Ninety-two isolates of Fusarium species were obtained from Chinese corn samples. The predominant Fusarium species isolated from corn seeds were F. moniliforme, F. proliferatum, F. oxysporum and F. subglutinans, and all 13 species were identified. Each isolate was grown on autoclaved wheat grains and wheat cultures were fed by twenty-one-day-old female rats for the toxicity test. Twenty-six out of 92 isolates caused the death accompanying feed refusal, severe weight loss, liver damage, and hemorrhages in the stomach and intestines. Of the toxigenic isolates, 17 isolates of F. moniliforme, 4 of F. oxysporum, 3 of F. proliferatum, and one of each F. sporotrichioides and unknown species were lethal to rats. The analyses of fumonisin B1 production of the 26 toxigenic Fusarium isolates were carried out by thin layer chromatography and high-performance liquid chromatography, and fumonisin B1 was confirmed by mass spectrometry. Fumonisin B1 was produced in wheat culture at levels ranging from 280 $\mu\textrm{g}$/g to 3,952 $\mu\textrm{g}$/g by all of toxigenic F. moniliforme and F. proliferatum, but by none of the other toxigenic Fusarium species. The present results suggest the high possibility of natural occurrence of fumonisin B1 in corn samples imported from China.
Two fumonisin-nonproducing strains of Fusarium verticillioides and their fumonisin producing progenitors were tested for aggressiveness toward maize, sorghum, rice, and beetroot seedlings grown under greenhouse conditions. None of the plants showed obvious disease symptoms after root dip inoculation. Fungal biomass was determined by species-specific real-time PCR. No significant (P = 0.05) differences in systemic colonization were detected between the wild type strains and mutants not producing fumonisins. F. verticillioides was not detected in any of the non-inoculated control plants. The fungus grew from roots to the first two internodes/leaves of maize, rice and beet regardless of fumonisin production. The systemic growth of F. verticillioides in sorghum was limited. The results showed that fumonisin production was not required for the infection of roots of maize, rice and beet by F. verticillioides.
In this study, we used functional genomic strategies, proteomics and quantitative real-time (qRT)-PCR, to advance our understanding of genes associated with fumonisin production in the fungus Fusarium verticillioides. Earlier studies have demonstrated that deletion of the FCC1 gene, which encodes a C-type cyclin, leads to a drastic reduction in fumonisin production and conidiation in the mutant strain (FT536). The premise of our research was that comparative analysis of F. verticillioides wild-type and FT536 proteomes will reveal putative proteins, and ultimately corresponding genes, that are important for fumonisin biosynthesis. We isolated proteins that were significantly upregulated in either the wild type or FT536 via two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis, and subsequently obtained sequences by mass spectrometry. Homologs of identified proteins, e.g., carboxypeptidase, laccase, and nitrogen metabolite repression protein, are known to have functions involved in fungal secondary metabolism and development. We also identified gene sequences corresponding to the selected proteins and investigated their transcriptional profiles via quantitative real-time (qRT)-PCR in order to identify genes that show concomitant expression patterns during fumonisin biosynthesis. These genes can be selected as targets for functional analysis to further verify their roles in $FB_1$ biosynthesis.
The efficiency of gamma irradiation (0, 1, 5, 10, 15, 20, and 30 kGy) as a sterilization method of corn samples (30 g) artificially contaminated with Fusarium moniliforme stored at normal condition ($25^{\circ}C$ with approximate relative humidity (RH) of 55%) and optimal condition ($25^{\circ}C$ with a controlled RH of 97%) was studied. The results showed that the fungal growth and the amount of fumonisin were decreased as the dose of gamma irradiation increased. Gamma irradiation at 1-5 kGy treatment significantly inhibited the growth of F. moniliforme by 1-2 log reduction on corn samples (P < 0.05). Sublethal effect of gamma irradiation was observed at 10-20 kGy doses after storage, and a complete inactivation required 30 kGy. Fungal growth and fumonisin production increased with higher humidity and longer storage time in all corn samples. This study also demonstrated that there was no strict correlation between fungal growth and fumonisin production. Storage at normal condition significantly resulted in lower growth and fumonisin production of F. moniliforme as compared with those stored at optimal condition (P < 0.05). Gamma irradiation with the dose of ${\geq}5$ kGy followed by storage at normal condition successfully prolonged the shelf life of irradiated corns, intended for human and animal consumptions, up to 7 weeks.
In the present study, an attempt was made to investigate the effect of water activity(Aw) of rough rice on the growth of Fusarium moniliforme NRRL 13569 as well as on the production of Fumonisin $B_1(FB_1)$. The maximum growth of F. moniliforme and the production of $FB_1$, occurred at Aw 0.97 when the Aw of rough rice was controlled from 0.85 to 0.97. The fungal growth and $FB_1$, production decreased with the decrease of Aw. Sparse growth of fungus was observed even at Aw 0.85. $FB_1$ production on rough rice decreased considerably under Aw 0.97 and the trace amounts of $FB_1$ were observed at Aw 0.93 and 0.90. Therefore Aw required for the prevention of $FB_1$ production was turn out to be below 0.90 while that of fungal growth below 0.85.
Kim, Eun-Kyung;Chung, Soo-Hyun;Lee, Sung-Taik;Kim, Young-Bae
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.25
no.5
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pp.501-505
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1997
The effects of some nutrients and culture conditions on the growth and the production of fumonisin B$_{1}$, (FB$_{1}$) from Fusarium moniliforme NRRL 13569 were investigated in liquid culture. Xylose and soytone yielded the highest mycelial growth as the C- and N-source, respectively. The highest level of FB$_{1}$, was obtained when yeast extract was used as the N-source but no FB$_{1}$, from NaNO$_{3}$. While Fe$^{+++}$ showed inhibition effect on FB$_{1}$, production, Zn$^{++}$ enhanced the FB$_{1}$, production as well as the mycelial growth. FB$_{1}$, was maximally produced when the initial pH value and the specific surface area of the medium was adjusted to 5 and 1.4 cm$^{2}$/ml, respectively. FB$_{1}$ formation reached the maximum value (210, 000 ng/ml) in 30 days and then decreased in Czapek medium substitued with 1% xylose and 0.3% yeast extract, and supplemented with 0.2% NH$_{4}$H$_{2}$PO$_{4}$ where the initial pH value and the specific surface area of the medium are optimally controlled.
Gibberellea fujikuroi species (Gf) complex comprises at least 15 species, most of which not only causes serious plant diseases, but also produces mycotoxins including fumonisins. Here, we focused on the abilities of the field isolates belonging to the Gf complex associated with rice and corn, respectively in Korea to produce fumonisin, all of which were confirmed to carry FUM1, the polyketide synthase gene essential for fumonisin biosynthesis. A total of 88 Gf complex isolates (55 F. fujikuroi, 10 F. verticillioides, 20 F. proliferatum, 2 F. subglutinans, and 1 F. concentricum), and 4 isolates of F. commune, which is a non-member of Gf complex, were grown on rice substrate and determined for their production levels of fumonisins by a HPLC method. Most isolates of F. verticillioides and F. proliferatum, regardless of host origins, produced fumonisin $B_1$ and $B_2$ at diverse ranges of levels ($0.5-2,686.4{\mu}g/g$, and $0.7-1,497.6{\mu}g/g$, respectively). In contrast, all the isolates of F. fujikuroi and other Fusarium species examined produced no fumonisins or only trace amounts ($<10{\mu}g/g$) of fumonisins. Interestingly, the frequencies of relatively high fumonisin-producers among the F. proliferatum and F. fujikuroi isolates derived from corn were higher than those among the fungal isolates from rice. In addition, it is a first report demonstrating the ability of the FUM1-carrying F. commune isolates from rice to produce fumonisins.
Cheng, Yeong-Hsiang;Wu, Jih-Fang;Lee, Der-Nan;Yang, Che-Ming J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.15
no.4
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pp.610-614
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2002
The purpose of this study was to investigate the prevalence of fumonisin contamination in corn and corn-based feeds in Taiwan. A total of 233 samples was collected from 8 feed mill factories located in four different regions in Taiwan. The presence of fumonisin $B_1$ ($FB_1$) and $B_2$ ($FB_2$) was determined by thin layer chromatograph, while the total fumonisin content was determined using immuno-affinity column cleanup and fluorometer quantitation. Our results showed that 55 samples of swine feeds had the highest percentage of incidence of $FB_1$ and $FB_2$ (41.8% and 41.8%, respectively), followed by 66 samples of duck feeds (40.9% and 37.8%). However, the percentage of incidence of $FB_1$ and $FB_2$ was much lower in 43 samples of broiler feeds (23.2% and 13.9%) and 69 samples of corn (17.3% and 10.1%). Corn and duck feeds were found to have a significant higher level of means of total fumonisins ($5.4{\pm}1.5$ and $5.8{\pm}0.6$ ppm, respectively) than swine feeds ($2.9{\pm}0.4$ ppm) and broiler feeds ($3.0{\pm}0.5$ ppm). Comparing fumonisins distribution in different regions, the highest percentage of $FB_1$ incidence (39.2%) was found in the eastern region of Taiwan, and total fumonisins level ($4.5{\pm}0.7$ ppm) was significantly higher than other regions. However, the highest percentage of $FB_2$ incidence (32.0%) was found in the central region of Taiwan. Trimonthly analysis of data showed that both high percentage of $FB_1$ and $FB_2$ incidence (39.3% and 37.7%) and total concentration of fumonisin ($5.7{\pm}0.4$ ppm) were found in the period of Jan. to Mar., The incidence and concentration were significantly higher than other trimothly periods. These results indicate that fumonisin B mycotoxins are both widespread and persistent in feed-grade corn and corn-based feeds in Taiwan.
Ra, Do Kyung;Choi, Jae Yeon;Lee, Ju Ho;Nam, Ji Hyun;Lee, Jeoung Gu;Lee, Sung Mo
Korean Journal of Veterinary Service
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v.42
no.3
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pp.127-133
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2019
The purpose of this study was to investigate the contamination level of representative mycotoxins that have adverse effects on livestock by using LC-MS/MS method and to utilize the results as basic data for the establishment of quality control system for feed, and to provide information on production and storage. A total of nine mycotoxins, including aflatoxin $B_1$, aflatoxin $B_2$, aflatoxin $G_1$, aflatoxin $G_2$, ochratoxin A, fumonisin $B_1$, fumonisin $B_2$, deoxynivalenol (DON), zearalenone (ZEN) were simultaneously analyzed in LC-MS/MS under ESI positive mode. Fumonisin $B_1$ and fumonisin $B_2$ were detected from 3 cases of 75 forage produced in Incheon area, the detection rate was 4.0%. The detection concentration was 0.01~0.02 mg/kg, which was lower than the domestic recommended limit. Fumonisins were detected in a slightly different manner from the results of mycotoxin studies reported in Korea, which is attributed to the high temperature and dry summer weather of the year. The result of LC-MS/MS method performance of 9 mycotoxins, the recovery of DON was quite low as $41.53{\pm}3.91%$ that is not suitable for simultaneous analysis. This is probably due to that the extract solution used in this study was not suitable for the extraction of DON, along with the characteristics of a very dry forage. For the study of mycotoxins in Incheon area forage for the first time, further investigation is needed for the safe supply of livestock products.
Park, Sook-Young;Seo, Jeong-Ah;Lee, Yin-Won;Lee, Yong-Hwan
The Plant Pathology Journal
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v.17
no.5
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pp.281-289
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2001
We analyzed 88 strains of Gibberella fujikuroi (Analmorph: Fusarium section Liseola) from maize in Korea for mating population, mating type, fumonisin production vegetative compatibility, and random amplified polymorphic DNA (RAPD) patterns. We found 50 strains that were MATA-2, 22 that were MATA-1, 1 that was MATD-1, and 15 that were not reproducibly fertile with any of the mating type testers. Of the 50 MATA-2, 15 were female fertile, while 10 of the 22 MATA-1 strains were female fertile. A total of 1,138 nitrate non-utilizing (nit) mutants were recovered from a total of 88 strains. These strains were grouped into 39 vegetative compatability groups (VCGs) by demonstrating heterokaryosis between nit mutants. A single maize ear could be infected by more than one VCG of F. moniliforme. RAPD analysis measured genetic diversity among 63 strains of F. moniliforme. Several VCGs were distinguished by RAPD fingerprinting patterns. Most strains produced significant levels of fumonisins. However, 6 MATA-2 strains from a single VCG produced higher levels of fumonisin $\textrm{B}_3$ than that of fumonisin $\textrm{B}_1$ or $\textrm{B}_2$. From these data, we concluded that most Korean strains of F. moniliforme associated with maize belonged to mating population A and produced significant levels of fumonisins. Futhermore, RAPD analysis could differentiate strains associated with different VCGs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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