Fucoidan, one of the dominant sulfated polysaccharides extracted from brown seaweed, possesses a wide range of biological activities. Transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$) plays a pivotal role in the pathogenesis of pulmonary fibrosis, by stimulating the synthesis of profibrotic factors. In this study, we investigated the in vitro effects of fucoidan on collagen synthesis, ${\alpha}-smooth$ muscle actin (${\alpha}-SMA$) expression, and interleukin (IL)-6 production in $TGF-{\beta}$-stimulated human pulmonary fibroblasts. The expression of type I collagen and ${\alpha}-SMA$ was detected by Western blot, and the production of IL-6 by enzyme-linked immunosorbent assay. $TGF-{\beta}1$ treatment of pulmonary fibroblasts enhanced the expression of ${\alpha}-SMA$, type I collagen, and IL-6 whereas these effects were inhibited in cells pretreated with fucoidan. The activation of Smad2/3, p38 mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and Akt was also inhibited in fucoidan-pretreated, $TGF-{\beta}1-stimulated$ human pulmonary fibroblasts. These data demonstrate the anti-fibrotic potential of fucoidan in $TGF-{\beta}-induced$ human pulmonary fibroblasts, via the inhibition of Smad2/3, p38 MAPKs, and Akt phosphorylation. Our results suggest the therapeutic potential of fucoidan in the prevention or treatment of pulmonary fibrosis.
To evaluate the antitumor activity and antimetastatic effects of Bruceae FructusCBF), studies were done experimentally. The results were obtained as follows : 1. In cytotoxicity against A549, SK-MEL-2, MCF-7 and XF498 cell concentration inhibiting cell growth up to below 50% of control was recognized at $25{\mu}g/m{\ell}$ of BF. Also BF inhibited cell growth up to below 50% of control against HCT15 cell at $12.5{\mu}g/m{\ell}$, so it showed stronger cytotoxicity against HCT15 cell than another cancer cell. 2. In Inhibitory effect on activity of DNA topoisomerase- I, the $IC_{50}$ was shown $10-50{\mu}g/m{\ell}$ of BF. 3. The T/C% was 143.4 in BF treated group in S-180 bearing ICR mice. 4. The concentration inhibiting adhesion of A549 and SK-OV-3 to complex extracellular matrix up to below 30% of control was recognized at $1{\mu}g/m{\ell}$ of BF. 5. In pumonary colonization assay, a number of colonies in the lungs were decreased significantly in BF treated group as compared with control group. These results suggested that BF extracts might be usefully applied for prevention and treatment of cancer.
We have developed 8 peptide derivatives as potential MC1R antagonists and their inhibitory effects on ${\alpha}$-MSH induced cell growth in cultured normal human melanocytes (NHM) were investigated. From these experiments, the two most potent peptide derivatives, 5-phenylvaleric acid-(D)His-Arg-Trp-$(Lys)_6NH_2$ (P 6) and 5-phenylvaleric acid-(D)His-Arg-Trp-$(Lys)_9NH_2$ (P 7) were selected for further studies. In ${\alpha}$-MSH depleted NHM cells, we have found that the treatment with 1 ${\mu}M$ of these two peptide derivatives, P 6 and P 7, inhibited the cell proliferation induced by the addition of 1 nM ${\alpha}$- MSH by 70% and 72%, respectively. In NHM cells without previous ${\alpha}$-MSH depletion, 1 ${\mu}M$ treatment in the presence of 10 nM ${\alpha}$-MSH resulted in 70% (P 6) and 80% (P 7) decrease in cell growth and 64% (P 6) and 71% (P 7) reduction in melanin synthesis, respectively. The peptide derivatives P 6 and P 7 were proved to have no apparent cytotoxicity and inhibited the elevation of intracellular cAMP concentration triggered by ${\alpha}$-MSH. In conclusion, our data suggest that the peptide derivatives reported in this study, 5-phenylvaleric acid-(D)His-Arg-Trp-$(Lys)_6NH_2$ (P 6) and 5-phenylvaleric acid-(D)His- Arg-Trp-$(Lys)_9NH_2$ (P 7) strongly antagonize ${\alpha}$-MSH, inhibit cell proliferation and melanin synthesis, and lower the intracellular cAMP concentration, hence have a promising potential as a novel skin lightening agent.
To develop a functional chungkookjang; the anticancer effects of chungkookjangs prepared with different varieties of soybeans, starters, fermentation periods and seasoning additive ratios; were studied against AGS human gastric adenocarcinoma cells using the MTT assay, at different stages chungkookjang processing. The chungkookjang samples exerted different antiproliferative effects according to the variety of soybeans used. The chungkookjangs manufactured with soybean var. manrikong exhibited the highest cytotoxicity against AGS human cancer cells. The chungkookjangs fermented with rice straw and B. licheniformis strongly inhibited the growth of the AGS human cancer cells. All fermented chungkookjangs had a strong inhibitory effect on the growth of the cancer cells; however, the non-fermented soybean (chungkookjang) showed a low inhibition rate. The fermented chungkookjangs mixed with red pepper powder (RPP) and garlic exhibited strong antiproliferative effect against the cancer cells, and chungkookjang prepaved with 1.1 % RPP and 1.1 % garlic showed the highest cytotoxicity against the cancer cells. The functional chungkookjang fermented with soybean variety of manrikong and B. licheniformis for 3 days at 4$0^{\circ}C$ and then mixed with 7.9% salt, 1.l% RPP and 1.1% garlic, exhibited a higher antiproliferative effect than the chungkookjangs prepared by traditional or modified methods, according to the MTT assay. The functional chungkookjang exhibited a similar anticancer effect to the traditional doenjang. These results indicate that the fermentation period and the ratio of seasoning additives, as well as the variety of soybeans and starter cultures may affect the degree of the anticancer effect of chungkookjang.
Microcystins (MCs) produced by cyanobacteria are severe hepatotoxins for mammalian and protein phosphatase inhibitors. Irrigation water for grain and vegetables is often contaminated with cyanobacteria and microcystin during warm seasons. We assessed the effects of various concentrations (0, 0.01 to $10{\mu}gmL^{-1}$) of microcystin-LR (MC-LR) and microcystin-RR (MC-RR) exposure on Oryza sativa (rice) and Brassica oleraces var. italica (broccoli). The $EC_{50}$ of leaves and roots of rice was 0.9 and $1.1{\mu}gMC-LRmL^{-1}$, respectively. The no observed effect level (NOEL) of rice was less than $0.1{\mu}gmL^{-1}$ ($100{\mu}gL^{-1}$). The $EC_{50}$ of the stems and roots of broccoli was 8.7 and $7.2{\mu}gMC-RRmL^{-1}$, respectively. There was no difference in the germination rate of broccoli among microcystin-RR concentrations. After exposure to 0, 0.01 to $10{\mu}gmL^{-1}$ MC-RR for seven days, 14, 89 and 154 ng mg-1 (dry weight) MC-RR accumulated in B. oleracea. These $EC_{50}$ values showed that microcystin-LR and -RR affected the growth of rice and broccoli. These findings suggest that MC is carried into terrestrial ecosystems via irrigation, and that the biota of higher ecological niches can be influenced by MC through bioaccumulation. Therefore, a guideline for MC concentrations in irrigation water should be set using the NOEL.
Essential oil은 식물로부터 추출한 휘발성의 호지방성 화합물로서 essential oil은 잠재적으로 항균, 항진균, 진경련, 항말라리아성, 곤충퇴치능력 등의 생물학적 효과를 가지고 있다. 본 연구에서는 다양한 방향식물에서 추출한 Citral, Pineole, Linalool, Eugenol, Limonene, Pinene 등으로 구성된 다섯종류의 essential oil을 사용하였으며, 여덟 군의 중요한 병원성 세균인 Streptococcus mutans(S. mutans), Staphylococcus aureus(S. aureus), Streptococcus sanguis(S. sanguis), Streptococcus anginosus(S. anginosus), Actinobacillus actinomycetemcomitans(A. actinomycetem- comitans), Streptococcus sobrinus(S. sobrinus), Staphylococcus epidermidis(S. epidermidis), Esherichia coli (E. coli)에 대한 저항성으로서 항균능력을 평가하였다. Essential oil의 항균능력은 용액희석방법을 사용하여 검사하였으며, essential oil 농도범위는 10 mg/mL, 5 mg/mL, 2.5 mg/mL, 1.25 mg/mL, 0.625 mg/mL, 0.516 mg/mL, 0.3125 mg/mL, 0.078 mg/mL, 0.039 mg/mL, 그리고 0.015 mg/mL였다. Essential oil은 용량 의존적으로 시험 균주의 성장을 효과적으로 억제하였으며, NM을 제외하고 R, LG, FR, O oil은 저농도에서 구강 병원성 미생물의 성장을 억제하였다. 또한 사용된 essential oil은 E.coli와 S. epidermidis의 성장에는 탁월한 억제효과를 보이지는 못했으나 구강 병원성 미생물에 대해서는 특별한 성장 억제효과를 나타냈다.
In the previous paper (Kim et al., Glycoconjugate Journal 16, 247-252, 1999), heteropolysaccharides from Korean medicinal plant, Phellodendri cortex (Hwangbek) showed a poten B-Iymphocyte-stimulating activity in a system using polyclonal antibody forming cells in C57BL/6XC3H mice at dosages of 2-10 mg. In a series of biolgical active polysaccharides from natural medicinal plants, the polysaccharide fractions were isolated and purified from Phellodendron chinese SCHNEID, and antitumor activities were examined at dosages of 2, 5 and 10 mg/100 g. F-7 and F-8 showed the highest tumor inhibitory activities (inhibition ratio 96.4 and 98.2% in 2 mg/100 g), and in dose of 5 mg/100 g, the inhibitory ratios were 95.3 and 97.5%, respectively. Furthermore, 10 mg/100 g of intraperitoneal (i.p.) injection gave 97.3 and 98.7% of inhibition. In oral administration, the inhibitory activities were not markedly observed, indicating that the polysaccharides are directly acting to immune system. When the effects on TS and TK activities were determined, TS activities in the F-2 and F-7-treated mice were markedly suppressed to 73.7% and 79.5% of that in the control (p<0.01), while there was little difference in TK activity with a slight decrease in F-2 only. However, in i.p. injection, TS activities in the F-2, F-5, F-7 and F-8-treated mice were markedly suppressed to 83% to 85% of that in the control (p<0.01). Furthermore, there was also significant differences in TK activities in F-2, F-5, F-7 and F-8-treated mice (p<0.05). Therefore, polysaccharide fraction F-8 was further purified to active fractions of F-9 and F-11 by gel permeation chromatography using TSK Gel HW50S. The purified polysaccharides of F-9 and F-11 were composed of GlcNAc (47.3%), Gal (24.7%) and Man (28.0%). These results clearly indicated that the i.p. injection is much effective to suppress tumor growth than oral administration.
50가지 생약재를 95% 에탄올과 물추출하여 식중독 세균인 S. aureus와 E. coli O157:H7에 대한 항균활성을 조사하였다. 한천배지확산법에 따른 생육저해효과를 측한 결과, S. aureus 에 대하여 우슬>목단피>지실>황백, 건강, 민들레 순으로, E. coli O157:H7에 대하여 목단피>우슬>건강>지실, 황백 순으로 활성을 나타내었다. MIC는 S. aureus에 대하여 우슬이 156.25 $\mu$g/mL, 목단피와 황백이 625 $\mu$g/mL로 나타났으며, E. coli O157:H7에 대하여 우슬과 목단피의 MIC는 각각 625, 312.5 $\mu$g/mL로 높은 항균력을 나타내었다. 가장 높은 활성을 보인 우슬과 목단피를 용매분획(hexane, CHC1$_3$, ethyl acetate, butanol)하여 한천배지 확산법에 의한 두 균에 대한 생장저해 효과를 측정하였다. 우슬은 ethyl acetate 분획물에서, 목단피는 CHC1$_3$과 ethyl acetate 분획물에서 각각 높은 활성을 나타내었다.
본 연구에서는 천연물 유래 항균소재로써 노각나무의 이용 가능성을 알아보기 위해 노각나무 가지, 줄기, 잎을 에탄올에 추출한 다음 P. aeruginosa에 대한 추출물의 항균활성을 조사하였다. 노각나무 부위별 추출물(1 mg/disc) 중 잎과 줄기 추출물이 P. aeruginosa에 대해 항균활성을 나타내었으며, 잎 추출물의 항균활성이 가장 우수하였다. P. aeruginosa에 대한 노각나무 잎 추출물의 MIC는 0.8 mg/ml였고 정균작용을 나타내었다. 노각나무 잎 추출물이 0.2-2.0 mg/ml 농도로 처리된 배양액에서 P. aeruginosa의 바이오필름 형성은 추출물의 농도가 증가할수록 농도의존적으로 억제되는 경향을 보였다. 또한 주사전자현미경으로 노각나무 잎 추출물(0.8 mg/ml)이 P. aeruginosa의 바이오필름 형성에 미치는 영향을 관찰한 결과에 의하면 추출물 대신 DMSO를 처리한 대조구에서는 세포 주변에서 EPS와 바이오필름이 관찰되었지만 추출물을 처리한 처리구의 세포 주변에서는 EPS와 바이오필름이 관찰되지 않았다. qRT-PCR을 이용하여 P. aeruginosa의 QS 관련 유전자인 lasI와 rh1I mRNA 발현 변화를 qRT-PCR로 확인한 결과, 노각나무 잎 추출물이 0.2-2.0 mg/ml의 농도로 처리된 배양액에서 lasI와 rh1I mRNA 발현은 추출물의 농도가 높아질수록 농도의 존적으로 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하면 노각나무 잎 추출물은 P. aeruginosa에 대한 항균활성과 바이오필름 형성 억제능이 우수하기 때문에 천연물 유래 항균소재로써 이용 가능성이 높을 것으로 판단된다.
본 연구는 인 축적능을 갖는 것으로 알려진 미생물인 Alcaligenes sp.의 생장 및 인 축적에 중금속이 미치는 영향을 정량적으로 평가하고자 실시되었다. 미생물의 생장 및 인 제거에 미치는 저해효과를 정량적 평가를 위해 생장저해 정도와 인 제거반응저해 정도를 IC50와 EC50를 이용하여 표현하였고, 중금속 간 교호작용의 평가를 위해 Additive Index Value method (A.I.V) 를 이용하여 중금속 간 혼합효과를 판단하였다. 실험 결과를 통해 Alcaligenes sp.의 생장 및 인 제거에 미치는 저해효과가 가장 큰 중금속은 카드뮴(Cd)이었다. 반면, 상대적으로 저해효과가 약한 중금속은 니켈(Ni)이었다. 모든 중금속은 처리 농도가 증가할수록 미생물의 생장과 인 제거율을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다. 단일 중금속 처리시 IC50에 해당하는 농도는 Cd 0.38, Cu 16.43, Zn 12.17, Pb 11.68, Ni 15.35 mg/L 이다. 연구에 사용된 균주 Alcaligenes sp. 의 인 제거율은 88.1%였고, EC50에 해당하는 농도는 Cd 0.31, Cu 10.37, Zn 5.57, Pb 6.74, Ni 12.04 mg/L 이다. 두 종의 중금속을 혼합 처리하였을 때 IC50에 해당하는 농도가 가장 낮은 중금속 처리구는 Cd + Cu 처리구였으며, 가장 높은 처리구는 Zn + Pb 처리구였다. EC50의 농도는 Cd + Cu 처리구에서 가장 낮은 농도를, Cu + Ni 처리구에서 가장 높은 농도를 보였다. 중금속 간 교호작용은 대부분 길항효과(antagonistic effect)를 보였으나, IC50의 경우, Cu + Zn, Cu + Pb, Cu + Ni, Pb + Ni 처리구에서 상승효과(synergistic effect)를 보이는 것을 확인할 수 있었고, EC50에서는 Cu + Zn, Pb + Ni 처리구에서 상가효과(additive effect)를, Cu + Ni 처리구에서 상승효과(synergistic effect)를 보였다. 연구 결과는 중금속을 단일 및 2종 혼합 처리하였을 때 중금속이 인 제거 미생물의 생장 및 기능에 미치는 독성효과에 대한 기초자료를 제공함으로써 추후 진행될 미생물 단백질 동정, 중금속 독성평가에 관한 연구에 활용될 수 있을 것이라 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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