Human glutamate dehydrogenase isozymes (hGDH1 and hGDH2) have been known to be inhibited by palmitoyl-CoA with a high affinity. In this study, we have performed the cassette mutagenesis at six different Cys residues (Cys59, Cys93, Cys119, Cys201, Cys274, and Cys323) to identify palmitoyl-CoA binding sites within hGDH2. Four cysteine residues at positions of C59, C93, C201, or C274 may be involved, at least in part, in the inhibition of hGDH2 by palmitoyl-CoA. There was a biphasic relationship, depending on the levels of palmitoyl-CoA, between the binding of palmitoyl-CoA and the loss of enzyme activity during the inactivation process. The inhibition of hGDH2 by palmitoyl-CoA was not affected by the allosteric inhibitor GTP. Multiple mutagenesis studies on the hGDH2 are in progress to identify the amino acid residues fully responsible for the inhibition by palmitoyl-CoA.
Kim, Da Hye;Kim, Min Yeong;Hwangbo, Hyun;Ji, Seon Yeong;Park, Seh-Kwang;Park, Sung-Ho;Kim, Mi-Young;Choi, Yung Hyun
Journal of Life Science
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v.32
no.8
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pp.647-658
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2022
Particulate matter (PM) is known to be involved in the onset and progression of various diseases by promoting oxidative and inflammatory reactions as air pollutants containing various small particles that are harmful. In this study, the protective efficacy of herbal medicines was evaluated in human corneal epithelial cells (hCECs) to select natural products that can protect the eye, the primary organ directly exposed to external pollutants from PM. As a result, five candid ate herbal medicines [Cheonmundong, Asparagus Rhizome; Seokchangpo, Aciru Gramineri Rhizoma; Hwangryeon, Coptidis Rhizoma; Gamgug, Chrysanthemi Indici Flos; and Geumjanhwa (Marigold flower petals)] which showed inhibitory efficacy on PM2.5-induced cytotoxicity, were selected from among 12 candidate herbal medicines. To evaluate the antioxidant activity of these candidate substances, the reactive oxygen species (ROS) scavenging ability was investigated, and it was found that the extracts of Seokchangpo, Cheonmundong and Hwangryeon showed a significant inhibitory effect on PM2.5-induced ROS production, which was correlated with the preservation of mitochondrial activity. In addition, it was confirmed that they could block DNA damage caused by PM2.5 through analysis of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine generation and phosphorylated-H2A histone family member X (γ- H2AX) expression. Furthermore, the increase in inflammasome activity and inflammatory response in PM2.5-treated hCECs was also canceled in the presence of these extracts. Although additional studies are needed, the results of this study will be used as primary data to find novel natural compounds that protect hCECs from PM.
This study investigates the kimchi from Jangsu area (JSK) and its comparison with commercial kimchi (CMK). We conducted a sensory evaluation for the pH, titratable acidity, salinity, hunter's color values and mechanical characteristics of kimchi. The pH of JSK is significantly higher than CMK throughout the fermentation (p<0.001). At 15 days, JSK reached the stage of optimal maturity for pH 4.23~4.55 and CMK showed pH 3.96~4.00 as conditions after the optimal maturity (p<0.001). From the results of acidity analyses, CMK also showed higher acidity values than JSK (p<0.001), indicating that the rate of fermentation progress was faster in CMK. Salinity of JSK was a litter higher than CMK1 and CMK2 (p<0.001) and JSK indicated significantly higher L, a, b values during fermentation (p<0.001). Moreover, the textural values were significantly higher in JSK2 and JSK3 retaining hardness of the tissues. In the sensory assessment, the color, flavor, crispness, taste, and overall preferences were higher in JSK3 at 15 days and 30 days than CMK. Therefore, it seems necessary for recipe developments of kimchi with local characteristics in order to industrialize kimchi by using alpine crops at Jangsu area.
Park, J.M.;M.C. Whang;B.H. Bae;Kim, S.Y.;Kim, C.J.
Proceedings of the ESK Conference
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1997.04a
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pp.165-175
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1997
Brain potential is described by using Euler Lagrange equation derived from Lagrangian based on SMNI(Statistical Mechanics of Neocortical Interaction). It is assumed that excitatory neuron firing is amplitude-modulated dominantly by the sum of two modes of frequency ${\omega}and 2 {\omega}$ . Time series of this neuron firing is numerically calculated. $I_{L}$related to low frequency distribution of power spectrum, $I_{H}$high frequency, and S(standard deviation) are introduced for the effective extraction of the dynamic property in this simulated brain potential. $I_{L}$,$I_{H}$, and S are obtained from EEG of 4 persons in rest state and are compared with thoretical results. It is of importance in various fields related to human well-being such as comfort-pursued industrial design, psychology, medicine to characterize human emotional states by EEG analysis. The pleasant and unpleasant sensation among various emotional states would be demonstrated to be determined in terms of ${\epsilon}$ and ${\gamma}$ parameters estimated by the simulated $I_{L}$-$I_{H}$-S relations.
The purpose of the present study was to prepare multivesicular liposomes with a high drug loading capacity and to investigate its potential applicability in the oral delivery of a peptide, human epidermal growth factor (rhEGF). The multivesicular liposomes containing rhEGF was prepared by a two-step water-in-oil-in-water double emulsification process. The loading efficiency was increased as rhEGF concentration increased from 1 to 5mg/mL, reaching approximately $60\%$ at 5 mg/mL. Approximately $47\%$ and $35\%$ of rhEGF was released from the multivesicular liposomes within 6 h in simulated intra-gastric fluid (pH 1.2) and intra-intestinal fluid (pH 7.4), respectively. rhEGF-loaded multivesicular liposomes markedly suppressed the enzymatic degradation of the peptide in an incubation with the Caco-2 cell homogenate. However, the transport of rhEGF from the multivesicular liposomes to the basolateral side of Caco2 cells was two times lower than that of the rhEGF in aqueous solution. The gastric ulcer healing effect of rhEGF-loaded multivesicular liposomes was significantly enhanced compared with that of rhEGF in aqueous solution; the healing effect of the liposomes was comparable to that of the cimetidine in rats. Collectively, these results indicate that rhEGF-loaded multivesicular liposomes may be used as a new strategy for the development of an oral delivery system in the treatment of peptic ulcer diseases.
Extracellular production of recombinant human bone morphogenetic protein-7 (rhBMP-7) was carried out through the fermentation of Bacillus subtilis. Three significant fermentation conditions and medium components were selected and optimized to enhance the rhBMP-7 production by using the response surface methodology (RSM). The optimum values of the three variables for the maximum extracellular production of rhBMP-7 were found to be 2.93 g/l starch, 5.18 g/l lactose, and a fermentation time of 34.57 h. The statistical optimization model was validated with a few fermentations of B. subtilis in shake flasks under optimized and unoptimized conditions. A 3-L jar fermenter using the shake-flask optimized conditions resulted in a higher production (413 pg/ml of culture medium) of rhBMP-7 than in a shake flask (289.1 pg/ml), which could be attributed to the pH being controlled at 6.0 and constant agitation of 400 rpm with aeration of 1 vvm.
A technique is described for producing high resolution G- and R-banded chromosomes in human peripheral lymphocyte cultures. Cultured lymphocyte cells were exposed to ethidium bromide ($10{\mu}g/ml$) and colcemid ($0.02{\mu}g/ml$) each for 2.5h and 0.5h prior to harvest for high resolution G-banded chromosomes. High resolution R-band patterns were obtained by BrdU substitution which was revealed by the fluorochrome-photolysis-Giemsa staining technique. These methods are easy to perform and highly reliable. The data on relative length of chromosomes at the four mitotic stages are presented in units of percentage of haploid autosome length. The characteristic patterns of GTG-bands (G-bands after trypsin and Giemsa) and RBG bands (R-bands after BrdU and Giemsa) were analyzed.
Park, Jae-Hwan;Kim, Jae-Lip;Shin, Eun-Hee;Guk, Sang-Mee;Park, Yun-Kyu;Chai, Jong-Yil
Parasites, Hosts and Diseases
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v.45
no.1
s.141
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pp.33-38
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2007
To know the prevalence of heterophyid trematodes among inhabitants of a southern coastal village, i.e., Sacho-ri, Gangjin-gun, Jeollanam-do(Province), 82 stool samples were examined on helminth eggs and protozoan cysts using Kato-Katz and formalin-ether sedimentation techniques. Total 33 people(40.2%) were positive for trematodes(Heterophyes nocens; 15 people, Pygidiopsis summa; 3, Metagonimus sp.; 4, Clonorchis sinensis; 7, Gymnophalloides seoi; 6) and/or protozoa(Entamoeba coli; 3). Among intestinal trematode egg positive cases, 17 were treated with praziquantel and their whole diarrheic stools were collected after purgation. Adult flukes of H. nocens(number of specimens=1,294), P. summa(386), Stellantchasmus falcatus(5), Stictodora lari(4), and Heterophyopsis continua(1) were collected using a stereomicroscope. To know the source of human H. nocens infections in this village, metacercarial infections in mullets(10) were examined and most H. nocens metacercariae(101/105, 96.2%) were found in the trunk portion. From above results, the surveyed coastal village has been newly known as an endemic focus of human H. nocens infection and consuming raw mullets was the presumable source of human heterophyid infections.
Previously we observed that human adipose-derived stem cells (hADSCs) could form aggregation during culture in the presence of human serum (HS). In the present study, we have examined if the aggregation might result from the cell migration and analyzed the difference of cell adhesivity after culture in various conditions. When cells were cultured in fetal bovine serum (FBS) alone, there was no morphological change. Similarly, cells pretreated with FBS for 1 day or cultured in a mixture of FBS and HS showed little change. In contrast, cells cultured in HS alone exhibited formation of cell-free area (spacing) and/or cell aggregation. When cells cultured in FBS or pretreated with FBS were treated with 0.06% trypsin, almost cells remained attached to the dish surfaces. In contrast, when cells cultured in HS alone were examined, most cells detached from the dish by the same treatment. Treatment of cells with forskolin, isobutylmethyl xanthine (IBMX) or LY294002 inhibited the formation of spacing whereas H89 or Y27632 showed little effect. When these cells were treated with 0.06% trypsin after culture, most cells detached from the dishes as cells cultured in HS alone did. However, cells treated with IBMX exhibited weaker adhesivity than HS alone. Based on these observations, it is suggested that HS treatment might decrease the adhesivity and induce three-dimensional migration of hADSCs, in the latter of which cAMP signaling could be involved.
Follicular fluid(FF) of mammalian Graafian follicles contains various kinds of proteins and proteinases that are believed to play important roles during follicular growth oocyte maturation and ovulation of mature oocytes. Previous studies of human FF(hFF) demonstrated the presence of many serine/threonine proteinases and matrix metalloproteinases such as gelatinases, however, little is known about the caseinases. Present study was aimed to examine the presence and the property of caseinolytic enzyme in hFF. Using casein zymographic method, it was found that hFF, human adult serum and cord serum exhibited one intense 80 kDa and another weak 78 kDa bands having caseinolytic activity. When inhibitors were added to the zymographic substrate buffer, caseinolytic activity of both 80 kDa and 78 kDa proteins were inhibited by othylenediarnine tetraacetic acid(EDTA) or soybean trypsin inhibitor(SBTI), but not by E-64, phenylmethylsulfonyl fluoride(PMSF) or 1,10-phenanthroline. Thus both enzymes appear to belong to a family of trypsin-like enzyme. Addition of EDTA to the zymographic substrate buffer almost abolished the caseinolytic activity of both enzymes. However, further addition of a divalent metal ion such as CaC $l_2$, MgC $l_2$, MnC $l_2$ or ZnC $l_2$ to the same buffer fully restored the enzyme activity at 5 mM concentration despite the presence of EDTA. Based upon these observations, 80 kDa and 78 kDa caseinolytic enzymes are present in human follicular fluid and they appear to be trypsin-like enzymes of which caseinolytic activity needs the presence of $Ca^{++}$, aM $g^{++}$, M $n^{++}$ or Z $n^{++}$././././.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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