Cho, Chang-Won;Rhee, Young Kyoung;Kim, Young-Chan;Han, Chun-Ji;Shin, Kwang-Soon;Hong, Hee-Do
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.45
no.5
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pp.636-641
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2013
We prepared 2 different crude polysaccharides from persimmon leaves, by hot water (PLW-0) and pectinase digestion (PLE-0), respectively. PLW-0 and PLE-0 showed similar sugar compositions and contained 11 different sugars, including rarely observed sugars such as 2-methyl-fucose, 2-methyl-xylose, apiose, and aceric acid. However, the uronic acid content of PLE-0 was lower than that of PLW-0, because of pectinase treatment. In normal mice, administration of PLW-0 and PLE-0 increased the spleen index and splenocyte proliferation. The effect of PLE-0 on the spleen index and splenocyte proliferation was greater than that of PLW-0. We subsequently assessed the immunomodulatory activities of PLW-0 and PLE-0 on cyclophosphamide (CY)-induced immunosuppressed mice. We revealed that mice treated with PLW- 0 or PLE-0 showed increased splenocyte proliferation, NK cell activity, and white blood cell numbers. Taken together, our results indicate that PLW-0 and PLE-0 can enhance immune function in normal mice and modulate CY-induced immune suppression.
In order to develop new physiologically active polysaccharides from persimmon leaves, two different crude polysaccharides were prepared using hot water (PLW-0) and pectinase digestion (PLE-0) and their immuno-stimulating activities were estimated. PLW-0 and PLE-0 showed similar sugar compositions with 15 different sugars, including rarely observed sugars in general polysaccharides such as 2-O-methyl-fucose, 2-O-methyl-xylose, apiose, aceric acid, 3-deoxy-D-manno-2-octulosonic acid, and 3-deoxy-D-lyxo-2-heptulosaric acid, but the uronic acid content of PLE-0 was lower than that of PLW-0 caused by pectinase treatment. Both PLW-0 and PLE-0 showed potent anti-complementary activity in a dose-dependent manner which was similar to a known immuno-stimulating polysaccharide, PSK, from Coriolus versicolor. The activity of PLE-0 at a low concentration ($100{\mu}g/m{\ell}$) was higher than that of PLW-0. In an in vitro cytotoxicity analysis, PLW-0 and PLE-0 (up to $1,000{\mu}g/m{\ell}$) did not affect the growth of peritoneal macrophages and Colon 26-M3.1 carcinoma cells. In contrast, they enhanced lymphocyte proliferation activity. Peritoneal macrophages stimulated with PLW-0 and PLE-0 produced various cytokines, such as IL-6 and IL-12. However, PLE-0 was more effective on the cytokine production. Intravenous administration of PLW-0 and PLE-0 significantly augmented natural killer (NK) cell cytotoxicity against Yac-1 tumor cells 3 days after the treatment of polysaccharide fractions. But NK cells obtained from the PLE-treated group showed higher tumoricidal activity even at a low dose of $40{\mu}g$/mouse. In experimental lung metastasis of Colon 26-M3.1 carcinoma cells, prophylactic administration of PLW-0 and PLE-0 significantly inhibited lung metastasis in a dose-dependent manner and PLE-0 was more effective on the inhibition of cancer metasasis. The results lead us to conclude that the pectinase-treated process is indispensable to preparing polysaccharides with higher immune-stimulating activity from persimmon leaves.
Efficient extraction method of crude protein-bound polysaccharide (CPBP) from Agaricus blasei Murill was established. CPBP yields by ultrasonic and hot water extractions were 13.0 and 7.8%, respectively. Pressure extraction for 3 hr gave the highest ${\beta}-glucan$ content; no significant difference was observed between 2 and 3 hr extraction. Four volumes added ethanol gave the highest yields of CPBP and ${\beta}-glucan$ contents at 10.89 and 35.97%, respectively. Decomposition temperature of CPBP was $240-365^{\circ}C$, showing relatively good thermal stability. In SRB (sulforhodamine B) assay, CPBP treatment at $1,000\;{\mu}g/mL$ for 72 hr inhibited proliferations to A549, MCF-7, and AGS cancer cells by 43.9, 21.4, and 32.5%, respectively.
Choi, Ri Na;Park, Yeong Chul;Lee, Ji Sun;Kim, Jung Woo;Kim, Jong Bong;Cheoi, Yu Soon;Kim, Kwang Ki;Lee, Jae Geun;Yu, Chang Yeon;Kim, Seung Hyn;Chung, Ill Min;Kim, Jae Kwang;Lim, Jung Dae
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.22
no.4
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pp.276-288
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2014
The six polysaccharide fractions were prepared by chromatographic procedure from the hot water extracts of the aboveground parts of Astragalus membranaceus. These six polysaccharides from aboveground parts of Astragalus membranaceus Bunge were tested for gut-mucosal immune activity and acute toxicity. In a view of molecular weight, the six fractions were estimated to be 75000, 88000, 129000 and 345000 Da, respectively. Component sugar analysis indicated that these fractions were mainly consisted of galactose (46.3 ~ 11.8%) and arabinose (35.4 ~ 9.9%) in addition to glucose, rhamnose, fucose, arabinose, xylose, mannose, glucuronic acid and galacturonic acid. Among the six major purified polysaccharides, AMA-1-b-PS2 showed highest bone merrow cell proliferation and lymphocyte of Peyer's patch stimulating activity. It may be concluded that intestinal immune system modulating activity of aboveground parts from Astragalus membranaceus Bunge is caused by polysaccharides having a polygalacturonan moiety with neutral sugars such as arabinose and galactose. In single oral dose toxicity study, no differences were observed between control and treated groups in clinical signs. The results indicated that lethal dose 50 ($LD_{50}$) of water extracts from Astragalus membranaceus-aboveground parts was found to be higher than 5000 mg/kg/day in this experiment. From the above results, we may suggest that Astragalus membranaceus-aboveground parts might have useful as a safe material for functional food and pharmaceutics.
Water-soluble polysaccharides from the fruiting bodies of Agaricus blazei Murill were extracted with 0.9% sodium chloride and hot water, successively. The purified polysaccharides showed a potent immunostimulating activity. Eight major polysaccharides, which were named from AG-l to AG-8, were fractionated and purified by ethanol precipitation, ion exchange chromatography on DEAE-cellulose and gel filtration on Toyopearl HW 65F. These polysaccharides were identified to be homogeneous by analysis of HPLC. Three major active polysaccharides (AG-2, -3, and -6) showed relatively strong immunostimulating activity. AG-2 and -3 were composed of glucose, galactose and mannose in the molar ratios of 74.0:15.3:10.7 and 63.6:17.6:12.7, respectively. AG-6 was composed of glucose and ribose in the molar ratios of 81.4:12.6.
This study was conducted to investigate the proximate composition, free sugars, amino acids, and minerals in five Lentinula edodes cultivars collected in Korea. No significant differences in the content of crude fat and crude fiber were found between the samples; however, there was significant variation in the contents of nitrogen free extract, ash, and crude protein. Three kinds of free sugars (fucose, arabinose, and glucose) were identified by HPLC, with the glucose content ranging from 5.94% to 12.08%. Sixteen kinds of free amino acids were identified: the highest content of amino acids was found in 'Sanlim5ho' (13,768.33 mg%), while the highest content of free amino acids was found in 'Sanlim4ho' (6,790.57 mg%). The minerals detected in the L. edodes cultivars were potassium, calcium, magnesium, and sodium, the contents of which ranged from 567.16-2,356.09 mg%, 3.85-7.42 mg%, 9.79-20.88 mg%, and 19.60-22.62 mg%, respectively.
The strain A49, which produces a new type of extracellular polysaccharide was isolated from soil samples. From morphological, physiological and biochemical tests, the strain A49 was identified as a Bacillus polymyxa and named Bacillus polymyxa A49. Bacillus polymyxa A49 was found to produce a highly viscous extracellular polysaccharide when grown aerobically in a medium containing glucose as the sole source of carbon. The polysaccharide (A49 POL) showed a homogeneous pattern on gel permeation chromatography (GPC) and its molecular weight was estimated to be about 1.6 mega dalton (mDa). The FT-IR spectrum of A49-POL revealed typical characteristics of polysaccharides. As a result of investigations with HPLC and carbozole assay, A49-POL was found to consist of L-fucose, D-galactose, D-glucose, D-mannose, and D-glucuronic acid, with the molar ratio of these sugars being approximately 1:2:7:50:12. Rheological analysis of A49 POL revealed that it is pseudoplastic and has a higher apparent viscosity at dilute concentrations than does xanthan gum. The consistancy factor of A49 POL was found to be higher, and the flow index of A49 POL lower, than xanthan gum. Its apparent viscosity was comparatively unstable at various temperatures. the A49 POL showed the highest apparent viscosity at pH 3. When salts were added to A49 POL solution, the solution was compatible with up to 10% KCl, 35% NaCl, 55% $CaCl_2$, 55% $MgCl_2$, 55% $K_2HPO_4$, and 110% $Ca({NO_3})_2$, respectively.
Objective: Lectins are cell-agglutinating and sugar specific proteins or glycoproteins of non-immune origin that precipitate glycoconjugates having saccharides of appropriate complementarity. Because of these properties, plant lectins have been used to help characterize the carbohydrate moieties of glycoproteins in the zona pellucida (ZP) of several mammalian species including pigs. Treatment of oocytes with various lectins blocks sperm binding to the ZP in various mammalian species. This study was undertaken to examine the distribution of sugar residues in the ZP of pig oocytes matured in vitro and the ability of spermatozoa to bind to ZP and in vitro penetration in oocytes treated with fluorescein isothiocyanate (FITC)-labelled lectins. Materials and Methods: The lectins of Banderiaea simplicifolia (BS-II, bind to $\beta$-D-N-acetylglucosamine), Canavalin ensiformis (Con A, bind to $\alpha$-D-Mannose), Lens culinaris (LCA, bind to a-D-Mannose), Ricinus communis (RCA-I, bind to $\beta$-D-Galactose) and Ulex europaeus (UEA-I, bind to $\alpha$-L-Fucose) were examined for spermatozoa penetration, binding capacity to ZP and distribution of lectins. Results: The penetration rates were significantry (p<0.05) higher in control oocytes (63%) than those treated with all lectins, but penetration rates ($40{\sim}49%$) were simililar in group treated with lectins. The incidence of monospermy was similar in oocytes untreated and UEA-I, but it was higher in oocytes treated with BS-II, Con A, RCA-I and LCA. The porcine oocytes cultured for 48 h in TC-199 medium were freed from cumulus cells and treated for 30 min with fluorescein isothiocyanate-labelled lectins. When examined under fluorescein illumination, higher (p<0.001) proportions of oocytes showed fluorescein of zona pellucida after treatment with Con A (93%), LCA (93%) and RCA-I (100%) than BS-II (37%) and UEA-I (50%). All of the oocytes treated with RCA-I exhibited strong fluorescein in the outer region of the zona pellucida while those treated with LCA exhibited strong fluorescein throughout the zona pellucida. BS-II bounded mainly to the outer region and UEA-I bounded mainly to the inner region of the zona pellucida, with either strong or weak fluorescein. At 120 min after insemination in vitro, fewer spermatozoa were bound to the zona pellucida of the oocytes treated with BS-II, Con-A and RCA-I. Of the lectins, Con A most inhibited sperm binding. Conclusions: These results suggest that $\beta$-D-Galactose residues in the porcine zona pellucida may act as primary sperm receptors and inducers of the sperm acrosome reaction and these sugar residues may be involved in the block to polyspermy.
We used electrospary ionization ion trap tandem mass spectrometry (ESI-IT tandem MS) to structural elucidation of three different biantennary-type glycans having zero, one, two galactoses (G0, G1, G2). The highest fragment ion in the MS/MS spectra of three glycans was produced by 0,2-ring cleavage of fucose-linked N-acetylglucosamine (GlcNAc) in reducing end. The fragment ions both from precursor ions and 0,2-ring cleaved ions ($^{0.2}An$; n=5 for G0, n=6 for G1 and G2) were not overlapped each other. As results of $MS^n$ analyses, tandem fragmentation trees of each glycans were generated and 2,4-ring cleavages ($^{2.4}A_6$) were occurred in GlcNAc linked to reducing end GlcNAc. This structural elucidation and fragmentation study of N-linked glycans by tandem mass spectrometry can be applied to structural analysis of more complicated glycans.
Thermal treatment of soymilk residue was carried out at 140, 150, and $160^{\circ}C$ for possible use as a raw material for dietary fiber, and some physicochemical properties of the extracts were investigated. Soluble dietary fiber(SDF) content of the extracts prepared under optimal conditions was more than 30% suggesting the conversion of insoluble dietary fiber to SDF. The main sugar components of the extracts were glucose, galactose, and arabinose. Analysis of the moelcular weight distribution by high performance size exclusion chromatography revealed that the proportion of high molecular weight fraction decreased and that of middle-sized polymer increased as the extraction temperature increased. The viscosity of aqueous solution of the extracts decreased with an increase in extraction temperature, but showed no trend as pH changed. The solubility increased with extraction temperature showing the highest at $160^{\circ}C$. The extract at $140^{\circ}C$ had the biggest calcium-binding capacity, which correlated with the changes in viscosity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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