곤충을 기주로 하여 자실체를 형성하는 곤충기생균(entomopathogenic fungi)의 일종인 풍뎅이동충하초(Cordyceps scarabaeicola Kobayasi)는 풍뎅이상과(Scarabaeoidea)의 성충을 기주로 하여 자실체를 형성한다(Evans, 1982; Evans and Samson 1982; Humber(unpublished); Kobayasi, 1940). 풍뎅이동충하초(C. scarabaeicola)는 자낭균아문(Ascomycotina), 핵균강(Pyrenomycetes)의 맥각균목(Clavicipitales), 동충하초과(Cordycipiteae), 동충하초속(Cordyceps)에 속하며 한국을 비롯하여 중국, 일본 등 전 세계적으로 분포한다(Dennis, 1981; Sung, et al, 1997; 청수. 1981). 또한 이(1996)는 풍뎅이동충하초의 불완전세대는 Beauveria속의 분생포자를 형성한다고 보고하였다. 풍뎅이동충하초는 MCM에서 잘 생장하나 균사밀도는 PDA배지가 가장 적합한 것으로 나타나 다른 버섯균과는 별다른 차이를 보이지 않았으며 온도는 $25^{\circ}C$가 가장 좋았으며 pH는 $7.5{\sim}9.0$으로 균주에 따라 차이를 보였다. 이러한 결과는 이(1996)의 연구결과인 PD배지와 $24^{\circ}C$에서 우수한 균사생장을 보였고 $30^{\circ}C$에서는 약간의 균사생장이 억제되었고, pH $8{\sim}9$의 알카리성 범위에서 우수한 균사생장을 보였다는 보고와 거의 일치함을 보였다. 풍뎅이동충하초는 탄소원을 첨가하지 않은 것에서 균사생장이 가장 높게 나타났지만 균사밀도는 가장 낮게 나타났다. 균사생장과 밀도는 lactose가 적합한 탄소원으로 나타났으며, 질소원은 ammonium phosphate에서 높은 균사생장을 보여 모두 무기태 질소원에서 우수함을 보였다.
Purpose: The enhanced cytotoxic effect of combined treatment of hyper-thermia and chemotherapy by increasing intracellular acidity with HMA was investigated. Materials and Methods: FSall tumor cells were injected on the hindlegs of female $C_3H$ mice. When the tumor volume reached about 200mm3, experiments were performed on the groups classified as follows: Group I :Control, Group II : Melphalan alone (2.5mg/kg, 5mg/kg, 10mg/kg, 15mg/kg), Group III : Heat alone $(42.5^{\cdot}C$ for 1 hour) Group IV : Melphalan + Heat $(42.5^{\cdot}C$ for 1 hour), Group V : HMA(10mg/kg) + Melphalan(5.0mg/kg) + Heat$(42.5^{\cdot}C$ for 1hour). Each group included 8-12 mice on each experiment HMA (3-amino-6-chloro-5-(1-homopiperidyl )-N-(diaminomethylene) -c-pyrazinecarboxamide), an analog of amiloride which increases intracellular pH(pHi) was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMS) and injected into the tumor-bearing mice through the tail vein. 10mg/kg of HMA and each dose of melphalan were injected into peritoneum of the tumor-bearing mice 30 minutes before heating. Tumor growth delay was calculated when the tumor volme reached at $1500mm^3$ Excision assay was performed on each group and repeated 2-4 times. Results : Tumor growth delay of each experimental groups at $1500mm^3$ were 9, 10, 13 and 19 days respectively. In vivo-in vitro excision assay using FSall tumor cells, the cytotoxicity of each experimental groups was $1.2{\times}10^7,\;1{\times}10^7,\;6{\times}10^6,\;1.7{\times}10^6\;and\;1{\times}10^5$ clonogenic cells/gm respectively When HMA was added to the combined treatment of heat and .chemotherapy, the tumor growth was delayed more than combined treatment without HMA i.e., 6 days tumor growth delay at $1500mm^3$ of tumor volume. Conclusion: The combined effect of cytotoxicity by heat and chemotherapy can be much more enhanced by HMA.
비교적 효율적으로 이용되고 있지 않는 섬유성물질의 이용성을 높이고 섬유소 자화세균에 의한 섬유소 단세포단백을 생산할 목적으로 전보에서 분리, 동정한 Collulomonas flavigena GFB 24-1의 몇 가지 균학적 성질을 통한 이용성을 검토한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 섬유질 자화세균 생육배지에서 배양한 결과 pH 7.0에서 50시간 배양하였을 때 균체증식이 가장 좋았고, 배양시 유리되는 단백질은 배양중 시간이 경과됨에 따라 증가하였다. 2. Cellulolytic activity는 pH 5~7에서 40~50시간, 배양하였을 때 가장 좋았다. 4. 생육배지에서 배양시 기질의 농도의 증가에 따라 6%까지는 균체증식이 직선적으로 증가하였으며 8%까지는 완만하게 증가하다가 9~10%농도에서는 감소하였다. 5. NaOH 처리한 볏짚은 기질로 하여 진탕 flask에서 배양한 결과 48기산 배양하였을 때 균체증식이 10.6mg/ml로써 가장좋았다.
전통도료인 황칠의 재현을 위한 황칠나무의 다량 증식 및 이용에 관한 연구의 일환으로 황칠나무의 자생지 분포조사 및 황칠의 성분 분석을 실시하여 다음과 같은 결론을 얻였다. 1. 황칠나무의 자생지는 완도, 상황봉 등 8개 지역이었으며, 해남 두륜산은 처음으로 자생지로 확인되었다. 2. 황칠나무는 해발 lOO~450m 사이에셔 자생하고 있으며 해발 200m 부근에서 빈도가 가장 높게 냐다났다. 또한 자생지의 토양은 pH 4.9~5.8로 약 산성이며, 수분 함유량은 16.5~27.4%로 비교적 습 기가 많은 지역에서도 자생하는 것으로 나타났다. 3. 군락지 조새에서 보길도와 제주도가 우점도 및 군도가 교목층에셔 3.3으로 높게 나타났으며 완도는 아교목층에서 많이 나타났다. 4. 생육상황은 보길도에서 가장 높게 나타나 흉고 직경 1.O~20cm, 높이 O.2~9m 까지의 개체가 다수 확인되었다. 5. 황칠의 성분을 분석한 결과 대표적 인 성분이 ${\beta}$- selinene과 capnellane-8-one을 확인하였다.
S.albus subsp.와 S.globosus에서 Tetracyclin과 Streptomycin 같은 항생물질을 생성된다는 것은 이미 전보에서 밝힌 바 있다. 이들 두 種의 생장최적조건과 항생제 생성정도와의 관계를 배지성분과 그 농도에 따라 검토하였다. 그 결과 S.albus subsp.와 S.globosus 모두 배양시간이 130~150시간이 될때 항생물질 생성과 균체량이 최고에 달했다. 그리고 PH는 그 근처에서만 떨어지는 현상을 볼 수 있었다. 또한 두 균주 모두 탄소원으로서는 starch(4~5%)질소원으로서는 soybeam meal(1.5~2.0%)에서 균체의 생장도 양호하고 향균력도 높게 나타났다. 이외의 성분으로는 calcium carbonate(2mg/ml), potassium phosphate' dibasic(0.05M~0.01M), magnesium sulfate(0.01M~0.03M) ferric chloride(0.01M)가 가장 생장에 좋은 배지농도로 추정되며 zinc ion(0.0005M)은 균체생장을 현저하게 억제하였다.
본 실험은 무기 토양개량제가 골프장 그린의 지반 조성용으로 사용 시 크리핑 벤트그래스 '펜크로스'의 생육에 미치는 영향을 구명하고자 2005년 5월부터 12월까지 신원골프장 너스리에서 수행되었다. 조사내용은 토양 pH, 비중, 보수력, 투수계수, 경도, 뿌리길이, 잔디 분얼경 밀도, 건물중을 조사하였다. 무기 토양개량제 처리구의 토양 pH는 잔디 생육에 적합한 6.7~6.8, 토양비중은 S 100%처리구가 1.48로 다른 처리구 1.28-1.38내외보다 무거웠다. 투수속도는 ZC 15%+P 5%+S 80%와 ZC 10%+S 90% 처리구가 USGA 기준보다 2-4배 빨랐다. 토양 경도는 S 100%에서 가장 높았다. 뿌리길이는 무기 토양개량제가 혼합된 ZC10%+S90% 처리구가 7.6~10.0 cm로 가장 길었다. 여름철 생육 부적기의 잔디밀도는 P 5%+S 95% 처리구가 다른 처리구보다 분얼경수가 4-7개 더 많았으며, 생육 적기에는 ZC 10%+P 5%+S 85% 처리구가 2-3개 많았으며 통계적 유의성이 있었다. 생육 부적기 건물중은 ZC 10%+P 5%+S 85% 처리구가 가장 무거웠으며, 생육 적기의 건물중은 P 5%+S 95% 처리구가 가장 무거웠다. 따라서 USGA 그린 조성 시 혼합층에 무기 토양개량제를 단독(5-15%) 사용 것보다 피트모스(5%)와 혼합하여 사용한다면 그 효과는 상승할 것으로 판단된다.
Urea($(NH_2)_2CO$) 및 THAMP(Tris(hydroxymethyl)aminomethane phosphate) 유기 단결정은 레이저의 파장변환소자등의 응용에 유용한 새로운 유기 비선형 광학재료(NLO)이다. 온도하강법과 온도차법을 이용하여 urea와 THAMP 유기 단결정의 육성을 시도하였으며 이들 방법에 따른 육성조건을 확립하였다. Urea의 용매로는 용해도의 측정을 통하여 메탄올이 가장 적합하였으며, 용해도에 대한 온도계수는 posotive였으며, 용해열은 - 2.58 kcal/mol이었다. 육성된 urea 결정은 z축의 성장이 지배적이었고, z축의 성장제어와 x, y축의 성장을 위하여 $NH_4_H_2PO_4$, KCL, $H_3PO_4$, $CaCl_2{\cdot}2H_2O$, $C_2H_5OH$의 첨가제를 사용하여 z축의 성장제어와 x, y축의 성장을 증진시켰다. THAM과 $H_3PO_4$의 화학 양론적 혼합비 1 : 1의 몰비로부터 양질의 THAMP 유기 단결정을 육성하였고 용해도에 대한 온도계수는 positive였으며, 용해열은 - 1.70 kcal/mol이었다.
최근 고토비료로 등록된 수산화고토는 황산고토와 비교할 때 용해도가 매우 낮으며 토양반응에 미치는 영향 측면에서도 다른 특성을 가지고 있다. 본 연구에서는 이들 두 가지 고토비료를 표준시비량인 $300kg\;MgO\;ha^{-1}$ 수준으로 처리한 경산통 토양에서 배추 재배하여 그 비효를 비교하였다. 수산화고토는 배추의 엽수와 생체중을 증가시키는 효과를 보였으나, 생육 전반에 미치는 효과에 있어서는 황산고토와 비교할 때 통계적으로 유의성 있는 차이를 보이지는 않았다 ($p{\leq}0.05$). 배추의 마그네슘 함량은 생육초기에는 황산고토 처리구에서 높았으나 수확기에 조사된 결과에서는 수산화고토 처리구에서 높았으며, Ca, P, 및 K 함량은 황산고토에 비하여 수산화고토 처리구에서 높았다. 그러나 비종간의 이들 양분 흡수의 차이는 통계적으로 유의하지 못하였다. 황산고토를 처리한 토양의 pH는 대조구에 비하여 낮아졌으나, 수산화고토 처리구에서는 pH가 높아졌고 유효인산 함량 또한 증가하였다. 침출성 Ca 함량은 수산화고토 처리구에 비하여 황산고토 처리구에서 낮게 나타났다. 토양반응과 양분의 유효도에 미치는 영향의 차이는 비종간의 화학적 특성 차이에 기인하는 것으로 판단된다. 따라서 동일한 수준으로 시용할 때, 수산화고토와 황산고토의 작물에 대한 비효는 대등한 것으로 결론지을 수 있으며, 산성토양이나 용탈이 쉽게 일어날 수 있는 사질 토양에서는 산성비료이며 수용성인 황산고토보다 수산화고토의 시용이 유리할 것으로 판단된다.
We have designed nucleotide sequences of hEGF structural gene to eliminate the N-terminal methionine residue incorporated during the translation initiation step, and constructed recombinant human epidermal growth factor (rhEGF) secretion plasmids pYHB101, and pYHB2 in which pelB signal sequence-hEGF gene was expressed under the control of the T7, and tac promoter, respectively. We also constructed pYHB1 vector which contains rhEGF gene controlled by T7 promoter. The transformant with pYHB101 showed relatively slow growth pattern compared to the transformant with pYHB1. However, we observed that the transformant with pYHB101 secreted rhEGF of 13 mg/l significantly after 5 hr induction with 1 mM IPTG and that the T7 promoter was more effective than tac promoter when connected to pelB signal sequence. The amount of rhEGF was 14 mg/l under the sub-optimized condition.
Using a methylotrophic yeast Hansenula polymorpha, a heterologous gene expression and secretion system was developed for the production of hEGF(human Epidermal Growth Factor) which has been shown to promote epithelial cell proliferation and to inhibit gastric acid secretion. The hEGF gene was chemically synthesized according to the preferred codon usage in H. polymor- pha and expressed under the control of the strong and inducible methanol oxidase(MOX) promoter. The mating factor $\alpha$ pre-pro leader sequence of Saccharomyces cerevisiae was employed for hEGF to be secreted into the extracellular medium. This expression cassette was stably integrated into the host chromosomal DNA. Mature hEGF was efficiently expressed and secreted into the extracel- lular medium. About 24 mg/l of hEGF was detected in the cuture supernatant of a transformant with pA-EGF3 under the suboptimal culture conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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