PASSARINHA L. A.;DIOGO M. M.;QUEIROZ J. A.;MONTEIRO G. A.;FONSECA L. P.;PRAZERES D. M. F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권1호
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pp.20-24
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2006
Plasmid DNA (pDNA) is a product of interest for many biopharmaceutical companies and research laboratories, because of increase in the number of gene therapy protocols that use nonviral vectors. This work was undertaken to study the effect of antibiotic and dissolved oxygen concentration (DOC) on the production of a ColE 1-type plasmid (pVAX1-LacZ) hosted in Escherichia coli $DH5\alpha$ and cultured in a batch fermentor with 0.751 of Terrific Broth. A decrease in the DOC from $60\%\;to\;5\%$ was shown to increase the specific pDNA concentration approximately 1.5-fold, due to the downregulation of growth. Additionally, this increase in the pDNA concentration led to a 2.2-fold increase in the purity of cell lysates obtained after cell lysis. However, the use of higher DOC led to 2.8-fold higher volumetric productivity as a consequence of a faster growth rate, reducing the fermentation time from 24 to 8 h. Interestingly, the specific pDNA concentration, and pDNA productivity and purity were always higher $(10-15\%)$ in the absence of antibiotic. Overall, the data indicate that nonselective conditions can be used without compromising yield, productivity, and purity of pDNA.
The dielectric and polarizable properties of 0.85Pb$Mg_{1/3}Nb_{2/3}$)$O_3$-$0.125PbTiO_3$-$0.25BaTiO_3$ Ceramics have been investigated as a addition of the amount of $La_{2}O_{3}$($0{\leq}x{\geq}0.05$). The Temperature-dependant electrostictive characteristics of 0.85PMN-0.125PT-0.25BT relaxor ferroelectic system were improved by enhencing the extent of the diffuse phase transition(DPT). This was achieved using PMN-PT-BTceramics by the partial substitution of La at the Pb site. The curie temperature and the maximum dielectic permittivity decreased by substituting $La_{2}O_{3}$ and the electic field-related hysteresis phenomena decreased with increasing $La_{2}O_{3}$ substitution amount. It is showed decreasing in induced strain for electric field with increasing $La_{2}O_{3}$ substitution.
수산화칼슘현탁액과 탄산가스를 출발물질로 15~$50^{\circ}C$의 온도에서 기액반응으로 비정질 탄산칼슘($CaCO_3$.$nH_2 O$)의 생성과정을 전기저도도의 연속측정법, X-선회절법 및 투과전자현미경법을 이용하여 조사한 결과, 반응초기생성물은 비정질 탄산칼슘으로 반응현탁액의 전기전도도는 비정질 탄산칼슘의 생성 중 크게 강하하고 있으며, 이것은 수산화칼슘의 입자표면이 비정질 탄산칼슘미립자로 뒤덮여 용해를 방해받는 것과 비정질 탄산칼슘이 용액 속에서 불안정하여 즉시 용해한 다음 석출하여 칼사이트로 전이되어 미세한 침강성 탄산칼슘이 나란히 결합한 연쇄형 칼사이트가 생성된다. 비정질 탄산칼슘이 연쇄형 칼사이트로 변화하는 동안 현탁액의 전기전도도는 급격히 회복되고 이 과정에서 고농도 수산화칼슘현탁액의 외관점도가 상승한다. 이것은 연쇄형 칼사이트의 뒤얽힘에 의한 것이며, 다시 전기전도도의 1회 회복단계 이후에는 미반응 수산화칼슘에 의하여 비정질 탄산칼슘이 생성이 소멸되어 칼사이트의 성장반응이 이루어지고 pH가 9.5이하에서 연쇄형 칼사이트는 결합부분이 먼저 용해하여 결정질 탄산칼슘으로 분리생성된다. 비정질 탄산칼슘의 생성 및 합성온도의 영역은 전기전도도법에서 $15^{\circ}C$일 때 1차 강하단계(a-단계)에서 가장 적합하다.
Hwang, Su Jin;Ha, Geun-Hyoung;Seo, Woo-Young;Kim, Chung Kwon;Kim, KyeongJin;Lee, Sang Bae
BMB Reports
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제53권10호
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pp.539-544
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2020
Skin aging appears to be the result of overlapping intrinsic (including genetic and hormonal factors) and extrinsic (external environment including chronic light exposure, chemicals, and toxins) processes. These factors cause decreases in the synthesis of collagen type I and elastin in fibroblasts and increases in the melanin in melanocytes. Collagen Type I is the most abundant type of collagen and is a major structural protein in human body tissues. In previous studies, many products containing collagen derived from land and marine animals as well as other sources have been used for a wide range of purposes in cosmetics and food. However, to our knowledge, the effects of human collagen-derived peptides on improvements in skin condition have not been investigated. Here we isolate and identify the domain of a human COL1A2-derived protein which promotes fibroblast cell proliferation and collagen type I synthesis. This human COL 1A2-derived peptide enhances wound healing and elastin production. Finally, the human collagen alpha-2 type I-derived peptide (SMM) ameliorates collagen type I synthesis, cell proliferation, cell migration, and elastin synthesis, supporting a significant anti-wrinkle effect. Collectively, these results demonstrate that human collagen alpha-2 type I-derived peptides is practically accessible in both cosmetics and food, with the goal of improving skin condition.
This study was undertaken to optimize enucleation and reconstitution methods for the production of cloned mice by somatic cell nuclear transfer Outbred ICR mouse oocytes at the metapahse- II stage were retrieved from female mice superovulated by PMSG and hCG. In Experiment 1, oocytes were enucleated in medium supplemented with cytochalasin B (CCB) of 3 levels (0, 7.5 or 15 $\mu\textrm{g}$/mL), and higher rate of encleation was obtained at 7.5 and 15 $\mu\textrm{g}$/mL than at $\mu\textrm{g}$/mL. In Experiment 2, oocytes enucleated in 7.5 $\mu\textrm{g}$/mL CCB-containing medium were reconstituted with different types of somatic cell by following methods; 1) cumulus cells by direct cell injection, 2) cumulus cells by electric fusion (1.25 kV/cm, 2 pulses for each 70 $mutextrm{s}$) or 3) STO cells by the electrofusion. Electrofusion of STO cells with enucleated oocytes yielded the greatest (P<0.05) rate of reconstitution without lysis (76%) than any other combinations. Although significant decrease in the rate of somatic cell introduction was found, the electrofusion of cumulus cells yielded better rate of reconstitution than direct injection (0 vs. 18%). In Experiment 3, the duration of electric stimulation for the fusion was changed to either 50 $mutextrm{s}$ or 90 $mutextrm{s}$, but no significant improvement of reconstitution efficacy was obtained. In conclusion, this study showed that ICR mouse oocytes could be used for the production of reconstituted oocytes and a fusion method of 1.25 KV/cm with 2 pulses using 570 cell was the optimal.
The dielectric and polarizable properties of $0.9Pb_{1-x}La_x({Mg}_{1/3}Nb_{2/3})O_3-0.1PbTiO_3$ (x=0,1,2,3,4,5) have been investigated. The temperature-dependant electrostictive characteristics of 0.9PMN-0.1PT relaxor ferroelectric system were improved by enhencing the extent of the diffuse phase transition(DPT). This was achieved using PMN-PTceramics by the partial substitution of La at the Pb site. The curie temperature and the maximum dielectric permittivity decreased by substituting La and the electric field-related hysteresis phenomena decreased with increasing La substitution amount.
Soybean meal(SMB) has not only been an important source of protein, but also a major source of isolfavones(IF) for poultry diet. Since the IF is one of effective phytoestrogens, evaluation of bioavailability of the phytochemicals for poultry and development of an animal model for assessment of the availability should be essential for its practical application. Present study was to develop bird model for assessing their bioavailability. No reports for such measurments with poultry could have every been found. Eight, 6-wk-old, layer-type, male birds were divided into two groups of four birds; normal (N) and colostomized(COL). Each bird was tube-fed a SMB sample at a level of 1% body weight. Samples from blood, urine and feces(COL birds) or urine+feces (N) were collected at 0, 2, 8, 15, 24 and 48 hours after the feeding. Plasma and urine samples were treated with -glucuronidase and fecal samples with 4N HCl for measurement of genistein(GE) and daidzein (DA) with HPLC set with an electrochemical detector. Maximum peaks of plasma IF appeared at 2 h after the meal for both birds groups. However the IF peak for N group was GE, while that for COL group was DA. Plasma DA levels for COL birds were always higher than those of GE, which was in opposite trend for N birds. This trend observed in the N birds is in accordance with those reported in rats fed SBM. In conclusion the results seem to suggest that colostomy as an attempt to separate urine from feces in birds affected the IF metabolism in the intestine and may not be a proper bird model to measure the IF bioavailability.
A total of 192 broiler chicks were used to evaluate the influence of dietary ${\alpha}$-lipoic acid (ALA) on growth performance, carcass characteristics and meat quality of broiler chickens with the purpose of developing a strategy to prevent the occurrence of pale, soft, and exudative (PSE) meat and to improve the meat quality of broilers. At 22 d of age, birds were allocated to 4 ALA treatments (0, 400, 800, and 1200 ppm). The results showed that dietary ALA significantly decreased average feed intake (AFI), average daily gain (ADG), final live body weight (BW) and carcass weight (p<0.05), while no difference in feed conversion ratio (FCR) was detected among chickens fed with and without ALA. Abdominal fat weight significantly decreased (p<0.05) for broilers fed 800 and 1200 ppm ALA. However when calculated as the percentage of carcass weight there was no significant difference between control and ALA treatments. Meat quality measurements showed that dietary ALA regulated postmortem glycolysis and improved meat quality as evidenced by increased muscle pH and decreased drip loss of meat (p<0.05). Although ALA did not change the tenderness of meat as indicated by meat shear force, dietary ALA decreased collagen content and mRNA expression of COL3A1 gene (p<0.05). In conclusion, the results indicate that dietary ALA may contribute to the improvement of meat quality in broilers.
Song Haeng-Un;Ahn Hyoun-Suk;Lee Sang-Rae;Koh Kwang-Joon
Imaging Science in Dentistry
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제35권4호
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pp.191-198
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2005
Purpose: To characterize the effects of 2-deoxy-D-glucose (2DG) and quercetin (QCT) on cytokine secretion of IL-6, $TGF-\beta$ and gene expression of Col I in irradiated MC3T3-E1 cells Materials and Methods: The MC3T3-El cells were cultured in an a-MEM supplemented with 5mM 2DG or 10mM QCT and then the cells were incubated 12h before irradiation with 2, 4, 6, and 8Gy X-ray using a linear accelerator delivered at a dose rate of 1.5Gy/min. Level of IL-6 and $TGF-\beta$ was determined by ELISA. Also expression of Col I was examined by RT-PCR. Results: In accordance with the radiation dose, the amount of $TGF-\beta$ was not different in RA + QCT, but it showed a peak value in control and RA + 2DG at 4Gy on the 3rd day. However, all groups showed a decreasing tendency dose-dependently in RA+QCT on the 7th day (p<0.01). In accordance with the radiation dose, the amount of IL-6 increased dose-dependently in all groups on the 3rd day. On the 7th and 21st day, all groups showed peak values at 4Gy. RA+QCT showed a slightly increased amount of IL-6 at 2Gy, but it showed a slightly decreased amount at 4, 6, and 8Gy. In accordance with the period of culture after irradiation, the expression of Col I increased dose-dependently in RA+QCT. Conclusion: The result showed that QCT acted as radiosensitizer in the secretion of $TGF-\beta$ and gene expression of Col I during differentiation in irradiated MC3T3-E1 cells at the cellular level.
The $(Sr_{0.85}Ca_{0.15})TiO_3$(SCT) thin films were deposited on Pt-coated electrode (Pt/TiN/$SiO_2$/Si) using RF sputtering method according to the deposition condition. The optimum conditions of RF power and Ar/$O_2$ ratio were 140[W] and 80/20, respectively. Deposition rate of SCT thin films was about 18.75[${\AA}/min$] at the optimum condition. The capacitance characteristics had a stable value within ${\pm}4[%]$. The drastic decrease of dielectric constant and increase of dielectric loss in SCT thin films were observed above 200[kHz].
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[게시일 2004년 10월 1일]
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