White rot fungi produce lignin-degrading enzymes such as laccase, manganese peroxidase and lignin peroxidase. These extracellular oxidases efficiently degrade recalcitrant synthetic dyestuffs with diverse chemical structures. Here, we examined the activities of lignin-degrading enzymes in Trametes versicolor using triphenyl methane dyes, crystal violet (CV) and malachite green (MG). Both dyes were decolorized by T. versicolor in solid and liquid culture conditions. T. versicolor decolorized MG more quickly than CV in both conditions. Among three ligninolytic enzymes, laccase was most abundantly found in the decolorization processes of CV and MG. However, higher activity of laccase was needed to degrade CV than MG. The much less activity of MnP was also detected. But the increase of MnP activity was well corresponded to the decolorization efficiency of CV, suggesting the involvement of MnP in CV degrading process. However, its role in the degradation process of MG is supposed to be subsidiary to laccase.
Mushrooms growing spontaneously in the Juwangsan National Park were surveyed from April to October 2017 for supporting management of higher fungi and creating a bio-diversity database of the park. In total, two divisions, eight classes, 21 orders, 85 families, 225 genera, and 503 species were detected. Among them, 247 species belonged to order Agaricales, which occupied 48.8% of the population, followed by members of orders Polyporales and Russulales. The mushrooms were abundant in August, and an altitude of 300-400 m above sea level was optimal for their growth, such as those found at Sanguijigu, Deajeonsa, and Geodaeri semgoal areas. Furthermore, Macrolepiota procera and Sarcodon aspratus, which belong to criteria of climate change, were detected in this survey.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.18
no.3
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pp.195-204
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1998
This study was designed to investigate the effects of antagonistic microorganism, Bacillus subtilis, on the growth of forage seedlings in repeated cultivation soils and unrepeated cultivation soils. The field experiment was wnducted in pots in a vinyl house using repeated and unrepeated cultivation soils. Forage types were 'Suwon 19' wrn(Zea mqs L.), 'Califbmia' white clover(Tr~oIium repens L.) and 'Fawn' tall fescue (Festuca arundianacea Schreb.). Samples of white clover and tall fescue were taken h m each pot at 36 days after seeding. Samples of wm were examined at 50 days after seeding. The most active antagonistic bacterium was isolated h m forage rhizosphere soil, and selected by reference to it's antagonistic ability on the growth of pathogenic fungi, Rhizoctonia solmi and Fusarium oxyspomm, and it was identified as Bacillus subtilis. This strain strongly suppressed the growth of fungal pathogens among isolated rhizobacteria. The dry weight of forage shoots and roots cultivated in unrepeated cultivation soils was higher than that cultivated in repeated cultivation soils. The dry weight of forage was positively affected by the inoculation of the antagonistic bacterium, Bacillus subtilis, in both repeated cultivation soils and unrepeated cultivation soils. In conclusion, the growth of forage was more affected by the inoculation of the antagonistic bacterium in unrepeated cultivation soils than that in repeated cultivation soils, and bacterization of forage with B. subtilis resulted in an inrreased yield.
Interspecific hybrids between Aspergillus oryzae var. oryzae and Penicillium chrysogenum (Tyr$\^$-/), high alkaline protease producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique. Nuclei isolated from the wild type Aspergillus oryzae var. oryzae strain were transferred into auxotrophic Penicillium chrysogenum mutants and selected the new strains showing an increased protein degrading capability. Maximum production of protoplasts were obtained by 1% Novozym 234 at $30^{\circ}C$ for 3 hours and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6M KCl. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were 1.3${\times}$10$\^$-3/∼2.8${\times}$10$\^$-3/. They could be suggested as an aneuploid by the observation of genetic stability, conidial size, DNA content, and nuclear strain. The hybrids showed 1.1~2.2 fold higher alkaline pretense activities than parental strains.
In this biocontrol research, we evaluated disease suppressive effects of antagonistic bacterial strains ISE13 and KJ1R5 against Korean ginseng root rot caused by P. eaetorum. We also examined the effects of nutrient solution in the hydroponic culture system for Korean ginseng on biological activity of the bacterial strains. As results of dual culture tests of the bacterial strains on $V_{8}$ juice agar, the strain ISE13 showed antifungal activity against P. eaetorum and other plant pathogenic fungi, but the strain KJ1R5 did not. When their inhibitory effects against infection of P. eaetorum on the roots grown in either nutrient solution or water were tested, the strains ISE13 and KJ1R5 inhibited the disease severity of Korean ginseng roots only grown with water, compared to buffer-treated, inoculated controls. However, the nutrient solution used for hydroponic cultures of ginseng in pots caused higher levels of disease severity by the strains ISE13 and KJ1R5 from 418.8\%$ to 40.0\%$ and from 24.3\%$ to 45.0\%$, respectively. In this study, the bacterial strains ISE13 and KJ1R5 could be potentially biocontrol agents to suppress Korean ginseng root rot caused by P. eaetorum. However, more attention using nutrient solution in hydroponic cultures for Korean ginseng production should be applied in biocontrol of plant diseases using the antagonistic microorganisms.
Vegetative compatibility groups (VCGs) are determined for many fungi to test for the ability of fungal isolates to undergo heterokaryon formation. In several fungal plant pathogens, isolates belonging to a VCG have been shown to share significantly higher genetic similarity than those of different VCGs. In this study we sought to examine the relationship between VCG and genetic similarity of an important cool season turfgrass pathogen, Sclerotinia homoeocarpa. Twenty-two S. homoeocarpa isolates from the Midwest and Eastern US, which were previously characterized in several studies, were all evaluated for VCG using an improved nit mutant assay. These isolates were also genotyped using 19 microsatellites developed from partial genome sequence of S. homoeocarpa. Additionally, partial sequences of mitochondrial genes cytochrome oxidase II and mitochondrial small subunit (mtSSU) rRNA, and the atp6-rns intergenic spacer, were generated for isolates from each nit mutant VCG to determine if mitochondrial haplotypes differed among VCGs. Of the 22 isolates screened, 15 were amenable to the nit mutant VCG assay and were grouped into six VCGs. The 19 microsatellites gave 57 alleles for this set. Unweighted pair group methods with arithmetic mean (UPGMA) tree of binary microsatellite data were used to produce a dendrogram of the isolate genotypes based on microsatellite alleles, which showed high genetic similarity of nit mutant VCGs. Analysis of molecular variance of microsatellite data demonstrates that the current nit mutant VCGs explain the microsatellite genotypic variation among isolates better than the previous nit mutant VCGs or the conventionally determined VCGs. Mitochondrial sequences were identical among all isolates, suggesting that this marker type may not be informative for US populations of S. homoeocarpa.
This study was carried out to know the possibility of simultaneous utilization of laccase from white-rot fungus with cellulase on enzymatic hydrolysis of cellulosic substrate from autohydrolyzed oak wood. Laccases from 3 white-rot fungi, Pleurotus ostreatus. Ganoderma lucidum, and Phanerochaete chrysosporium, were isolated, purified and measured their activities. The highest activity was shown in Pleurotus ostreatus and the lowest in Phanerochaete chrysosporium. Laccase from Pleurotus ostreatus has optimum pH of 5.94, Km value of 3.209 mM and appeared to be stable at relatively wide pH range, 4.7-8.72. Temperature stability showed that 60% activity was preserved after 40 minutes at $50^{\circ}C$. Laccase from Ganoderma lucidum reached to the maximum activity during 15-20 day incubation. This enzyme has optimum pH of 6.45, Km value of 6.71 mM and pH range of 5.0-9.0 for stabilization. 95% activity was preserved at $30^{\circ}C$ and 58% activity at $50^{\circ}C$. Concerned to the enzymatic hydrolysis of cellulosic substrate with both enzymes, cellulase and laccase, simultaneously, mixed culture filtrates and mycellium extracts were shown higher hydrolysis rates than those of Trichoderma viride. There were no significant differences in the extent of hydrolysis among various mixed culture filtrates and mycellium extracts.
Intergeneric hybrids between Aspergillus niger and Perricillium ch~y.sop~um(Tyr ), hyperlipolytic enzyne-producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique:. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Maximum production of protoplasts were obtainrd by 1% Novozym 234 at $30^{\circ}C$ for 3 hrs and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6 M KC]. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were $1.3{\times}$10^{-3}$$$-3.8{\times}$10^{-3}$$. From the chervation of genetic stability, conidial size, DNA content, ;md nuclear stain, it was suggested that their karyotypes are aneuploid. The hybrids showed 1.4-2.2 fold higher lipase activities than parental strains. It was strongly supported by results of this study that nuclear transfer technique is much more efficient in the formation of intergeneric hybrids than protoplast fusion and is very useful for the improvement of strains.
Present experiments were conducted to determine the possibility of cultivation of 9 edible wild species selected among the higher fungi growing in Korea. In the investigation on the mycelial growth according t6o the different media, the mycelial growth of Coprinus comatus was fast on the CSA medium, when malt extract was added to the basal medium PSA, the mycelial of Lapista nuda and Auricularia auricula-judae was fast in growth and density. In the spawning, the mycelial growth of Pholiota squarrosa on the oak tree's sawdust, Pleurotus cornucopiae on the broad-leaves' sawdust, and Coprinus comatus on the compost was respectably fast and also it shown to be possibility of artificial cultivation owing to their carporphore budding when Coprinus comatus and Lepiota alborubescens cultivated on the rice straw, Auricularia auriculajudae and Pleurotus cornucopiae on the sawdust of the popla and Pholiota squarrosaon the sawdust of the oak tree.
Kim, Narae;Choi, You Ri;Seo, Mun Won;Song, Jeong Young;Kim, Hong Gi
The Korean Journal of Mycology
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v.44
no.2
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pp.103-107
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2016
To establish a rapid and accurate detection of Phytophthora pinifolia, which is a quarantine pathogenic fungus in Korea, a species-specific primer was developed based on the ras-related protein (Ypt1) gene. Species-specific primer based on the DNA sequences of Ypt1 gene amplified 193 bp polymerase chain reaction (PCR) product for P. pinifolia. The primer pair yielded the predicted PCR product size exactly in testing with target pathogen DNAs, but not from the other 10 species of Phytophthora and 14 species of other phytopathogenic fungi. The primer pair also showed only the species-specific amplification curve on realtime PCR on target pathogen DNA. The detection sensitivity of real time PCR using species-specific primer pair was 10 to 100 times higher than conventional PCR, with 1 to $10pg/{\mu}L$.
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