This study was carried out to develop the methodology of chromosome preparation from blood cultures in mammals which included human, mouse, cattle and pig. For karyotyping, 0.5-5.0ml of peripheral blood were collected and cultured. The satisfactory results were obtained from macroculture and microculture in all species. In culture, the patterns of cell growth were no difference among media except serum concentration and mitogen supplement. The presence of mitogen and fetal bovine serum in medium significantly affected the mitotic index. The optimal culture condition was 37$^{\circ}C$ for 3 days. And the concentration of colcemid and reincubation time also affected the chromosome morphology. In harvest, chromosome patterns were mainly affected on hypotonic treatment which included treated time and temperature, dropwise of fixative solution, and drying after slide preparation.
The Journal of Korean Institute of Communications and Information Sciences
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v.23
no.6
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pp.1546-1553
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1998
In this paper, we investigate a human identification scheme using visual cryptography, which can decode concealed images without and crytographic computations. T.Katoh & H.Imai proposed a secret sharing scheme which can conceal two query images into one displayed image for the identification. the generalized construction of the share matrix is proposed to conceal the multiple query images by stacking user slides o the displayed image. Furthermore, an extended methodis proposed in which group of slides can conceal an independent secret image as well as the pairs of slides can.
A sensitive and specific method is described for the determination of midazolam in human plasma. The drug was extracted from 1 mL of carbonate buffered plasma (pH 9.6) with 8 mL of diethyl ether. Famprofazone was used as internal standard. The organic phase was evaporated to dryness. The residue was dissolved in methanol for the direct analysis by gas chromatograph-nitrogen phosphorus detector system. In the concentration range of 1-5000 ng/mL, the calibration curve was linear. The coefficients of variation from the precision test were <6% at the range of the concentration of 0.10-2.00 μg/mL and the detection limit for midazolam in 1 mL of plasma was o.5 ng. This assay is more sensitive, selective, simple and rapid than earlier methods. Plasma midazolam concentrations were determined by this method after administration of midazolam.
Although nuclear factor of activated T cell (NFAT) plays a key role in inflammation, its anti-inflammatory effects and mechanism of action in periodontitis are still unknown. This study aimed to identify the effects of NFAT on the proinflammatory mediators activated by lipopolysaccharide (LPS) plus nicotine stimulation in human periodontal ligament cells (hPDLCs). The production of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2(PGE_2)$ was evaluated using Griess reagent and an enzyme immunoassay, respectively. The expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) and NFAT proteins was evaluated by Western blot analysis. LPS plus nicotine synergistically induced the production of NO and $PGE_2$ and increased the protein expression of iNOS, COX-2 and NFAT. Treatment with an NFAT inhibitor blocked the LPS plus nicotine-stimulated NO and $PGE_2$ release as well as the expression of iNOS and COX-2. Our data suggest that the LPS plus nicotine-induced inflammatory effects on hPDLCs may act through a novel mechanism involving the action of NFAT. Thus, NFAT may provide a potential therapeutic target for the treatment of periodontal disease associated with smoking and dental plaque.
Propentofylline (PPF, 3-methyl-1-(5-oxohexyl)-7-propylxanthine) has been reported to be effective for the treatment of both vascular dementia and dementia of the Alzheimer type. The pharmacological effects of PPF may be exerted via the stimulation of nerve growth factor, increased cerebral blood flow, and inhibition of adenosine uptake. The objectives of this experiment are to determine the kinetic behavior of PPF, to identify, and to quantify its metabolite in human. Blood samples were obtained from human volunteers following oral administration of 200mg of PPF tablets. For the identification and quantification of the metabolite, 3-methyl-1-(5-hydroxyhexyl)-7-propylxanthine (PPFOH), PPFOH was synthesized and identified by gas chromatography/mass spectroscopy (GC/MS) and $^1H$-nuclear magnetic resonance spectroscopy. The molecular weight of synthesized metabolite is 308 dalton. The PPF and PPFOH in plasma were extracted with diethyl ether and identified by electron impact GC/MS. The plasma concentrations of PPF and PPFOH were determined by gas chromatography/nitrogen phosphorus detector in plasma and their pharmacokinetic parameters were determined. The mean half-life of PPF was 0.74 hr. The areas under the curve (AUCs) of PPF and PPFOH were 508 and 460ng.hr/ml, respectively. $C_{max}$ of PPF was about 828.4ng/ml and the peak concentration was achieved at about 2.2 hr ($T_{max}$). These results indicate that PPF is rapidly disappeared from blood due to extensive metabolism into PPFOH.
Rhamnose-rich (RROP-s) and fucose-rich (FROP-s) oligo-and polysaccharides were prepared and extensively characterised by physical and chemical procedures [1,2] and compared to L-fucose. Their biological properties were then studied on human skin fibroblast cell cultures, human skin explant cultures and on hairless rat skin, using a variety of cell-biological, biochemical and computerised morphometrical procedures. Among the most important properties we could establish, the following are of particular interest for the tretment and prevention of age-dependent modifications of human skin (loss of skin-tissue, cells and matrix, wrinkle formation and others) : stimulation of cell proliferation (by $^3$[H]-thymidine incorporation and the MTT test), scavenging of reactive oxygen species (ROS) using several different procedures, and protease (MMP-2 and MMP-9) down-regulation. A topical preparation, using RROP-s and FROP-s, and/or L-fucose, was shown to increase cell proliferation, dermal matrix synthesis, efficient scavenging of ROS-s and to increase also the thickness of dermal tissue when applied for 4 weeks on hairless rat skin, accompanied by the densification of collagen bundles as well as by an increase of elastin synthesis. Using fluorescent labeled FROPs, it could be shown that these oligosaccharides react with cell-membrane receptors and especially with the elastin-laminin-receptor and the fucose-mannose receptor, but they penetrate also in the cell nucleus, suggesting the possibility of a direct action on the regulation of gene expression. When applied to the human skin of a team of voluntary women encompassing all age-groups, the efficiency of FROP-containing preparation could be confirmed using indentometry and computerised evaluation of skin micro-relief, as well as evaluation of periorbital wrinkles. It appears therefore that these preparations correspond to all the requirements of active anti-aging principles.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.02a
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pp.210-210
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2011
The effects of CH2F2 and N2 gas flow rates on the etch selectivity of silicon nitride (Si3N4) layers to extreme ultra-violet (EUV) resist and the variation of the line edge roughness (LER) of the EUV resist and Si3N4 pattern were investigated during etching of a Si3N4/EUV resist structure in dual-frequency superimposed CH2F2/N2/Ar capacitive coupled plasmas (DFS-CCP). The flow rates of CH2F2 and N2 gases played a critical role in determining the process window for ultra-high etch selectivity of Si3N4/EUV resist due to disproportionate changes in the degree of polymerization on the Si3N4 and EUV resist surfaces. Increasing the CH2F2 flow rate resulted in a smaller steady state CHxFy thickness on the Si3N4 and, in turn, enhanced the Si3N4 etch rate due to enhanced SiF4 formation, while a CHxFy layer was deposited on the EUV resist surface protecting the resist under certain N2 flow conditions. The LER values of the etched resist tended to increase at higher CH2F2 flow rates compared to the lower CH2F2 flow rates that resulted from the increased degree of polymerization.
Radiotherapy would be the choice of treatment for human cancers, because of high cost-effectiveness. However, a certain population of patients shows a resistance to radiotherapy and recurrence. In an effort to increase the efficacy of radiotherapy, many efforts were driven to find the genes causing the unresponsiveness to ionizing radiation. In this paper, we compared the gene expression profiles of two lung cancer cell lines, H460 and H1299, which showed differential responses to ionizing radiations. Each cell were irradiated at 2 Gy, and harvested after 0, 2, 4, 8, 12 and 24 hours to examine the expressions. Two-way ANOVA analysis on time-series experiments of two cells could select 2863 genes differentially expressed upon ionizing radiation among 32,321 genes in microarray (p<0.05). We classified these genes into 21 clusters by SOM clustering according to the interaction between cell types and time. Two SOM clusters were enriched with apoptosis-related genes in pathway analysis. One cluster contained higher levels of phosphatidyl inositol 3-phosphate kinase (PI3K) subunits in H1299, radio-resistant cells than H460, radiosensitive cells. TRAIL receptors were expressed in H460 cells while the decoy receptor for TRAIL was expressed in H1299 cells. From these results, we could characterize the differential responsiveness to ionizing radiation according to their differential expressions of apoptosis-related genes, which might be the candidates to increase the power of radiotherapy.
Lung cancer despite advancement in the medical field continues to be a major threat to human lives and accounts for a high proportion of fatalities caused by cancers globally. The current study investigated vanillin oxime, a derivative of vanillin, against lung cancer cells for development of treatment and explored the mechanism. Cell viability changes by vanillin oxime were measured using MTT assay. Vanillin oxime-mediated apoptosis was detected in A549 and NCI-H2170 cells at 48 h of exposure by flow cytometry. The CEBP homologous protein (CHOP) and death receptor 5 (DR5) levels were analysed by RT-PCR and protein levels by Western blotting. Vanillin oxime in concentration-dependent way suppressed A549 and NCI-H2170 cell viabilities. On exposure to 12.5 and 15 μM concentrations of vanillin oxime elevated Bax, caspase-3, and -9 levels in A549 and NCI-H2170 cells were observed. Vanillin oxime exposure suppressed levels of Bcl-2, survivin, Bcl-xL, cFLIP, and IAPs proteins in A549 and NCI-H2170 cells. It stimulated significant elevation in DR4 and DR5 levels in A549 and NCI-H2170 cells. In A549 and NCI-H2170 cells vanillin oxime exposure caused significant (p < 0.05) enhancement in CHOP and DR5 mRNA expression. Vanillin oxime exposure of A549 and NCI-H2170 cells led to significant (p < 0.05) enhancement in levels of phosphorylated extracellular-signal-regulated kinase and c-Jun N-terminal kinase. Thus, vanillin oxime inhibits pulmonary cell proliferation via induction of apoptosis through tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) mediated pathway. Therefore, vanillin oxime may be studied further to develop a treatment for lung cancer.
Bioconversion of timosaponin A-III (TA-III), one of the major steroidal saponins isolated from the rhizomes of Anemarrhenae asphodeloides Bunge (Liliaceae), was investigated in Saccharomyces cerevisiae. Five bioconversion products, denoted compounds 2-6, were obtained. Biotransformation metabolite 2 was a stereoisomer of TAIII with a specific isotype F-ring and ${\beta}$-ranged $CH_3$-21, which rarely occurs in nature. The structure of 2 was elucidated by extensive spectroscopic analysis (H-H COSY, HSQC, HMBC), as well as by high-resolution mass spectral analysis. The growth inhibitory activity of compounds 1-6 was assayed against four human cancer cell lines, HepG2, H-1299, HT-29, and HCT-116. Compounds 1 and 2 obviously inhibited the growth of the four types of cancer cells with $IC_{50}$ values being less than 19${\mu}M$. A structure-activity relationship is discussed, and the spirostane-ring F in compounds 1 and 2 appears to be the critical bioactive moiety for the cell growth inhibitory property.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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