• 제목/요약/키워드: i-motif

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AFM 캔틸레버를 이용한 i-motif DNA의 구조 변화에 미치는 화학적 환경에 대한 연구 (Study on the chemical environment for conformational change of i-motif DNA by atomic force microscopy cantilever)

  • 정휘헌;박진성;양재문;이상우;엄길호;권태윤;윤대성
    • 센서학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.214-220
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    • 2010
  • Three-dimensional(3D) structure of specific DNA can be changed between two conformations under an external environmental transition such as pH and salt concentration variations. We have experimentally observed the conformational transitions of i-motif DNA using AFM cantilever bioassay. It is shown that pH change of a solvent induces the bending defleciton change of a cantilever functionalized by i-motif DNA. This indicates that cantilever bioassay enables the label-free detection of DNA structural changes upon pH change. It is implied that cantilever bioassay can be a de novo route to quantitatively understand the conformational transitions of biological molecules under environmental changes.

Streptomyces coelicolor A[3]2에서 Mycothiol 생합성에 관여하는 Inositol Monophosphatase 유전자의 클로닝 및 발현 (Cloning and Expression of Inositol Monophosphatase Gene from Streptomyces coelicolor A[3]2)

  • 김진권;최학선;김성준;김시욱
    • KSBB Journal
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    • 제19권6호
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    • pp.462-466
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    • 2004
  • S. coelicolor A3(2)로부터 항산화 저분자 thiol분자인 MSH를 HPLC 및 monobromobimane 형광 검출 방법으로 분리${\cdot}$정제하여 그 존재를 확인하였다. 표준물질인 MSH-bimane과 동일하게 용출되는 MSH 분획을 확인하였으며 여러 thiol 분획 중 MSH 분획이 가장 많은 것으로 보아 MSH가 S. coelicolor의 주된 thiol 화합물로 판단되었다. MSH 생합성에 관여하는 효소 중 I-1-Pase의 유전자의 기능을 알아보기 위하여 이 유전자를 방선균에서 분리한 후 대장균에 클로닝하여 과도발현시켰다. 발현된 I-1-Pase를 Ni-NTA column을 사용하여 정제하였다. 정제된 I-1-Pase는 soluble protein으로 281개 아미노산으로 구성되어 있으며 분자량은 32 kDa이었다. 인간 및 대장균의 I-1-Pase와 각각 24와 $25\%$의 sequence homology를 보였으며, 기존의 I-1-Pase가 가지고 있는 공통의 I-1-Pase motif A와 motif B를 S. coelicolor A3(2)도 가지고 있는 것으로 확인되었다.

Involvement of Amino Acids Flanking Glu7.32 of the Gonadotropin-releasing Hormone Receptor in the Selectivity of Antagonists

  • Wang, Chengbing;Oh, Da Young;Maiti, Kaushik;Kwon, Hyuk Bang;Cheon, Jun;Hwang, Jong-Ik;Seong, Jae Young
    • Molecules and Cells
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    • 제25권1호
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    • pp.91-98
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    • 2008
  • The Glu/$Asp^{7.32}$ residue in extracellular loop 3 of the mammalian type-I gonadotropin-releasing hormone receptor (GnRHR) interacts with $Arg^8$ of GnRH-I, conferring preferential ligand selectivity for GnRH-I over GnRH-II. Previously, we demonstrated that the residues (Ser and Pro) flanking Glu/$Asp^{7.32}$ also play a role in the differential agonist selectivity of mammalian and non-mammalian GnRHRs. In this study, we examined the differential antagonist selectivity of wild type and mutant GnRHRs in which the Ser and Pro residues were changed. Cetrorelix, a GnRH-I antagonist, and Trptorelix-2, a GnRH-II antagonist, exhibited high selectivity for mammalian type-I and non-mammalian GnRHRs, respectively. The inhibitory activities of the antagonists were dependent on agonist concentration and subtype. Rat GnRHR in which the Ser-Glu-Pro (SEP) motif was changed to Pro-Glu-Val (PEV) or Pro-Glu-Ser (PES) had increased sensitivity to Trptorelix-2 but decreased sensitivity to Cetrorelix. Mutant bullfrog GnRHR-1 with the SEP motif had the reverse antagonist selectivity, with reduced sensitivity to Trptorelix-2 but increased sensitivity to Cetrorelix. These findings indicate that the residues flanking $Glu^{7.32}$ are important for antagonist as well as agonist selectivity.

Dynamic Profile of the Copper Chaperone CopP from Helicobacter Pylori Depending on the Bound Metals

  • Hyun, Ja-shil;Park, Sung Jean
    • 한국자기공명학회논문지
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    • 제20권3호
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    • pp.76-81
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    • 2016
  • Copper is an elemental ion in living organisms. CopP from Helicobacter Pylori (HpCopP) is a copper(I)-binding protein and was suggested as regulator of copper metabolism in vivo. Previously, the metal binding property of HpCopP for Ag(I), Cu(I), and Cu(II) as well as the tertiary structure of HpCopP was shown. In this study, the dynamic profiles of HpCopP depending on metal binding were studied using ${^1H}-^{15}N$ steady-state NOE analysis. The heteroNOE experiment was performed for apo-CopP or metal-bound CopP. The obtained NOE values were analyzed and compared to figure out the effect of metals on the structural flexibility of HpCopP. As a result, Ag(I) and Cu(I) ions improved the rigidity of the structure while Cu(II) ion increased the flexibility of the structure, suggesting the oxidation of the CXXC motif decreases the structural stability of HpCopP.

KLF4에 의한 CCSP 발현 억제 (Repression of CCSP Expression by KLF4)

  • 곽인석
    • 생명과학회지
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    • 제28권12호
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    • pp.1432-1437
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    • 2018
  • 클라라 세포에 의해 생산되는 클라라 세포 분비 단백질(CCSP)은 폐를 염증으로부터 보호하는데 중요한 역할을 한다. 이 연구는 CCSP 유전자 발현에 관여하는 프로모터 부위에서 repressor에 결합할 수 있는 cis-element를 밝히는데 있다. DNaseI footprinting법을 사용하여 mCCSP 프로모터의 -812에서 -768 bp (45 bp) 사이에서 3 개의 보호된 motif를 찾았고, 그 중 하나인 D3 모티프(GCCTGGGAA)는 다른 3 가지 동물들과 염기서열이 100% 일치하였다. 45 bp를 사용한 EMSA 분석에서 D3 모티프(GGCCTGGGAA)는 45 bp에 높은 경쟁을 보였으나, 변이된 D3 모티프가 ($G{\underline{AA}}TG{\underline{TT}}AA$)를 사용되었을 때, 경쟁은 상당히 감소되었다. 이는 mCCSP 프로모터의 45 bp의 D3 모티프가 단백질과 DNA 상호 작용을 위한 중요한 element임을 시사한다. -756-Luc과 -812-Luc을 이용한 transient transfection 분석 결과, -756-Luc은 -812-Luc보다 CCSP의 발현이 현저하게 감소되었다. 이는 mCCSP 프로모터의 45 bp부위가 repressor의 결합 부위로서 기능을 할 수 있음을 의미한다. -812-Luc에 KLF4를 co-transfection 한 결과, KLF4는 CCSP 발현을 현저하게 저해(repression)함을 밝혔다. 그러나 -768-Luc이 사용되었을 때 KLF4에 의한 repression은 관찰되지 않았다. 이것은 KLF4가 CCSP 유전자의45 bp에 결합할 수 있고, 전사 억제자 역할을 하여 mCCSP 발현을 억제 할 수 있음을 명확히 보여 준다. 또한 이는 45 bp 중, D3 모티프가 KLF4의 결합에 강하게 관여 함을 시사한다. 이 반응에 KLF4에 대한 항체가 첨가되었을 때는 super-shifted 밴드가 관찰되었으나, SP1에 대한 항체가 사용되었을 때는 관찰되지 않았다. 이는 KLF4가 CCSP 프로모터의 45 bp 영역에 결합하여 repressor기능 할 수 있고, D3 모티프가 KLF4의 특이적 결합에 관여 할 수 있음을 시사한다.

The Effect of the Oxygen Scavenging System on the pH of Buffered Sample Solutions: in the Context of Single-molecule Fluorescence Measurements

  • Kim, Sung-Eun;Lee, Il-Buem;Hong, Seok-Cheol
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제33권3호
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    • pp.958-962
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    • 2012
  • In single-molecule fluorescence experiment, the oxygen scavenging system is indispensable for avoiding photo-bleaching of fluorescent dyes. Here we report that the gloxy-based oxygen scavenging system commonly used in single molecule fluorescence experiments can disturb the solution pH considerably. To track in situ pH change, we utilized the pH-sensitive conformational transition of i-motif and examined the transition with ensemble and single-molecule FRET measurements. Based on our results, we also suggested several practical remedies for the stability of the solution pH.

레이스의 범주와 분류체계에 관한 연구 (A Study on the Category and Classification System of Lace)

  • 김희선
    • 한국의상디자인학회지
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    • 제16권4호
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    • pp.117-136
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    • 2014
  • The purpose of this study is to present a classification system of the hand-made and machine-made lace according to the configuration method and re-make the category and definition of lace to consider the emergence and development of major laces techniques. The re-made category and definition of the lace is as follows. The lace usually consists of ground and motifs, however, the techniques of netting and sprang are suitable for making ground than motif, so I think it is appropriate to exclude them from the category of the lace. Many scholars are excluded openwork embroidery fabric from the category of the lace. But, an openwork embroidery fabric is the basis of a needle point lace called true lace and is consist of motif and ground. I think it is appropriate to include it in the category of the lace. I think it is also appropriate to include in the category of the lace that the eyelet embroidery fabric which mimics the openwork embroidery fabric in the machine. Lace is redefined that a fabric with openwork decoration consists of motif and ground, constructed by a variety of ways such as plaiting, twisting, looping, knotting of threads or embroidering by hand or machine. The classification of the lace is presented as follows. Hand-made lace is classified bobbin lace, needle point lace, embroidery lace, knotted lace, crochet lace, and knitting lace. Machine-made lace is classified raschel lace, leaver lace, torchon lace, and machine-made embroidery laces which include tool lace, eyelet embroidery lace, chemical lace, etc.

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NMR Studies on the Structure of Human Annexin I

  • Han, Hee-Yong;Bang, Keun-Su;Na, Doe-Sun;Lee, Bong-Jin
    • 한국생물물리학회:학술대회논문집
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    • 한국생물물리학회 1996년도 정기총회 및 학술발표회
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    • pp.17-17
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    • 1996
  • Annexin I is a member of the annexin family of calcium dependent phospholipid binding proteins and has anti-inflammatory activity by inhibiting phospholipase A$_2$ (PLA$_2$). Recent X-ray crystallographic study of annexin I identified six Ca$\^$2+/ binding sites, which was different types (type II, III) from the well-known EF-hand motif (type I). (omitted)

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부안댐 기수역내부의 염생식물에 관한 생태적 주제성 (Ecological Motif on the Salt-Water Plants of Brackish Area in Buandam)

  • 오현경;변무섭;이명우;황보철
    • 한국환경생태학회지
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    • 제20권3호
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    • pp.311-318
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    • 2006
  • 본 연구는 전북부안군 부안댐 기수역 내부의 염생식물 현황과 군락 종조성 및 상재도를 분석하여 다음과 같은 결론을 도출하였다. 염생식물에는 6과 13속 14종 2변종 총16종류가 확인되었으며, 이 중 벼과식물이 5종류, 명아주과와 국화과 식물이 각각 4종류로 분석되었다. 염생식물 군락으로는 갯잔디-비쑥군락, 비쑥-갯사상자군락, 갯질경-비쑥군락, 비쑥구락, 칠면초군락, 갯보리군락, 나문재군락, 갯잔디군락, 갯잔디-칠면초군락, 모새달군락 등 총 10개 군락으로 구분되었다. 또한, 상재도 분석 결과, 군락구분종에는 I 에 모새달, 갯사상자, 갯질경, 칠면초, 갯보리, 나문재 등이 확인되었으며 II 에는 갯잔디, 비쑥 등으로 분석되었으며, 수반종에는 I 에 갯보리, 갯강아지풀, 물피, 모새달, 가는갯능쟁이 퉁퉁마디, 갯메꽃, 갯개미취 등이, II 에 갯잔디, 나문재, 사철쑥 등이, III 에 칠면초와 비쑥, IV에 갯사상자, V에는 갯질경과 큰비쑥으로 분석되었다. 특히, 한정된 공간에 다양한 염생식물이 출현하고 기수역의 녹화에 기여할 수 있는 모새달군락을 중심으로 생태학습이 가능한 공간으로 기수역의 생태적 주제성을 발현할 수 있는 적지이다.

Detection of Lamivudine-Resistant Mutations of HBV DNA Polymerase Gene Using PCR-Direct Sequencing

  • 이경옥
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제38권3호
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    • pp.196-202
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    • 2006
  • 최근 만성 B형간염의 치료에 B형간염 바이러스 복제를 저해하여 감염력을 약화시키는 lamivudine이 많이 사용되고 있다. 그러나 이 약제를 장기간 복용할 경우 B형간염 바이러스 DNA polymerase 유전자의 YMDD motif에 아미노산 치환을 일으켜 lamivudine 저항성 B형간염 바이러스가 나타나는 점이 문제시 되고 있다. 본 연구의 목적은 lamivudine 치료를 받은 만성 B형간염 환자에서 PCR-direct sequencing 법을 이용하여 B형간염 바이러스 DNA 중합효소 유전자의 YMDD motif(codon 552)와 codon 528에서 돌연변이 출현빈도를 구하고, HBeAg과의 관련성을 보고자 하였다. 방법은 만성 B형간염 환자의 혈청에서 DNA를 추출하고 DNA 중합효소 유전자의 codon 552와 528을 포함하는 부위에서 선택한 두 쌍의 primer를 이용하여 nested PCR을 실시하였다. 증폭된 PCR 산물은 2% agarose gel에서 전기영동을 한 후, 자동염기서열분석기를 이용하여 sequencing을 실시하였다. 총 207명 중에서 돌연변이는 124명(60%)에서 발견되었으며, 남, 녀에서 차이는 발견되지 않았고, 돌연변이군에서 비돌연변이군에 비해 평균나이가 약간 높게 나타났으나 유의성은 없었다. Codon 552에서 단일돌연변이로는 M552I(50.8%)가 가장 높게 나타났고, 다음으로 M552V(43.5%), M552I/V(5.7%)의 순서로 나타났다. Codon 528에서는 67.0%의 L528M 돌연변이가 발견되었다. Codon 552와 codon 528에서 동시에 발생한 중복돌연변이로는 M552V/L528M(43.6%)이 가장 높게 나타났고, 다음으로 M552I/L528(33.1%) 그리고 M552I/L528M(17.7%)의 순으로 나타났다. Codon 552에서 serine 돌연변이(M528S)는 발견되지 않았으며, L528M은 M552V 돌연변이와 거의 동시에 검출되었다. 본 연구에서 만성 B형간염환자에서 HBeAg의 유무와 lamivudine 돌연변이율과의 상관성은 발견되지 않았으며, PCR-direct sequencing법은 고가의 자동염기서열분석 장비와 숙련된 기술자가 필요하다는 문제점은 있으나, 검체 수가 많은 큰 임상검사실에서는 활용성이 클 것으로 판단된다. 향 후 lamivudine으로 인한 HBV 돌연변이형과 환자의 임상결과의 관련성에 대한 연구가 추가적으로 실시되면, lamivudine을 복용하는 만성 HBV 환자의 치료와 예후에 유용할 것으로 사료된다.

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