유전체 초기단계 연구에서는 비교적 소수의 마이크로어레이 샘플자료로서 실험을 진행하여 심도 깊게 연구해야 할 유전자 부분군(subsets)을 탐색하게 된다. 이러한 과정에서 요구되는 부분군 탐색에 사용되는 분석방법은 다수 샘플자료 분석의 경우와는 매우 다른 방법들이다. 유전자 극소수 샘플자료의 분석에 매우 적절한 방법인 랜덤검정법을 적용하여 정확한 P값(exact P value)의 이산형 분포가 얻어지고, 일양분포 귀무가설의 검정으로 유의 유전자가 존재하는지를 파악할 수 있다. 한 단계 더 나아가 Fuchs와 Kenett (1980)이 제시한 M 검정을 이용하여 이산형 P 값 다항분포에서 이상범주군(outlier cells)을 찾을 수 있으며 이로써 유의 유전자로서의 가능성이 있는 유전자군을 선정한다. 대다수의 마이크로어레이 유전체 연구에서 수 천 또는 수 만개의 유전자가 서로 독립이라고 가정하고 분석하는 것이 문제점이다. 그러나 본 논문에서는 유전자 연관성을 그대로 유지하는 순열에 기초한 랜덤검정법과 M 검정법으로서 유전자 연관성이 분석에 미치는 영향을 모의실험으로 알아보았으며, 그 영향이 결코 미약하지 않음을 확인할 수 있었다.
본 연구는 현행 한우확인시험법에 이용되는 Microsatellite (MS)와 소의 유전형질 중 품종 판별에 주로 이용되는 Melanocortin Receptor 1 (MC1R) 유전자상의 Single Nucleotide Polymorphism (SNP)를 분석하여 설계한 Primer를 Multiplex PCR을 활용하여 소의 품종을 판별하였다. MC1R 유전자형은 $E^D$, $E^+$, e형의 3Type으로 나뉘며 $E^D/E^D$, $E^D/E^+$, $E^D/e$, $E^+/E^+$, $E^+/e$, e/e의 6가지 유전자형을 가진다. $E^D$유전자형은 외래종이 지닌 유전자형으로 $E^D/E^D$, $E^D/E^+$, $E^D/e$이 이에 속하며, e유전자형은 한우가 지닌 유전자형으로 e/e의 유전자형을 가진다. 흑한우의 경우 $E^D$, $E^+$, e의 모든 유전자형을 가지고 있으나 이는 교잡에 의해 나타난 것으로 보이며 $E^+$유전자형이 흑한우 고유의 유전자형으로 추정되어 본 연구에서는 이에 따라 $E^+/E^+$, $E^+/e$의 유전자형을 흑한우로 분류하였다. 그러나 $E^D$, $E^+$의 경우 단순 PCR기법만으로는 그 판별에 어려움이 있어, MS Maker를 활용한 다형성 분석을 통해 흑한우와 수입우를 판별할 수 있는 새로운 Primer를 설계하였으며, 이를 통해 소의 품종을 판별하였다.
Cho, Min Seok;Park, Duck Hwan;Namgung, Min;Ahn, Tae-Young;Park, Dong Suk
The Plant Pathology Journal
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제31권2호
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pp.123-131
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2015
Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms) multiplies very rapidly, passing through the vascular strands and into the stems and petioles of a diseased potato. Therefore, the rapid and specific detection of this pathogen is highly important for the effective control of the pathogen. Although several PCR assays have been developed for detection, they cannot afford specific detection of Cms. Therefore, in this study, a computational genome analysis was performed to compare the sequenced genomes of the C. michiganensis subspecies and to identify an appropriate gene for the development of a subspecies-specific PCR primer set (Cms89F/R). The specificity of the primer set based on the putative phage-related protein was evaluated using genomic DNA from seven isolates of Cms and 27 other reference strains. The Cms89F/R primer set was more specific and sensitive than the existing assays in detecting Cms in in vitro using Cms cells and its genomic DNA. This assay was also able to detect at least $1.47{\times}10^2copies/{\mu}l$ of cloned-amplified target DNA, 5 fg of DNA using genomic DNA or $10^{-6}$ dilution point of 0.12 at $OD_{600}$ units of cells per reaction using a calibrated cell suspension.
Major diseases in grafted cacti have been reported and Fusarium oxysporum, Bipolaris cactivora, Phytophthora spp. and Collectotrichum spp. are known as causal pathogens. These pathogens can lead to plant death after infection. Therefore, some European countries have quarantined imported cacti that are infected with specific fungal pathogens. Consequently, we developed PCR detection methods to identify four quarantined fungal pathogens and reduce export rejection rates of Korean grafted cacti. The pathogen specific primer sets F.oF-F.oR, B.CF-B.CR, P.nF-P.nR, and P.cF-P.CR were tested for F. oxysporum, B.cactivora, P. nicotinae, and P. cactorum, respectively. The F.oF-F.oR primer set was designed from the Fusarium ITS region; the B.CF-B.CR and P.nF-P.nR primers respectively from Bipolaris and Phytophthora ITS1; and the P.cF-P.CR primer set from the Ypt1protein gene region. The quarantine fungal pathogen primer pairs were amplified to the specific number of base pairs in each of the following fungal pathogens: 210-bp (F. oxysporum), 510-bp (B. cactivora), 313-bp (P. nicotinae), and 447-bp (P. cactorum). The detection limit for the mono- and multiplex PCR primer sets was 0.1 ng of template DNA under in vitro conditions. Therefore, each primer set successfully diagnosed contamination of quarantine pathogens in export grafted cacti. Consequently, our methodology is a viable tool to screen contamination of the fungal pathogen in exported grafted cacti.
딥러닝 기술의 발전에 따라 학습을 통해 선호도 랭킹 추정을 하기 위한 다양한 연구 개발이 진행되고 있으며, 웹 검색, 유전자 분류, 추천 시스템, 이미지 검색 등 여러 분야에 걸쳐 이용되고 있다. 딥러닝 기반의 선호도 랭킹을 추정하기 위해 근사(approximation) 알고리즘을 이용하는데, 이 근사 알고리즘에서 적정한 정도의 정확도를 보장할 수 있도록 모든 비교 대상에 k번 이상의 비교셋을 구축하게 되며, 어떻게 비교셋을 구축하느냐가 학습에 영향을 끼치게 된다. 이 논문에서는 크라우드 소싱 기반의 딥러닝 선호도 측정을 위한 쌍체 비교 셋을 생성하는 새로운 알고리즘인 k-disjoint 비교셋 생성 알고리즘과 k-체이닝 비교셋 생성 알고리즘을 제안한다. 특히 k-체이닝 알고리즘은 기존의 원형 생성 알고리즘과 같이 데이터 간의 연결성을 보장하면서도 안정적인 선호도 평가를 지원할 수 있는 랜덤적 성격도 함께 가지고 있음을 실험에서 확인하였다.
Rajapaksha, W.R.A.K.J.S.;Thilakaratne, I.D.S.I.P.;Chandrasiri, A.D.N.;Niroshan, T.D.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권7호
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pp.1046-1048
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2003
A polymerase chain reaction (PCR) assay was developed to differentiate buffalo meat from the meat of Ceylon spotted deer (Axis axis ceylonensis), Ceylon sambhur (Cervus unicolor unicolor), cattle (Bovine), goat (Caprine), pig (Porcine), and sheep (Ovine). A set of primers were designed according to the sequence of the mitochondrial cytochrome b gene of bubalus bubalis and by PCR amplification a band of approximately 242 bp band was observed with buffalo DNA. These primers did not cross-react with DNA of other animal species tested in the study under the specified reaction conditions. A band of 649 bp was observed for all animal species tested when DNA was amplified with the universal primers indicating the presence of mitochondrial DNA in the samples. The technique was sensitive enough to identify rotten (10 days post slaughter), dried and cooked buffalo meat. The absence of a cross reaction with human DNA using the buffalo specific primers eliminates possible false positive reactions.
한국잠사학회 2003년도 International Symposium of Silkworm/Insect Biotechnology and Annual Meeting of Korea Society of Sericultural Science
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pp.114-115
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2003
A Bacillus thuringiensis isolate, Bt 2385-1, which showed toxicity to lepidopteran, was isolated from Korean soil sample and characterized. PCR-RFLP showed that this isolate contains two novel cryl-type crystal protein genes. In this study, we designed cryl-type specific primer set (ATG1-F and N400-R) to clone the toxic domain of the all cryl-type genes. The two novel rlyl-type toxin genes in addition to crylJal gene were cloned and sequenced. (omitted)
Potato mop-top virus(PMTV) was identified from Solanum tuberosum cv. Gawon showing bright chlorotic mottle symptom in Namwon, Korea. Samples were collected green-house in February, 2003. Electron microscopic examination of negatively stained preparation revealed that PMTV were rigid-rod shaped particles about 100-150, 250-300 nm x 18-20 nm in length. In ultrathin sections of leaf tissue from diseased potato plants, cluster of viruses particles were observed in the cytoplasm. TAS-ELISA determined that the virus was serologically related to PMTV. PMTV produced double ring necrotic local lesion in inoculated leaf of Chenopodium amaranticolor in incubated at 15$^{\circ}C$. The PMTV could be detected with RT-PCR using PMTV detectable primer set designed to amplify about 540 bp of the partial CP gene of PMTV
White and brown strains of Flammulina velutipes were inter-crossed. All $F_1$ showed light-brown fruitbody, suggesting that a gene for the brown fruitbody was incompletely dominant against the white one. And backcross experiment showed that more than two genes were involved in color determination. To isolate a molecular marker linked to fruitbody color, a set of primers was designed from a sequence of clones derived by a bulked segregant analysis. These markers showed a specific band which co-segregated with brown fruitbody forming strains.
Communications for Statistical Applications and Methods
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제13권3호
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pp.701-718
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2006
In cancer microarray experiments, the experimenter or patient which is nested in each experimenter often shows quite heterogeneous error variability, which should be estimated for identifying a source of variation. Our study describes a Bayesian method which utilizes clinical information for identifying a set of DE genes for the class of subtypes as well as assesses and examines the experimenter effect and patient effect which is nested in each experimenter as a source of variation. We propose a Bayesian multilevel mixed effect model based on analysis of covariance (ANACOVA). The Bayesian multilevel mixed effect model is a combination of the multilevel mixed effect model and the Bayesian hierarchical model, which provides a flexible way of defining a suitable correlation structure among genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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