In this study, the roles of the p38 MAPK, ERK1/2 and JNK signaling pathway in IGF-I-induced AR induction and activation were examined. C2C12 cells were treated with IGF-I in the absence or presence of various inhibitors of p38 MAPK (SB203580), ERK1/2 (PD98059), and JNK (SP600125). Inhibition of the MAPK pathway with SB203580, PD98059, or SP600125 significantly decreased IGF-I-induced AR phosphorylation and total AR protein expression. IGF-I-induced nuclear fraction of total AR and phosphorylated AR were significantly inhibited by SB203580, PD98059, or SP600125. Furthermore, IGF-I-induced AR mRNA and skeletal ${\alpha}-actin$ mRNA were blocked by those inhibitors in dose-dependent manner. Confocal images showed that IGF-I-induced AR nuclear translocation from cytosol was significantly blocked by SB203580, PD98059, or SP600125, suggesting that the MAPK pathway regulates IGF-I-induced AR nuclear localization in skeletal muscle cells. The present results suggest that the MAPK pathways are required for the ligand-independent activation of AR by IGF-I in C2C12 skeletal muscle cells.
The present study was conducted to determine whether skin spread of Myrrha and Tending Diancibo Pu (TDP) irradiation have a remarkable effect on the cell regeneration as well as wound healing following dermal scald burn injury. Burn injury was induced on dorsal surface $(TBSA\;15\~20\%)$ by scald burn in rats. Postburn concentration of serum protein was significantly decreased compared with sham-treated, double treatment with Myrrha and TDP was significantly increased the protein concentration compared with that of burn control. The content of keratinocyte growth factor (KGF) at 48 h is higher than that of at 24 h, and double treatment with Myrrha and TDP was the most effective to increase the production of KGF in all experimental groups. Morphologically, epithelial regeneration and dermal collagen synthesis by fibroblasts were accelerated in Myrrha and TDP treated group compared with bum control at same time postburn. At 48 h after burn, all dermal connective tissues are recovered to new collagen fibers in case of Myrrha and TDP double treated group. The data suggest that double treatment with skin spread of Myrrha and TDP radiation have a remarkable effect of to accelerate cell regeneration and wound healing in case of scald burn skin.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.24
no.3
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pp.470-475
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2010
Calcium-channel blockers such as nifedipine could be associated with gingival overgrowth. The aim of this study was to examine the role of Paeonia lactiflora Pallas(PLP) on nifedipine-induced gingival hyperplasia along with submandibular secretory function in rats. Animals in divided groups received nifedipine (250 mg/kg) alone and in PLP(100, 200 mg/kg) in orally administration for 3 weeks. Pure submandibular saliva was collected intraorally by micropolyethylene cannula and the mandibular gingiva was examined by means of dissecting microscope for signs of redness, tickness, inflammation and exuda. Twenty-one days nifedipine treatment induced gingival hyperplasia accompanied with reduced salivary flow rate and concentrations total protein, epidermal growth factor(EGF) and calcium in comparison with normals. Co-treatment of animals with nifedifine and PLP protected from gingival hyperplasia and retained flow rate, and concentrations of total protein, EGF and calcium in normal levels.
Naphtodianthrone hypericin produced a potent antitumor activity in vitro against several tumor cells. However, it did not show any cytotoxicity on normal cells such as Macaccus rheus monkey kidney cells (MA-104) and primary cultured rat hepatocytes up to $500{\mu}M$ concentration. Hypericin added to A431 human epidermoid carcinoma cell membrane inhibited the autophosphorylation of the epidermal growth factor (EGF) receptor and the tyrosine phosphorylation of RR-SRC peptide catalyzed by an EGF-receptor. Similarly, treatment of the A431 cells with hypericin inhibited the tyrosine phosphorylation of EGF-dependent endogenous EGF-receptor by western blotting analysis. Hypericin also inhibited the T cell PTK, $P56^{lck}$, in a dose-dependent fashion with an $IC_{50}=5{\mu}M$. The tyrosine phosphorylation, on RR-SRC peptide and EGF-induced receptor autophosphorylation, either in vitro or in intact cells was inhibited by hypericin at the same concentration as that in A431 cell proliferation. These data suggest that hypericin directly inhibits EGF-receptor and $P56^{lck}$ PTK activity in vitro and can mediate such action in vivo.
In the present study we determined if NELL2, a neural tissue-specific protein containing 6 epidermal growth factor (EGF)-like repeat domains, plays an important role in the regulation of puberty initiation in the rat hypothalamus. We origin811y found that NELL2 is a new estrogen-responsive gene in hypothalami derived from estrogen-sterilized and control rats using a PCR differential display. In the 40-day-old female rat hypothalamus, NELL2 was up-regulated by neonatal estrogen treatment. In situ hybridization histochemistry showed that NELL2 is very abundant in the ventromedial hypothalamic nucleus that is responsible for the control of sex behavior. NELL2 mRNA level in the medial basal hypothalamus showed a dramatic increase before female puberty onset, which suggests that NELL2 may be involved in the process regulating female puberty onset. We attemped to block NELL2 synthesis with intracerebroventricular injection of an antisense oligodeoxynucleotide (ODN) to the NELL2 mRNA, and examined its effect on the puberty onset of the female rat. The antisense ODN significantly delayed puberty initiation determined by vaginal opening. In summary, NELL2 may play an important role in the regulation of female puberty onset.
Kim, Kyeoung-Hwa;Park, Chang-Eun;Yoon, Se-Jin;Lee, Kyung-Ah
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.32
no.3
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pp.269-277
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2005
Objectives: Previously, we sought to compile a list of genes expressed during early folliculogenesis by using cDNA microarray to investigate follicular gene expression and changes during primordialprimary follicle transition and development of secondary follicles (Yoon et al., 2005). Among those genes, a group of genes related to the cell size growth was characterized during the ovarian development in the present study. Methods: We determined ovarian expression pattern of six genes related to the cell size growth (cyr61, emp1, fhl1, socs2, wig1 and wisp1) and extended into CCN family (${\underline{c}}onnective$ tissue growth factor/${\underline{c}}ysteine$-rich 61/${\underline{n}}ephroblastoma$-overexpressed), ctgf, nov, wisp2, wisp3, including cyr61 and wisp1 genes. Expression of mRNA and protein according to the ovarian developmental stage was evaluated by in situ hybridization, and/or semiquantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), and immunohistochemistry, respectively. Results: Among 6 genes related to the cell size growth, cyr61 and wisp1 mRNA was detected only in oocytes in the postnatal day5 mouse ovaries. cyr61 mRNA expression was limited to the nucleolus of oocytes, while wisp1 was expressed in the cytoplasm and nucleolus of oocytes, except nucleus. cyr61 mRNA expression, however, was found in granulosa cells from secondary follicles. The rest 4 genes in the cell size growth group were detected in oocytes, granulosa and theca cells. Cyr61 and Wisp1 proteins were expressed in the oocyte cytoplasm from primordial follicle stage. Especially, Cyr61 protein was detected in pre-granulosa cells, Wisp1 protein was not. By using RT-PCR, we evaluated and decided that Cyr61 protein is produced by their own mRNA in pre-granulosa cells that was not detected by in situ hybridization. cyr61 and wisp1 genes are happen to be the CCN family members. The other members of CCN family were also studied, but their expression was detected in oocytes, granulose and theca cells. Conclusions: We firstly characterized the ovarian expression of genes related to the cell size growth and CCN family according to the early folliculogenesis. Cyr61 protein expression in the pre-granulosa cells is profound in meaning. Further functional analysis for cyr61 in early folliculogenesis is under investigation.
We have investigated the effect of melatonin (MLT) on specific growth rate (SGR% $day^{-1}$), condition factor (k), gonado-somatic-index (GSI), histological structures of gonads, serum as well as gonadal protein and lipid in Nile tilapia Oreochromis niloticus. MLT treatment in the dose of 25 ${\mu}g/L$ for three weeks reduced SGR% $day^{-1}$ ($0.9{\pm}0.04$) as compared to control ($1.23{\pm}0.026$). The GSI value was significantly (p<0.05) reduced to $1.77{\pm}0.253$ from control where it was $2.56{\pm}0.25$. Serum protein level increased from $9.33{\pm}2.90$ mg/ml (control) to $11.67{\pm}1.45$ mg/ml after MLT treatment while there was depressed serum triglycerides ($86.16{\pm}1.078$ mg/dl) and cholesterol ($126.66{\pm}0.88$ mg/dl) as compared to control values where these were $123.0{\pm}1.23$ mg/dl and $132.0{\pm}1.65$ mg/dl respectively. Histological structure of ovary showed small eggs of early perinucleolus stage after MLT treatment while testicular structure of control and MLT treated fish was more or less similar. It is concluded that exogenous melatonin suppressed SGR% $day^{-1}$, GSI, ovarian cellular activity, protein and lipid biosynthesis, in tilapia suggesting that melatonin is useful in manipulating the gonadal maturity in fishes.
This study examined the effect of insulin-like growth factor (IGF)-I expression in the liver and muscle on the growth of Paralichthys olivaceus fed diets low in fish meal. A feeding experiment was conducted at Jeju National University, Jeju Island, Korea. Groups of P. olivaceus (total initial weight: 200 g) were maintained for 20 weeks on one of five experimental diets containing different proportions of fish meal. Diets containing 0%, 20%, 30%, 40%, and 50% fish meal were labeled FM0, FM20, FM30, FM40, and FM50, respectively. Fish growth was observed every 4 weeks during the feeding experiment, and plasma and liver and muscle tissues were sampled. Plasma IGF-I levels were analyzed using an ELISA kit. The mechanism of IGF-I receptor signaling was examined using immunoblotting and reverse transcription-polymerase chain reaction. The greatest total weight increase was observed in the FM30 group. In parallel, plasma levels of IGF-I and IGF-binding protein were highest in the FM30 group, and mRNA and protein expression were also significantly higher in this group. The first step in the IGF-I signaling pathway, tyrosine-phosphorylation checking, occurred smoothly until 20 weeks. These results suggest that a dietary ratio of 30% fish meal best promotes growth in this species. The IGF-I signaling pathway in the liver and muscle is associated with growth in P. olivaceus.
The effects of high carbohydrate diet on growth, serum physiological response, and hepatic heat shock protein 70 expression in Wuchang bream were determined at $25^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$. At each temperature, the fish fed the control diet (31% CHO) had significantly higher weight gain, specific growth rate, protein efficiency ratio and hepatic glucose-6-phosphatase activities, lower feed conversion ratio and hepatosomatic index (HSI), whole crude lipid, serum glucose, hepatic glucokinase (GK) activity than those fed the high-carbohydrate diet (47% CHO) (p<0.05). The fish reared at $25^{\circ}C$ had significantly higher whole body crude protein and ash, serum cholesterol and triglyceride, hepatic G-6-Pase activity, lower glycogen content and relative levels of hepatic growth hormone (GH) gene expression than those reared at $30^{\circ}C$ (p<0.05). Significant interaction between temperature and diet was found for HSI, condition factor, hepatic GK activity and the relative levels of hepatic GH gene expression (p<0.05).
Haihua Xing;Ruobing Han;Qianghui Wang;Zihui Sun;Heping Li
Animal Bioscience
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v.37
no.8
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pp.1367-1376
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2024
Objective: Parathyroid hormone like hormone (PTHLH), as an essential factor for bone growth, is involved in a variety of physiological processes. The aim of this study was to explore the role of PTHLH gene in the growth of antlers. Methods: The coding sequence (CDS) of PTHLH gene cDNA was obtained by cloning in sika deer (Cervus nippon), and the bioinformatics was analyzed. The quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was used to analyze the differences expression of PTHLH mRNA in different tissues of the antler tip at different growth periods (early period, EP; middle period, MP; late period, LP). Results: The CDS of PTHLH gene was 534 bp in length and encoded 177 amino acids. Predictive analysis results revealed that the PTHLH protein was a hydrophilic protein without transmembrane structure, with its secondary structure consisting mainly of random coil. The PTHLH protein of sika deer had the identity of 98.31%, 96.82%, 96.05%, and 94.92% with Cervus canadensis, Bos mutus, Oryx dammah and Budorcas taxicolor, which were highly conserved among the artiodactyls. The qRT-PCR results showed that PTHLH mRNA had a unique spatio-temporal expression pattern in antlers. In the dermis, precartilage, and cartilage tissues, the expression of PTHLH mRNA was extremely significantly higher in MP than in EP, LP (p<0.01). In the mesenchyme tissue, the expression of PTHLH mRNA in MP was significantly higher than that of EP (p<0.05), but extremely significantly lower than that of LP (p<0.01). The expression of PTHLH mRNA in antler tip tissues at all growth periods had approximately the same trend, that is, from distal to basal, it was first downregulated from the dermis to the mesenchyme and then continuously up-regulated to the cartilage tissue. Conclusion: PTHLH gene may promote the rapid growth of antler mainly through its extensive regulatory effect on the antler tip tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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