, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-α using real time RT-PCR. In addition, to examine the regulating mechanisms of KOG, we investigated the protein expression of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and Iκ-Bα by western blot. KOG inhibited the elevation of nitrite, iNOS and COX-2 on LPS-stimulated BV2 cells. Also, KOG significantly inhibited the pro-inflammatory cytokines such as IL-1β, IL-6, and TNF-α on LPS-stimulated BV2 microglial cells. Moreover, KOG inhibited the activation of c-Jun N-terminal kinase (JNK), P38 and degradation of Iκ-Bα but not the activation of extracellular signal regulated kinase (ERK) on LPS-stimulated BV2 microglial cells. These results showed KOG has the anti-inflammatory effects through the inhibition on nitrite, iNOS, COX-2, IL-1β, IL-6, and TNF-α via the deactivation of JNK, p38 and nuclear factor (NF)-κB on LPS-stimulated BV2 microglial cells. Thereby, KOG could offer the new and promising treatment for neurodegenerative disease related to neuroinflammation.
본 연구는 대표적인 떫은 감 품종인 대봉감과 반시의 항산화, 항염증 및 면역증강 효과를 탐색, 비교하였다. 쥐 모델을 대상으로 4주간 대봉감과 반시의 섭취는 식이섭취량과 체중 변화에 영향을 미치지 않았다. B지역의 대봉감 섭취는 고지방식이 대조군 대비 유의적으로 카탈레이즈 활성 수준을 증가시켰으며, 간 조직의 지질과산화물인 말론디알데하이드 수준은 고지방식이 대조군 대비 A지역 대봉감을 섭취한 군에서 유의적으로 감소하였다. 또한 A지역 대봉감의 섭취는 염증인자인 IL-1 beta의 수준을 고지방식이군 대비 유의적으로 감소시켰다. 또 다른 대표적인 염증인자인 IL-6는 고지방식이 대조군과 비교하여 A지역과 B지역의 대봉감을 섭취한 군에서 유의적으로 감소시켰다. TNF-alpha 수준은 A지역의 대봉감을 섭취한 군에서 고지방식이대조군 대비 유의적으로 감소되었다. A지역 대봉감 섭취는 IgG의 수준을 고지방식이 대조군 대비 유의적으로 증가시켰다. IGF-1의 수준은 고지방식이 대조군과 비교하여 A, B, C 지역 대봉감 섭취군에서 증가하였다. 이상의 결과로부터 대봉감의 섭취는 우수한 항염증 효과와 면역증강 효과가 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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