마늘성분중의 하나인 diallyl disulfide가 간 glutathione peroxidase 활성에 어떠한 영향을 주는가를 관찰하여 다음과 같은 성적을 얻었다. 여러 농도의 diallyl disulfide를 흰쥐에 투여 하였을때 혈청 transaminase의 활성은 변동이 없었으며 또한 간 glutathione의 함량도 변화되지 않았다. 그러나 간 가용성분획의 glutathion peroxidase 활성은 현저히 증가되었다. 시험관 내에서 간 가용성분획의 glutathione peroxidase의 활성은 $15{\mu}g/m{\ell}$ 이상의 diallyl disulfide를 첨가 하였을때 현저히 증가되었으며, 동력학적인 측면에서 관찰하였을때 diallyl disulfide$(20{\mu}g/m{\ell})$에 의해 Km치는 별 변화가 없었으나 Vmax치는 현저히 증가되었다. 이상의 실험결과에서 마늘 성분 중에 glutathione peroxidase 활성을 증가시키는 성분은 allicin의 분해산물인 diallyl disulfide에 기인된 것으로 사료되며 또한 이 성분은 효소의 기질결합 부위가 아닌 다른 부위에서 효소의 활성을 조절해 줄 것으로 생각되어진다.
We evaluated therapeutic and preventive properties of dehydroepiandrosterone (DHEA), a weak androgenic steroid, against isoproterenol-induced cardiomyopathy. The cardiomyopathy was induced by daily i.p. administration of isoproterenol to rats for five days. One group of rats were given with daily s.c. for 5 days during isoproterenol and the other group with daily s.c. DHEA for total 10 days, including 5 days before and during isoproterenol. The animals were killed after each treatment, and cardiac muscle failure was evaluated using histopathologic examination and biochemical indices. DHEA was found to reduce the damaged area and inhibit the elevation in the serum levels of glutamic oxaloacetic transaminase (SGOT), lactate dehydrogenase (LDH), skeletal muscle creatine kinase (CK) and heart creatine kinase (CK-MB) induced by isoproterenol. We also assayed widely used oxidative stress parameters, including thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), superoxide dismutase (SOD), catalase and glutathion peroxidase (GPx). DHEA decreased the escalated level of TBARS and enhanced the anti oxidant defense reaction with an increase in Mn-SOD and Cu/Zn-SOD. On the other hand, the treatment with DHEA did not affect catalase and GPx activity. The present study indicates that DHEA has a therapeutic and preventive effect against isoproterenol-induced cardiomyopathy and its effects may depend largely on the increase in SOD activity.
This study examined the anti-cancer effects of diallyl sulfide(DAS) and/or diallyl disulfide(DDS), major components of garlic oil, with the DEN-PH model in rats, by the numbers and areas per cm$^2$ of induced glutathion S-transferase placental form(GST-P) positive foci and silver-stained nucleolar organizer regions(Ag-NORs) counts per nuclei in liver as indicator. Sprague-Dawley(SD) rats were given the diethylnitrosamine(DEN, 200 mg/kg, i.p.) as initiator and 2 weeks later, in experiment 1, rats were treated with DAS(200 mg/kg, i.g.) and/or DDS(50 mg/kg, i.g.) for 6 weeks, respectively and concomitantly and also were given the same dose of DAS and/or DDS prior to DEN treatment for 2 weeks, and in experiment II, rats were treated with potential cancer promoter, 2-acetylaminofluorene (2-AAF, 20 mg/kg, i.g.). The DAS and/or DDS were treated prior to 2-AAF for 8 weeks, respectively and concomitantly. Then the anti-promoting effects of DAS and/or DDS were assessed. All rats were subjected to the two-thirds partial hepatectomy(PH) at week 3 and sacrificed at week 8. In experiment I, DAS and/or DDS treatment only prior to DEN showed inhibition of the development of GST-P positive foci. In experiment II, DAS and/or DDS treatment prior to 2-AAF promotion showed obvious inhibition of the development of GST-P positive foci in numbers and areas and AgNORs counts. In conclusion, We found DAS and/or DDS had the preventive effects on the hepatocarcinogenesis in rats and the concomitant treatment had some additive effects compared with the each treatment and AgNORs counts correlated well with the preneoplastic hepatic lesion.
The effect of thiol compounds on development and intracellular glutathione(GSH) concentrations of bovine embryos produced by in vitro maturation and in vitro fertilization(IVM/IVF) was examined in CRlaa medium with or without $\beta$-mercaptoethanol(0, 10, 25 and 50$\mu$MME) and cysteamine(0, 25, 50 and 75 $\mu$M). Numbers of cells comprising blastocysts were also counted using double fluorescence stain and the total glutathione levels(oxidized and reduced form) of morula and blastocyst embryos were than measured by an enzymatic method. Following routine IVM/IVF procedures oocytes and zygotes were cultured for 40 to 44h in CRlaa medium. Then 2 to 8-cell embyos had cumulus cell removed and were allotted randomly to the experimental medium. In Experiment 1, the proportion of embryos developing to and beyond morulae stages in 0, 10, 25 and 50 $\mu$M $\beta$-ME was 42.9%, 50.0%, 53.7% and 65.6%, respectively. Fifty $\mu$M $\beta$-ME group was significantly higher than those of any other groups (P<0.05). In Experiment 2, the percentages of embryos developed beyond morulae stages in 0, 25, 50 and 75 $\mu$M cysteamine was 42.9%, 40.4%, 60.0% and 59.2%, respectively. Fifty and 75$\mu$M cysteamine groups were significantly higher than in 0 and 25 $\mu$M cysteamine groups, but all of culture medium containing cysteamine(52.6%) was not significantly difference in control group(42.9%). In Experiment 3, the intracellular GSH concentrations of morulae and blastocyst embryos in 0 and 50 $\mu$M $\beta$-ME was 42.4 pM and 44.9 pM, 49.5 pM and 67.8 pM, respectively. Morulae embryos were not difference, but blastocyst embryos were significantly difference between treatments(P<0.05). In Experiment 4, the intracellular GSH concentrations of morulae in CRlaa with or without cysteamine were 39.8 pM and 45.6 pM, and blastocysts were 59.3 pM and 66.8 pM, respectively. Cell numbers of blastocysts were similar to in all experimental groups. These experiments indicate that thiol compounds can increase the proportion of embryos that developing to and beyond morulae stage and the intracellular GSH concentrations.
본 연구는 Pb의 농도와 노출 기간이 붕어(Carassius auratus) 조직의 미세구조와 생리적 변화에 미치는 영향을 조사하였다. 아가미, 뼈와 근육 조직에서 Pb의 축적 농도는 노출 40일에 증가하였다. 아가미 조직 내 Pb의 축적량은 다른 조직에 비하여 높았으며, 아가미, 뼈 및 근육 조직에서 노출기간이 길어질수록 증가하였다. Pb에 노출된 아가미, 뼈와 근육 조직의 항산화효소 활성은 아가미와 근육 조직에서 높았으며, 신장 조직에서 가장 낮은 활성을 보였다. 또한 항산화효소 중 superoxide dismutase의 활성은 대조군에 비해 2배 정도 증가하였으나, glutathion peroxidas의 활성은 매우 낮았다. Pb에 노출된 아가미 조직에서 점액세포는 수가 증가하였으며, 곤봉화와 부종이 이차새변에서 나타났다. 또한 40일간 Pb에 노출된 아가미 조직 내 미토콘드리아와 핵에서는 막의 손상이 관찰되었으며, 신장 조직 내 사구체는 수축되어 보우만 주머니의 공간이 넓게 관찰되었다. 이러한 결과로 보아 붕어 조직 이 장기간 고농도의 Pb에 노출이 되면 비정상적인 형태로 변형되며, 이에 따라 매우 유해한 영향을 받을 수 있을 것으로 생각된다.
표고버섯의 열수 가용성 다당류(PS)와 간 장해물질이며 발암성을 갖는 butter yellow를 흰쥐의 식이에 6주간 투여하여 혈장과 간의 효소활성 및 과산화지질의 함량을 측정한 결과는 다음과 같다. 1. 혈장 중 GOT 활성은 better yellow 첨가군(BO군)보다 PS의 투여군(BP군 : BO+PS)이 비교적 낮은 수준을 나타내었으며 ${\gamma}$-GTP와 GPT 활성에서도 BO군에 비하여 BP군에서 유의하게 낮은 활성을 나타냈다. 2. 간장 중 glutathion peroxidase, catalase 및 lactate dephdregenase 활성 또한 기초식이군(NO군)에 PS를 토여한 군(NP군)은 NO군과 유의한 차이가 없었으나 BP군은 BO군에 비하여 유의하게 낮은 수준이었다. SOD활성은 각 군간에 유사한 수치로 유의적인 차리를 보이지 않았다. 3. 간장의 microsomal 분획분 및 cytosol 분획분 중의 glutathione S-transferase 활성도는 BP군이 BO군보다 유의하게 낮은 수준을 보였으나 better yellow를 첨가하지 않은 NO군에 비하여 상당히 높은 수준을 나타내었다. 4. 간장 내 glutathione과 malondialdehyde의 함량 또한 PS의 투여로 생성이 저하되는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 보아 표고버섯의 열수 추출물은 생체조직의 지질의 과산화를 방지하므로써 better yellow에 의한 간장장애의 치료 또는 독성을 완화하는 효과가 있는 것으로 사료된다.
본 논문의 목적은 benfuracarb 원제(90.2%)에 함유된 불순물의 glutathione-S-transferase와 amidase에 대한 저해 특성과 해당 불순물의 구조를 밝히는데 있다. Benfuracarb 원제, 유효성분 및 불순물은 glutathione-S-transferase(GST)를 효과적으로 저해하였으나, 그 저해력은 GST 효소 저해제인 ethacrynic acid의 저해력보다는 낮았다. 즉, GST에 대한 benfuracarb 원제, 유효성분 및 불순물의 $I_{50}$은 각각 $9.7{\times}10^{-4}M,\;>1.0{\times}10^{-3}M,\;1.8{\times}10^{-4}M$이었으나, ethacrynic acid의 $I_{50}$은 $1.7{\times}10^{-5}M$이었다. Benfuracarb 원제, 유효성분 및 불순물은 amidase를 저해하였는데, 이들의 효소저해력은 iprobenfos의 저해력($I_{50},\;8.2{\times}10^{-7}M$)보다는 낮은 $6.0{\times}10^{-5}M,\;4.3{\times}10^{-4}M,\;7.6{\times}10^{-5}M$이었다. Benfuracarb 원제에는 4종의 불순물(IM $1{\sim}4$)이 검출되었는데, 이들 중 IM 2와 3은 GST와 amidase의 활성을 저해하였던 반면, IM 4는 효소활성을 저해하지 않았다. 이들 불순물 중 효소활성 저해특성을 갖는 IM 2와 3을 IR, $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, LC-MS를 이용하여 구조를 분석한 결과, IM 2는 ethyl-N-isopropylamino propionate로, 그리고 IM 3은 ethyl-N-isopropyl-N-(chlorosulfenyl) aminopropionate로 확인되었다.
Recent studies have shown that cytokines are capable of modulating cardiovascular function and that some drugs used in the treatment of heart failure variably modulate the production of cytokines. Hige- namine, a positive inotropic isoquinoline alkaloid, has been used traditionally as cardiac stimulant, and reported to reduce nitric oxide (NO) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in LPS- and/or cytokine-activated cells in vitro and in vivo. Therefore, we investigated whether higenamine modulates the production of proinflammatory cytokines in myocardial infarction. In addition, effects of higenamine on antioxidant action and antioxidant enzyme expression (MnSOD) were studied. Myocardial infarction (MI) was confirmed by measuring left ventricular (LV) pressure after occlusion of the left anterior descending coronary artery (LAD) for 5 weeks in rats. Treatment of higenamine (10 mg/kg/day) reduced infarct size about 35 %, which accompanied by reduction of production TNF-$\alpha$, IL-6, but not IFN-${\gamma}$ and IL-1$\beta$ in the myocardium. The expression of TNF-$\alpha$ mRNA in infracted myocardium was significantly reduced by higenamine. Although iNOS mRNA was not detected, nitrotyrosine staining was significantly increased in myocardium of Ml compared to higenamine-treated one, Indicating that peroxynitrite-induced damage is evident in MI. Cytochrome c oxidation by peroxynitrite was concentration-dependently reduced by higenamine, an effect which was almost compatible to glutathion. Higenamine treatment did not affect the expression of MnSOD mRNA in myocardial tissues in MI. Taken together, higenamine may be beneficial in oxidative stress conditions such as ischemic-reperfusion injury and MI due to antioxidant action as well as modulation of cytokines.
White-skinned sweet potato (WSP, Ipomoea batatas L.)는 일본, 인도네시아 등에서 당뇨병과 그 치료에 민간에서 사용되고 있다. 본 실험에서는 WSP의 메탄올 추출물을 체중 1 kg 당 Dose 100, 200 mg을 투여하여 streptozotocin으로 유발된 당뇨쥐에서 손상된 신장 보호효과를 평가하였고 그 효능을 인슐린 분비촉진제인 glimepiride (45 mg/kg 체중)와 비교해 보았다. WSP 메탄올 추출물과 glimepiride를 2주 투여 한 후 혈당, 혈중 요소성 질소(BUN), 크레아티닌, 젖산 탈수소효소(LDH), 지질 과산화물(LPO) 함량, 그리고 항산화효소들인 superoxide dismutase (SOD), 카탈라아제(CAT), 글루타치온 과산화물 분해효소(GPx), 글루타치온 S-전이효소(GST) 등의 활성도를 측정하였다. BUN, 크레아티닌, LDH, 혈당, LPO 함량 등은 대조군에 비하여 그 값이 증가하였고, SOD, CAT, GPx, GST 값은 감소하였다. WSP 메탄올 추출물(200 mg/kg)을 투여한 후 측정한 값은 혈당, LPO, 신장병 표지인자인 BUN, 크레아티닌, LDH, 그리고 지질 과산화물 함량에서 의미있는 개선효과를 볼 수 있었고 항산화효소, 항산화물질의 증가도 나타났다. 따라서 WSP 메탄올 추출물은 당뇨쥐의 혈당을 낮추며 산화적 스트레스를 약화시키고 당뇨로 유발된 신장 손상을 보호해 주는 효과가 있다는 결과를 얻었다. 또한 민간에서 사용하고 있는 WSP가 실제로 당뇨 치료에 효과가 있음을 과학적 증거로 제공해 주었다고 판단된다.
헛개 나무 추출물과 오리나무 추출물들이 쥐 와 사람을 대상으로 실험한 결과 체내 알콜 분해능이있는 것으로 나타났으며, 쥐 실험의 경우 헛개 나무가 32% 의 알콜 분해능이 증진되었으며 오리나무는 13% 정도로 나타났으며 혼합물인 경우 42% 의 높은 것으로 나타났다. 사람을 대상으로 한 경우도 유사한 경향을 보여 혼합물을 섭취한 경우 4 시간만에 음주 전 알콜 농도로 감소했으나 오리나무는 6 시간에도 0.013% 정도의 알콜이 존재했다. 또한 헛개나무는 6 간 정도 후에 정상 치로 감소된 반면 알콜만 섭취한 경우는 6 시간이 되도 0.04% 의 알콜이 존재하고 있어 이 추출물들이 정도의 차이는 있으나 알콜 분해 효과가 있는 것으로 확인되었다. 간의 해독 증진 및 숙취 해소 기능에서도 혼합물, 헛개 나무, 오리나무 순으로 활성이 좋은 것으로 확인되었다. ADH 효소의 활성의 경우 혼합물의 경우 약 60% 정도 증진되는 것으로 나타났으나 헛개 나무의 경우 35.6% 로 상승되었으며는 것이 확인되었다. 하지만 오리나무의 경우는 약 29% 정도로 별 차이가 없는 것으로 측정되었다. GST 활성 증진의 경우 혼합물을 1 g/L의 농도로 투여해 실험한 결과 최대 180% 의 활성 증진이 가능한 것으로 측정되었다. 이에 비해 각 추출물들이 단독으로 작용하는 경우에 는 유사한 활성 증진을 보여 혼합물의 경우 간의 해독 작용 증진에 synergy 효과가 있을 것으로 예측된다. Cathepsin 활성 저해의 경우 역시 혼합물이 55 % 이상 활성 억제 효과를 보였으며 헛개 나무가 약 40%의 억제 기능을 나타냈다. 하지만 오리나무의 경우는 28% 정도의 낮은 억제 효과를 보였다. 이는 오리나무 추출물은 ADH 효소 활성 증진이나 cethepsin 효소 억제 기능이 아닌 다른 기작에 의해 알콜 분해 및 간 기능 증진에 영향을 주는 것으로 예측된다. 모든 경우 다 혼합물이 여러 활성 효과가 높은 것으로 나타나 이 혼합물을 이용한 기능성 식품 개발이 유용할 것으로 평가된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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