Cytokines are hormone-like proteins which mediate and regulate inflammatory and immune responses. Interleukin-6 (IL-6) is involved in the final differentiation of B cells into antibody-producing cells. Interleukin-8 (IL-8) is a neutrophil chemotactic factor that plays an important role in the recruitment of neutrophil to inflammatory loci. Inflammatory mediators by cells in the gingiva have been implicated in the initiation and progression of periodontitis and oral infection. The purpose of this study was conducted to investigate the effect of lipopolysaccharide (LPS), staphylococcus enterotoxin B (SEB) on production of IL-6 and IL-8 by human gingival and facial dermal fibroblasts. Primary cultured human gingival and facial dermal fibroblasts were incubated with LPS (0.01, 0.1, $1.0{\mu}g/ml$), SEB (0.01, 0.1, $1.0{\mu}g/ml$) or LPS $(0.1{\mu}g/ml)$ plus SEB $(0.1{\mu}g/ml)$. Culture supernatants were collected at 24, 48, and 72 hrs and assessed for IL-6 and IL-8 production by enzyme-linked immunosorbent assay. IL-6 production in gingival fibroblasts stimulated with LPS was higher than that with SEB. IL-6 production by double exposure with LPS plus SEB was amplified in comparison with single exposure of LPS or SEB. IL-6 production in facial dermal fibroblasts was increased only by stimulation with a high concentration of LPS $(1.0{\mu}g/ml)$. Its production in facial dermal fibroblasts by exposure with SEB was decreased in comparison with control, nontreated cells. Therefore, gingival fibroblasts showed higher sensitivity than facial dermal fibroblasts in response to low concentration of LPS. Also, IL-6 production by double exposure with LPS plus SEB was amplified in comparison with single exposure of LPS or SEB. IL-8 production in gingival fibroblasts was enhanced greatly only by stimulation of high concentration of LPS $(1.0{\mu}g/ml)$. That by exposure with SEB was increased only in 24 hrs cultivation. IL-8 production by double exposure with LPS plus SEB was amplified in comparison with single exposure of LPS or SEB. IL-8 production in facial dermal fibroblasts was decreased by LPS and increased only in 48 hrs cultivation by SEB. IL-8 production by double exposure with LPS plus SEB was enhanced only in 48 hrs cultivation in comparison with single exposure of LPS or SEB. therefore, IL-6 and IL-8 production were released at various quantities according to bacterial toxin applied and site of fibroblast harvested. These results suggest that gingival fibroblasts may be concerned with IL-6 and IL-8 related inflammatory response more than facial dermal fibroblasts.
Objectives: This study aims to investigate the correlations between the prevalence of allergic rhinitis (AR) and cytokines among elementary school children in an industrial city, Ulsan, South Korea, and to identify major environmental risk factors associated with AR prevalence. Methods: We conducted a case-control study in June 2009 and February 2010 in order to evaluate the relationship between AR and related cytokines. Data on physician-treated prevalence over the past 12 months and potential risk factors for AR were compiled through a questionnaire from a survey of 339 schoolchildren living in different urban environments. Logistic regression analysis was carried out with propensity score matched data (n=180) to assess the influences of cytokines (IL-13, IL-33, IL-4 and IL-5) on AR prevalence and to determine which environmental factors affected AR. Results: In univariate analysis, the AR prevalence was influenced by family history of AR (mother and siblings), environmental factors (odor condition and irritated symptoms of air pollution), and indoor allergens (D. farinae and D. pteronyssinus). The t-test demonstrated that eosinophils, Immunoglobulin E (IgE), and interleukins (IL-13 and IL-5) were statistically significantly different according to treatment of allergic rhinitis over the preceeding 12 months. The results of the multiple logistic regression analysis showed that a statistically significant association between several factors (such as irritated symptoms of air pollution (OR 4.075, CI 1.735-9.568), IL-13 (OR 0.825, CI 0.734-0.928), odor condition (OR 2.409, CI 0.908-6.389), and AR history of siblings (OR 2.217, CI 0.999-4.921)) and the prevalence of AR was found after adjusting for confounders. Conclusion: These results suggest that AR prevalence is significantly associated with cytokine level, genetic background, and outdoor environmental factors. Although living in a polluted area and genetic background can contribute to an increased risk of childhood AR, cytokine level should be considered as an important factor in the treatment of AR in the last 12 months.
곤충병원세균인 Photorhabdus temperata ssp. temperata(Ptt)는 곤충의 면역반응을 억제시켜 피기생 곤충 체내에서 공생하는 기주 선충의 발육을 도모하게 된다. 또한 Ptt의 변역억제 활성은 Bacillus thuringiensis(Bt)의 병원성을 증가시킨다. 본 연구는 이러한 유용 곤충병원세균의 대량 생산을 위한 저렴한 배지를 선발하기 위해 수행되었으며, 두 연구용 배지(LB, TSB)와 저렴한 산업용 두 배지(MY, M2)를 상호 비교하였다 모든 배양액에 동일한 밀도의 Ptt를 접종하고 배양하였을 때 48 시간 이후 정지상이 나타났다. 그러나 연구용 배양액인 LB와 TSB에서 두 가지 산업용 배양액보다 정지상에서 높은 세균 밀도를 보였다. 네 가지 배지에서 증식된 Ptt 배양액은 모두 배추좀나방(Plutella xylostella) 3령충에 대한 Bt 병원성을 현격하게 제고시켰고, 이들 배지 종류에 따라 치아가 없었다. 네 가지 배양액에서 세균의 증식에 의해 생산되는 대시물질의 양과 배지별 생산되는 대사물질의 동일성을 확인하기 위해 헥산과 에틸아세테이트의 유기용매로 추출했다. 시간별 배양액의 유기용매 추출물질은 세균의 증식과 비슷하게 대사물질의 생산량에서도 증가하는 것을 알 수 있었다. 역상 HPLC를 이용하여 네 가지 세균 배양액 각각에서 대사물질을 분리하였고, 정량적으로 네 가지 대사물질이 서로 다른 배지에서 통계적으로 차이 없이 검출되었다. 본 연구는 비교적 저렴한 두 가지 산업용 배지가 유용 대사물질의 생성에 변화 없이 Ptt 세균을 저렴하게 배양할 수 있다고 제시하고 있다.
Objective : Sinapis alba L. (SA) is a korean traditional herbal medicine that is usually used to prevent or treat inflammatory diseases, such as respiratory infection and rheumatoid arthritis. However, the effects of SA supplementation in vitro on serum antibody levels, splenocyte and peritoneal macrophage immune responses have not yet been determined. In this study, we examined the effect of SA on the production of Th1/Th2 cytokines. Methods : Splenocytes were isolated from naive C57BL/6 mice. Cells were enriched for CD4+ cell populations by first staining the cells with anti-CD4 (BD PharMingen, Calif, USA). CD4+ T cells were selected on a (CS) column, and the flow-through was collected as CD4+ T cells. Isolated cells were activated by overnight incubation on 24-well plates coated with $1{\mu}g/mL$ anti-CD3, $1{\mu}g/mL$ anti-CD28 and with SA ($100{\mu}g/mL$). Primary macrophages were collected from the peritoneal cavities of mice (8-week-old female C57BL/6). The peritoneal macrophages were washed and plated with RPMI-1640 overnight for the experiments. After 48-hours cultures, samples were centrifuged at 2000 rpm for 10 minutes, and the supernatants were stored at $-80^{\circ}C$. Mouse IL-4, IFN-$\gamma$ and TNF-$\alpha$ were quantified using ELISA kits (BioSource International, Camarillo, Calif, USA) according to the manufacturer's protocols. Results : SA at 100ug/ml decreased the generation of Th1 cytokine (IFN-$\gamma$) by 0.5-fold. However, SA has no effect on Th2 (IL-4) production. Conclusions : These results suggest that SA may play an important role in the control of T-cell-mediated autoimmunity by down-regulation of Th1 cytokine (especially IFN-$\gamma$, TNF-$\alpha$). These data may contribute to the design of new immunomodulating treatments for a group of autoimmune diseases.
구강편평태선은 면역매개성 반응으로 유발되는 만성염증질환으로 정의할 수 있으며 그 정확한 원인은 아직 밝혀지지 않은 상태이다. 일반적으로 스테로이드를 이용한 국소적 또는 전신적 치료를 시행하고 있으나 스테로이드 치료에 반응이 없는 환자의 경우에는 치료가 힘들다. Sulfasalzine은 염증성 장질환을 치료하기 위한 약물로 선택되고 있고 류마티스성 관절염에서도 치료제로 사용하고 있다. 염증성 장질환과 구강편평태선에서 발병기전을 살펴보면 공통적인 부분이 많이 발견된다. 전신적으로 투여시 나타나는 부작용을 최소화하고 접근의 편이성을 위하여 Sulfasalzine을 구강편평태선에 국소 도포의 형태로 시도하였으며, 본 연구에서는 성공적으로 치료한 2 치험례를 소개하였다. 첫번째 증례에서는 8주간의 도포(30mg/5ml, 하루3번) 후 증상이 완화되었으며, 두번째 증례에서는 15주간의 도포 후 증상이 완화되었다. 두 증례 모두 스테로이드에 치료반응이 없었던 환자였으며 sulfasalazine 도포 후 현재까지 증상이 완화된 상태로 지내고 있다. 따라서 Sulfasalazine은 구강편평태선환자에서 치료약물로 선택될 수 있다는 결론을 얻었다.
발효 한약의 안전성과 유효성을 평가하기 위하여 CNKI, PubMed, 국내 한의학 저널에서 2000년부터 2011년까지 이루어진 관련 연구를 검색하였다. 발효 한약에 대한 유효성을 검증하기 위한 11개의 무작위 대조군 임상 연구로 국내에서는 면역 기능과 심혈관 기능에 대한 연구가 있었고, 중국에서는 만성 천표성 위염을 비롯한 각종 질환에 대한 임상 연구가 이루어졌다. 그 외의 국가에서는 식도암이나 국소 면역 반응에 대하여 검증하였다. 결과, 발효 한약은 특정 질환에 있어 명백한 효과를 보이고 있으며 부작용 또한 발견되지 않았다. 따라서 발효 한약에 대한 지속적인 관심과 연구가 필요할 것으로 사료된다.
수지상세포(DCs)는 항원을 섭취하여 말초조직에서 lymphoid 기관으로 이동하는 특화된 항원제시세포(APCs)로서 미성숙 T 세포를 자극함으로서 일차적 면역반응에 중심적인 역할을 하기 때문에 DC의 성숙에 대한 조절은 면역학적 치료 접근에 매우 중요한 부분이다. 본 연구에서는 서목태 발효 산물이 주 원료인 사리장에 의한 DC의 성숙 유도 가능성을 조사하기 위해 GM-CSF와 IL-4를 이용하여 골수 유래 수지상세포(BMDCs)를 대상으로 DC의 성숙에 관여하는 주요 인자들의 발현에 미치는 영향을 LPS 처리군과 비교하였다. 사리장은 처리농도 의존적으로 표면 수용체인 CD80 및 CD86의 발현을 증가시켰으나, CD80 발현 증가에 더 유의적이었다. 또한 사리장은 MHC I 보다 MHC II의 발현을 현저하게 증가시켰으며, 이러한 결과는 사리장이 DC의 성숙을 위한 적용에 매우 유의적으로 사용될 수 있을 가능성과 면역활성 효능을 가질 수 있음을 의미하는 것이다.
호중구의 세포사멸은 자연적으로 일어나지만 여러 외부자극에 의한 신호의 전달에 의하여 증가하거나 지연된다. 본 연구에서는 항암, 항생제로 개발된 프레닐 페놀계인 ascochlorin의 유도체 중에서 백혈구 암의 세포사멸을 유도하는 4-O-methyl-ascochlorin (MAC)이 호중구의 자연 세포사멸 및 지연되는 세포사멸에 어떠한 영향을 미치는가와 그 작용기작을 연구하였다. 호중구의 세포사멸은 사람 말초 혈액으로부터 분리하여 세포 배양 시간에 따라 형태 변화, annexin-V/propidium iodide의 염색, 및 DNA 전기영동 등으로 조사하였다. MAC는 농도 및 시간 의존 형으로 호중구의 세포사멸을 증가시켰다. 그러나 granulocyte macrophage-colony stimulating factor나 lipopolysaccharide 등에 의한 세포사멸의 지연은 MAC에 의하여 부분적으로 억제되었다. MAC에 의한 세포사멸의 유도는 pancaspase, caspase-8 및 caspase-3 억제제인 zVAD-fmk. zIETD-fmk, 및 zDEVD-fmk에 의하여 억제되었으며 procaspase-8과 procaspase-3의 단백질 양도 MAC로 처리한 호중구에서 현저히 감소하였다. 미토콘드리아 막 투과성은 MAC에 의하여 현저히 감소하였으나 zVAD-fmk에 의하여 완전히 봉쇄되지 못하였다. 이들 결과 들은 MAC에 의한 호중구 세포사멸의 증가는 caspase-8 및 caspase-3의 활성을 통하여 일어나지만 미토콘드리아의 막성분에는 영향이 없다는 것을 제시하고 있다.
소장 점막하 조직(SIS)은 면역반응이 없어 생체재료로 널리 사용되고 있다. 본 연구에서는 SIS를 스폰지 형태로 제조하여 1-ethyl-3-(dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride(EDC)를 이용하여 경화시켰으며, SIS 스폰지의 구성 윈소를 알아보기 위해 원소분석(EA)과 에너지 분산 X선 분광계(EDS)를 사용해 분석하였다. 또한 SIS 함량과 EDC의 농도에 따른 섬유아세포의 부착도 및 성장도를 알아보기 위해 methylthiazoletetrazolium,(MTT)을 실시하였다. 이 스폰지에 골수 간엽 줄기세포(BMSCs)를 파종해 4주 동안 조직공학적 골분화를 유도하였다. 골분화 유도를 위해 골분화 배지를 사용했으며, 배지에 따른 BMSCs의 세포 성장도와 alkaline phosphatase(ALP) 활성을 측정해 보았다. 또한 역전사 중합연쇄반응을 통해 골분화 여부를 관찰하였다. SEM 관찰 결과 모든 스폰지에서 균일한 형태의 열린 다공이 형성되었음을 확인할 수 있었다. RT-PCR 결과 4주 동안 골분화 배지를 주었을 때 제 I형 교원질이 발현됨을 확인할 수 있었으며, ALP 결과에서도 골분화 배지에서 ALP활성이 높게 나타남을 볼 수 있었다. 결론적으로 제조한 SIS 스폰지는 조직공학적 담체로써 우수한 특성을 보이고 있었으며, 또한 BMSCs의 골분화 유도에도 좋은 결과를 보임으로써 조직공학적 골 재생에 잠재적인 가능성을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.
실용 산란계 병아리에 대해서 시중에서 유통되고 있는 B$_1$생독 뉴캣슬병백신의 효능을 접종방법과 접종횟수를 달리하여 비교하였다. 실용산란계 372수를 93수씩 4군으로 나눈 후 3군에 대해서는 각각 음수. 점안, 분무방법으로 28일령까지 3회에 걸쳐 백신을 접종하였고 나머지 1군은 백신을 접종하지 않은 대조군으로 하였다. 매회 백신접종 2준 4주 후에 강독 바이러스로 공격접종하여 방어율을 조사하고 2주 간격으로 채혈하여, 혈구응집억제(HI) 항체가를 조차하였다. 방어율은 1일령에 1회 접종하는 것보다 2회 또는 3회 접종하는 것이 높았으나 2회. 3회간에는 큰 차이가 없었다. 접종방법간에는 분무방법이 2회 이상 접종할 경우 방어율이 높았으며 다음은 점안, 음수 순이었다. 백신을 2회 또는 3회 접종하여도 HI항체가는 대조군에 비해 크게 상승하지 않았다. 전반적으로 방어율이 낮은 것은 백신의 역가가 낮기 때문으로 생각되었다. 공격접종 후 뉴캣슬병 임상증상은 84% 이상에서 원기 및 식욕저하와 기면을 보였고 27%에서 설사, 15%에서 호홉곤란, 10%에서는 사경을 보였다. 부견소견상 출혈반은 십이지장(51%), 기관(36%), 회장(13%), 맹장편도(11%), 선위(10%) 순으로 관찰되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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