Glycated hemoglobin (HbA1c) is used as an index of mean glycemia over prolonged periods. This study describes an optimization of enzyme digestion conditions for quantification of non-glycated hemoglobin (HbA0) and HbA1c as diagnostic markers of diabetes mellitus. Both HbA0 and HbA1c were quantitatively determined followed by enzyme digestion using isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry (ID-LC-MS/MS) with synthesized N-terminal hexapeptides as standards and synthesized isotope labeled hexapeptides as internal standards. Prior to quantification, each peptide was additionally quantified by amino acid composition analysis using ID-LC-MS/MS via acid hydrolysis. Each parameter was considered strictly as a means to improve digestion efficiency and repeatability. Digestion of hemoglobin was optimized when using 100 mM ammonium acetate (pH 4.2) and a Glu-C-to-HbA1c ratio of 1:50 at $37^{\circ}C$ for 20 h. Quantification was satisfactorily reproducible with a 2.6% relative standard deviation. These conditions were recommended for a primary reference method of HbA1c quantification and for the certification of HbA1c reference material.
Common carp (Cyprinus carpio) (Weight 23.05 ± 6.98 g, Length 12.65 ± 1.38 cm) were exposed to waterborne nitrite at 0, 50, 100, 200, 400 and 800 mg NO2-/L for 96 hours. The lethal concentration 50 (LC50) of C. carpio exposed to waterborne nitrite was 398.6 mg NO2-/L. Hemoglobin, hematocrit and RBC count were significantly decreased by waterborne nitrite exposure. The MCV (mean mean corpuscular volume) (µl), MCH (mean corpuscular hemoglobin) (pg) and MCHC (mean corpuscular hemoglobin concentration) (%) were significantly increased. The inorganic component, plasma calcium, was significantly increased, and the organic components such as plasma cholesterol and total protein were significantly increased showing a similar tendency with calcium. In enzymatic components, the AST and ALT were also significantly increased by nitrite exposure. The results of this study indicate that exposure to nitrite can affect the survival and hematological physiology of C. carpio.
Glycated hemoglobin ($HbA_{1c}$) has been commonly used to screen and diagnose for patients with diabetes mellitus. Here the accelerated procedure of microwave-assisted sample treatment from acid hydrolysis to enzyme digestion followed by isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry (ID-LC-MS/MS) was optimized and applied to measure $HbA_{1c}$ in an effort to speed up analysis time. First, two signature peptides of $HbA_{1c}$ and hemoglobin $A_0$ were certified with amino acid analysis by setting optimized acid hydrolysis conditions to $150^{\circ}C$, 1.5 h and $10{\mu}M$ sample concentration in 8 M hydrochloric acid. Consequently, the accurate certified peptides above were used as calibration standards to implement the proteolytic procedure with endoproteinase Glu-C at $37^{\circ}C$, 700 W for 6 h. Compared to the traditional method, the microwave heating not only shortened dramatically sample preparation time, but also afforded comparable recovery yields. The optimized protocol and analytical conditions in this study are suitable for a primary reference method of $HbA_{1c}$ quantification with full SI-traceability and other similar proteins in complex biological samples.
본 연구는 쌀겨 및 쌀눈 기름에 들어 있는 ${\gamma}$-oryzano의 혈당 저하효과를 구명하기 위하여 수행하였다. 실험동물은 인슐린 비의존형 당뇨병 모델인 KK 당뇨마우스를 이용하였고, 실험식이의 0.2% 수준에서 ${\gamma}$ -oryzanol 첨가 유무에 따라 CO군과 GO군을 선정 후 8주 동안 실험식이를 급여하였다. 실험결과 실험식이 섭취량, 체중변화,장기의 무게는 실험군 사이에 차이가 없었으나, GO군에서 실험식이 급여 5주부터 공복혈당의 감소를 보였고, 내당능이 개선되어 혈당면적이 유의하게 낮은 수준을 보였다. 장기간의 혈당상태 지표인 당화혈색소가 실험군 사이에 유의한 차이를 보이지 않았으나 GO군에서 감소하는 경향을 보였고, 인슐린 수준은 ${\gamma}$-oryzanol을 섭취한 GO에서 높은 경향을 보였다. 따라서 ${\gamma}$ -oryzanol은 혈청 인슐린 수준을 높이고 혈당 농도 감소 효과가 있는 것으로 보이나, 실험식이 급여 기간의 변화 및 ${\gamma}$-oryzano의 첨가 수준에 따른 혈당 저하 효과 검토 등이 보완되어야 할 것으로 생각된다.
Wang, Xiaojie;Kim, Kang-Woong;Choi, Se-Min;Lee, Hee-Suk;Sungchul C. Bai
한국양식학회지
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제17권2호
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pp.122-127
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2004
On protein equivalence base, fishmeal (FM) was replaced by lysine cell mass (LCM) in selected different diets in Korean rockfish, Sebastes schlegeli (Hilgendorf) Eight experimental diets were formulated to contain 100% FM (LC $M_{0}$), 90% FM+10% LCM (LC $M_{10}$),80% FM+20% LCM (LC $M_{20}$), 70% FM+30% LCM (LC $M_{30}$), 60% FM+40% LCM (LC $M_{40}$ ), 70% FH+30% LCM+lysine (LC $M_{+Lys}$), 60% FM+40% LCM+lysine (LC $M_{40+Lys}$), and 50% FM+50% LCM+lysine (LC $M_{50+Lys}$). Experimental individuals of the fish (12.6 g) were randomly fed on one of the experimental diets. After 6 weeks of feeding trial, weight gain (WG) and feed efficiency (FE) of fish fed LC $M_{0}$ diet was significantly (P〈0.05) higher than those of fish fed LC $M_{20}$, LC $M_{30}$, LC $M_{40}$ , LC $M_{30+Lys}$, LC $M_{40+Lys}$, and LC $M_{50+Lys}$ diets, however, there was no significant difference in WG of fish fed LC $M_{0}$ and LC $M_{10}$ diets. Supplementation of lysine has no effect on WG. There was no significant difference in condition factor (CF) of fish fed LC $M_{0}$, LC $M_{10}$ and LC $M_{20}$ diets. Hemoglobin (Hb) of fish fed LC $M_{0}$, LC $M_{10}$, LC $M_{20}$, LC $M_{30}$, LC $M_{40}$ , LC $M_{30+Lys}$, and LC $M_{40+Lys}$, diets were not significantly different from each other. No significant differences were observed in hematocrit (PCV) and hepatosomatic index (HSI) among all dietary treatments. Apparent digestibility of dry matter (ADM) and protein (ADP) of diets significantly decreased with increase in dietary LCM level, though there was no difference in ADM and ADP between LC $M_{0}$ and LC $M_{10}$. These results indicate that LCM could replace up to 10% of fishmeal in Korean rockfish diets.ish diets.iets.ish diets.s.ish diets.
This study was carried out to investigate the supplementary effects of Suwon 464, which has over two times of dietary fiber content compared with normal rice (Ilpum), on blood glucose in diabetic mice. We supplied 5 kinds of experimental diets (corn starch diet as a control (CO), Ilpum polished rice diet (IP), Ilpum brown rice diet (IB), polished rice diet (SP) and brown rice diet (SB) of Suwon 464) to diabetic mice for 8 weeks, after analyzing dietary fiber contents of 5 experimental diets. Diet intake, body weight and contents of blood glucose, hemoglobin $A_{lc}$ and insulin were measured. The dietary fiber contents in CO, IP, IB, SP, and SB diets were 1.0, 1.2, l.4, l.4, and 2.0% respectively. Body weight was lower in SB group than the other groups though there was no significant difference in diet intake among experimental groups. The concentration of blood glucose in diabetic mice was lower in SB group than the other groups during the supplementary period of experimental diets. The hemoglobin Ale and serum insulin levels were lower in SP and SB groups. These results suggested that the brown rice of Suwon 464 with high dietary fiber can control diabetes in diabetic mice by reducing the blood glucose and hemoglobin Ale. (Korean J Nutrition 37(2): 75-80, 2004)
전남 보성군 장도해역의 펄질에 서식하는 꼬막의 환경내성에 대한 연구의 일환으로 수중내 용존산소의 감소에 따라 생존율, 호흡률, 여수율 둥의 생리적 반웅 및 혈액성상의 변화를 조사하였다. 꼬막의 용존산소농도의 감소에 따른 $LC_{50}$은 수온 $10^{\circ}$에서 16일동안 큰개체 1.31 mg DO/L, 작은 개체는 0.95mg DO/L이었으며, 수온 $25^{\circ}C$의 경우에는 각각 1.13와 1.24mg DO/L이었다. 호흡률과 여수율은 용존산소의 감소에 따라 대체로 감소하는 경향을 보였다. 혈 액 성분은 Hemoglobin, glucose, total protein, total cholesterol, GOT 및 GPT 등을 분석하였다. 혜모글로빈은 모든 개체에서 수중내 용존산소의 감소에 따라 증가하였으나, 스트레스의 지표로 이용되고 있는 glucose는 수온 $25^{\circ}C$, 용존산소 1.6-1.2mg DO/L에서 일시적 증가를 보였으며, 1.2mg DO/L 이하에서 감소하는 경향을 보였다. 그외 total protein, total cholesterol, GOT 및 GPT 등은 용존산소의 감소에 따라 감소하거나 불규칙한 경향을 나타내었다.
Mirror carp, Cyprinus carpio nudus (weight 26.2±3.1 g, length 11.8±0.5 cm) were exposed to waterborne total ammonia nitrogen (TAN) at 0, 2, 4, 8, 16, 32, 64 and 128 mg TAN/L. The lethal concentration 50 (LC50) of mirror carp, C. carpio nudus exposed to waterborne ammonia was 60.38 mg TAN/L. The red blood cell (RBC) count was significantly reduced by ammonia exposure, whereas there was no significant changes in the hemoglobin concentration and hematocrit value. In the plasma components, glucose, total protein, aspartate aminotransferase (AST) and alkaline phosphatase (ALP) were significantly increased by ammonia exposure. The results of this study suggest that the ammonia exposure to C. carpio nudus affects the survival rates, hematological parameters and plasma components as toxicity.
Olive flounder Paralichthys olivaceus (total weight 216.4±14.6 g, total length 28.4±1.7 cm) were exposed to different pH levels (3, 4, 5, 6, 7, 8, and 9) for 96 h. At pH 4, hemoglobin decreased significantly, while plasma calcium, glucose, cholesterol, and ALP increased significantly. Exposure to pH 4 also induced stress responses, as evidenced by a significant decrease in heat shock protein 70 (HSP 70) and a significant increase in cortisol. The results of this study indicate that acute exposure to acidic or alkaline pH (pH 3 or 9) induced significant mortality, while exposure to pH 4significantly affected hematological parameters and stress responses in P. olivaceus.
Olive flounder (Paralichthys olivaceus) (Weight 110.9±17.1 g, length 22.3±1.2 cm) were exposed to waterborne nitrite at 0, 30, 60, 120, 240, 480 and 960 mg NO2-/L according to water temperature at 20℃ and 25℃ for 96 hours. The lethal concentration 50 (LC50) of olive flounder, P. olivaceus exposed to waterborne nitrite was 513.87 mg NO2-/L at 20℃ and 208.35 mg NO2-/L at 25℃, which means a significant difference in LC50 by the water temperature. Hemoglobin and hematocrit were significantly decreased by waterborne nitrite exposure. The inorganic component, plasma calcium, was significantly decreased, and the organic components such as plasma glucose and cholesterol were significantly decreased showing a similar tendency with calcium. In enzymatic components, the AST and ALP were also significantly decreased by nitrite exposure. The results of this study indicate that exposure to nitrite can affect the survival and hematological physiology of P. olivaceus, and the effect of exposure to nitrite had a significant effect on nitrite toxicity depending on the water temperature.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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