The enzyme produced by a strain of Rhizopus japonicus was able to covert selectively ginsenoside $Rb_1$ which was the most abundant ginseng saponin, into ginsenoside Rd which was known to be superior to ginsenoside $Rb_1$ pharmaceutically. This specific conversion of ginsenoside $Rb_1$ without any change of other ginsenoside patterns was confirmed by thin layer chromatography and high performance liquid chromatograpy quantitatively. The amount of ginsenoside Rd was increased to 4.8 and 34.7 folds by enzymatic conversion of ginsenoside $Rb_1$ in total saponin and ginsenoside Rb group saponin, respectively. The increased amount of ginsenoside Rd corresponded to total amount of released glucose and decreased amount of ginsenoside $Rb_1$ accurately.
Among 12 kinds of ginsenosides in ginseng saponin, ginsenoside-Rb$_1$was contained the most abundantly. But ginsenoside-Rd which is similar to ginsenoside-Rb$_1$in structure, was known to be superior to ginsenoside-Rb$_1$pharmaceutically. In order to convert ginsenoside-Rb$_1$into ginsenoside-Rd by microbial enzyme treatment, a Rhizopus sp. was selected among various strais of molds found in rotten ginseng roots. Enzyme was prepared from the extract of wheat bran koji culture by ammonium sulfate precipitation (1.0 sat'd) and succeeding ammonium sulfate fractionation method (0.6-0.9 sat'd). For the purpose of use as substrate, saponins were purified by the several purification steps from alcohol extract of red ginseng roots. We obtained the total saponin which was composed of 36.5% of ginsenoside Rb$_1$, 12.2% of ginsenoside-Rd and other ginsenosides. For increase of ginsenoside-Rb$_1$ component ratio, we also obtained further purified ginsenoside-Rb group saponin containing 54.5% of ginsenoside-Rb$_1$, 1.1% of ginsenoside- Rd and other ginsenosides from purified the total saponin. In the enzymatic reaction system including the total saponin or the ginsenoside-Rb group saponin, we confirmed the specific conversion of ginsenoside-Rb$_1$to ginsenoside-Rd proportionally and no change of any other ginsenoside patterns by thin layer chromatography and high performance liquid chromatography.
Ginsenoside Rd was produced from ginsenoside Rc using a thermostable recombinant ${\alpha}-{\small{L}}$-arabinofuranosidase from Caldicellulosiruptor saccharolyticus. The optimal reaction conditions for the production of ginsenoside Rd from Rc were pH 5.5, $80^{\circ}C$, 227 U enzyme/ml, and 8.0 g/l ginsenoside Rc in the presence of 30% (v/v) n-hexane. Under these conditions, the enzyme produced 7.0 g/l ginsenoside Rd after 30 min, with a molar yield of 100% and a productivity of 14 g $l^{-1}\;h^{-1}$. The conversion yield and productivity of ginsenoside Rd are the highest reported thus far among enzymatic transformations.
Kang, Hye Jung;Lee, Jong Woo;Park, Tae Woo;Park, Hye Yoon;Park, Junseong
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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제46권4호
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pp.349-360
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2020
Bio-conversion manufacturing technology has been developed to produce ginsenoside Rd which is increasingly in demand as a cosmetic material due to various possibilities related to improving skin function. In order to convert ginsenoside Rb1 which is contained in red ginseng saponin (RGS) into Rd, several commercial enzymes were tested. Viscoflow MG was found to be the most efficient. In order to optimize the conversion of RGS to ginsenoside Rd by enzymatic transition was carried out using response surface methodology (RSM) based on Box-Behnken design (BBD). The main independent variables were RGS concentration, enzyme concentration, and reaction time. Conversion of ginsenoside Rd was performed under 17 conditions selected according to BBD model and optimization conditions were analyzed. The concentration of the converted ginsenoside Rd ranged from 0.3113 g/L to 0.5277 g/L, and the highest production volume was obtained under condition of reacting 2% RGS and 1.25% enzyme for 13.5 hours. Consequently, RGS concentration, enzyme concentration which is 0.05 less than p-value and among the interactions between the independent variables, the interaction between enzyme concentration and reaction time was confirmed to be the most influential.
Kim, Kyung-Ah;Yoo, Hye Hyun;Gu, Wan;Yu, Dae-Hyung;Jin, Ming Ji;Choi, Hae-Lim;Yuan, Kathy;Guerin-Deremaux, Laetitia;Kim, Dong-Hyun
Journal of Ginseng Research
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제38권3호
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pp.203-207
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2014
Background: There is limited understanding of the effect of dietary components on the absorption of ginsenosides and their metabolites into the blood. Methods: This study investigated the pharmacokinetics of the ginseng extract and its main constituent ginsenoside Rb1 in rats with or without pretreatment with a prebiotic fiber, NUTRIOSE, by liquid chromatography tandem mass spectrometry. When ginsenoside Rb1 was incubated with rat feces, its main metabolite was ginsenoside Rd. Results: When the intestinal microbiota of rat feces were cultured in vitro, their ginsenoside Rd-forming activities were significantly induced by NUTRIOSE. When ginsenoside Rb1 was orally administered to rats, the maximum plasma concentration (Cmax) and area under the plasma drug concentratione-time curve (AUC) for the main metabolite, ginsenoside Rd, were $72.4{\pm}31.6ng/mL$ and $663.9{\pm}285.3{\mu}g{\cdot}h/mL$, respectively. When the ginseng extract (2,000 mg/kg) was orally administered, Cmax and AUC for ginsenoside Rd were $906.5{\pm}330.2ng/mL$ and $11,377.3{\pm}4,470.2{\mu}g{\cdot}h/mL$, respectively. When ginseng extract was orally administered to rats fed NUTRIOSE containing diets (2.5%, 5%, or 10%), Cmax and AUC were increased in the NUTRIOSE receiving groups in a dose-dependent manner. Conclusion: These findings reveal that intestinal microflora promote metabolic conversion of ginsenoside Rb1 and ginseng extract to ginsenoside Rd and promote its absorption into the blood in rats. Its conversion may be induced by prebiotic diets such as NUTRIOSE.
Ginsenosides have been regarded as the principal components responsible for the pharmacological and biological activities of ginseng. Absorption of major ginsenosides from the gastrointestinal tract is extremely low, when ginseng is orally administered. In order to improve absorption and its bioavailability, conversion of major ginsenosides into more active minor ginsenoside is very much required. Here, we isolated lactic acid bacterium (Lactobacillus brevis LH8) having ${\beta}-glucosidase$ activity from Kimchi. Bioconversion ginsenoside Rd by this bacterium in different temperatures was investigated. The maximum activities of crude enzymes precipitated by ethanol were shown in $30^{\circ}C$ and then gradually decreased. In order to compare the effect of pH, the crude enzymes of L. brevis LH8 were mixed in 20mM sodium phosphate buffer (pH 3.5 to pH 8.0) and reacted ginsenoside Rd. Ginsenoside Rd was almost hydrolyzed between pH 6.0 and pH 12.0, but not hydrolyzed under pH 5.0 and above pH 13.0. Ginsenoside Rd was hydrolyzed after 48 h incubation, whereas ginsenoside F2 appeared from 48 h to 72 h, and ginsenoside Rd was almost converted into compound K after 72 h.
Effects of ginsenosides on nitric oxide (NO) production induced by lipopolysaccharide plus TNF-$\alpha$ (LNT) were examined in C6 rat glioma cells. Among several ginsenosides, ginsenoside Rd showed a complete inhibition against LNT-induced NO production. Ginsenoside Rd attenuated LNT-induced increased phosphorylation of ERK. Among several immediate early gene products, only Jun Band Fra-1 protein levels were increased by LNT, and ginsenoside Rd attenuated Jun Band Fra-1 protein levels induced by LNT. Furthermore, LNT increased AP-1 DNA binding activities, which were partially inhibited by ginsenoside Rd. Our results suggest that ginsenoside Rd exerts an inhibitory action against NO production via blocking phosphorylation of ERK, in turn, suppressing immediate early gene products such as Jun Band Fra-1 in C6 glioma cells.
Kim, Kyeng-Hyen;Seong, Geum-Su;Mun, Yeun-Ja;Park, Si-Jun;Shin, Mee-Ran;Chang, Che-Ghul
The Journal of Traditional Korean Medicine
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제15권1호
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pp.97-105
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2006
To study on antioxidant effects in the liver of 40-week-old mouse, the sample were orally pretreated 5mg/kg/day for 5 days with red ginseng saponin components(total saponin, protopanaxadiol saponin, protopanaxatriol saponin, ginsenoside-Rd, ginsenoside-Re, compound-K) for 5 days. The ability of saponin to protect the mouse liver from oxidative damage was examined by determining the activity of superoxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GPx) and the contents of glutathione, the level of malondialdehyde, The only protopanaxadiol among the ginseng saponin fractions was significantly increased the hepatic SOD activity(p<0.01). The red ginseng saponin induced a slight increase of GPx activity, especially ginsenoside Rd, compound K and protopanaxatriol treatments significantly increased its activity. The content of glutathione was significantly increased by total saponin, protopanaxadiol and ginsenoside Rd(p<0.01), but the oxidized glutathione level was lowered in all the red ginseng saponin. Finally, the level of malondialdehyde was significantly decreased by ginsenoside Rd and protopanaxadiol. In conclusion, protopanaxadiol and ginsenoside Rd among the saponin fraction were especially increased in the activity of hepatic antioxidative enzyme and decreased the lipid peroxidation that was expressed in term of MDA formation. This comprehensive antioxidant effects of red ginseng saponin seems to be by a certain action of saponin other than a direct antioxidant action.
The patterns and contents of ginsenosides were examined in normal root parts and hairy root lines of Panax ginseng C. A. Meyer. Ginsenoside-Rb$_1$, -Rb$_2$, -Rc, -Rd, -Re, -Rf, -Rg$_1$, -Rg$_2$ were detected in normal roots and hairy roots of ginseng. The patterns and contents of ginsenosides in that were very difference each other. The contents of total ginsenoside of hairy root (KGHR-1) was 17.42 mg/g dry wt, it's highest compared to others. Ginsenoside contents of hairy root (KGHR-1) was higher on ginsenoside-Rd, Rg$_1$, KGHR-5 was higher on ginsenoside-Rb$_1$, Rg$_1$, and KGHR-8 was higher on ginsenoside-Rd, Re than others. The contents of total ginsenosides on 6 years old ginseng cultured in the field were high in the order of main root, lateral root and fine roots, and content of ginsenosides in fine roots was 3.2 times higher than that in main root. The ratio of ginsenoside-Rg$_1$to total ginsenosides were about 3.43%, 8.68% and 14.18% respectively on fine root, lateral root and main root, it's very lower than that in hairy roots. It is suggested that specific ginsenosides can be produce in cultures of ginseng hairy roots.
Nabavi, Seyed Fazel;Sureda, Antoni;Habtemariam, Solomon;Nabavi, Seyed Mohammad
Journal of Ginseng Research
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제39권4호
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pp.299-303
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2015
Panax ginseng is a well-known economic medical plant that is widely used in Chinese traditional medicine. This species contains a unique class of natural products-ginsenosides. Recent clinical and experimental studies have presented numerous lines of evidence on the promising role of ginsenosides on different diseases including neurodegenerative diseases, cardiovascular diseases, and certain types of cancer. Nowadays, most of the attention has focused on ginsenoside Rd as a neuroprotective agent to attenuate ischemic stroke damages. Some of the evidence showed that ginsenoside Rd ameliorates ischemic stroke-induced damages through the suppression of oxidative stress and inflammation. Ginsenoside Rd can prolong neural cells' survival through the upregulation of the endogenous antioxidant system, phosphoinositide-3-kinase/AKT and extracellular signal-regulated protein kinase 1/2 pathways, preservation of mitochondrial membrane potential, suppression of the nuclear factor-kappa B, transient receptor potential melastatin, acid sensing ion channels 1a, poly(ADP-ribose) polymerase-1, protein tyrosine kinase activation, as well as reduction of cytochrome c-releasing and apoptosis-inducing factor. In the current work, we review the available reports on the promising role of ginsenoside Rd on ischemic stroke. We also discuss its chemistry, source, and the molecular mechanism underlying this effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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