Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2003.04a
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pp.39-55
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2003
1. Extracts of the leaves of Eurya emarginata markedly inhibited the growth of leukemia cells such as HL-60, KG-1, U937, K562, and Jurkat. 2. When HL-60 cells were treated with the extract, DNA fragmentation, morphological changes and sub-G1 hypodiploid cells were observed. The expressions of c-myc mRNA were also dramatically decreased. 3. Cornoside and Eutigoside were isolated from the leaves of Eurya emarginata. 4. Eutigoside induced apoptosis through down-regulation of Bcl-2 expression and activation of caspases.
The goal of this research is to provide information that will lead to the development of new non-phototoxic antimalarial compounds. The goal was approached by first learning the chemical mechanism of phototoxicity of six representative compounds 1a-f: a[(diethyl-, -dihexyl-, and -dioctyl- aminomethyl)]-2-(3', 4' -dichlorophenyl)-6-methoxy-4-quinolinemethanol (1a, 1b, and 1c) and .alpha. [(diethyl-, -dibutyl-, and -dihexyl-aminomethyl)]-2-(-4'-methoxyphenyl-6-methoxy-7-chloro-4-quinolinemethan ol (1d, 1e, and 1f). The photochemical reaction of these compounds was investigated in 2-propanol. Similar photochemical fragmentation reactions accurred in all compounds.
Damage by high-speed impact fracture is a dominant mode of failure in several applications of concrete structures. Numerical modelling can play a crucial role in understanding and predicting complex fracture processes. The commonly used mesh-based Finite Element Method has difficulties in accurately modelling the high deformation and disintegration associated with fracture, as this often distorts the mesh. Even with careful re-meshing FEM often fails to handle extreme deformations and results in poor accuracy. Moreover, simulating the mechanism of fragmentation requires detachment of elements along their boundaries, and this needs a fine mesh to allow the natural propagation of damage/cracks. Smoothed Particle Hydrodynamics (SPH) is an alternative particle based (mesh-less) Lagrangian method that is particularly suitable for analysing fracture because of its capability to model large deformation and to track free surfaces generated due to fracturing. Here we demonstrate the capabilities of SPH for predicting brittle fracture by studying a slender concrete structure (column) under the impact of a high-speed projectile. To explore the effect of the projectile material behaviour on the fracture process, the projectile is assumed to be either perfectly-elastic or elastoplastic in two separate cases. The transient stress field and the resulting evolution of damage under impact are investigated. The nature of the collision and the constitutive behaviour are found to considerably affect the fracture process for the structure including the crack propagation rates, and the size and motion of the fragments. The progress of fracture is tracked by measuring the average damage level of the structure and the extent of energy dissipation, which depend strongly on the type of collision. The effect of fracture property (failure strain) of the concrete due to its various compositions is found to have a profound effect on the damage and fragmentation pattern of the structure.
Two galloyl monosaccharides, 1,2,6-trigalloylglucose (1, TRgG) and 1,2,3,6- tetragalloylglucose (2, TEgG), were isolated from the stem-bark of Juglans mandshurica. Two galloylglucoses showed cytotoxic effects on human promyelocytic leukemia HL-60 cells. In order to elucidate their mechanism of action, we have investigated the flow cytometric analysis after Annexin V-FITC and PI staining, caspase-3 activity, and internucleosomal DNA fragmentation in HL-60 cells. HL-60 cells treated with both compounds 1 and 2 at 150 and $100\;{\mu}M$, respectively, led to a morphological features of apoptosis, such as plasma membrane blebbing and cell shrinkage. TRgG (1) and TEgG (2) increased the percentage of $FITC^+\;and\;FITC^+PI^+$ cells in flow cytometry after Annexin V-FITC and PI staining. The increase of apoptotic cells was preceded by the activation of caspase-3 reported to play a central role in apoptotic process and inducing internucleosomal DNA fragmentation. TEgG (2) showed to have stronger apoptosis inducing activity in HL-60 cell lines as compared with TRgG (1).
Objectives : Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) has been used as a prescription for stroke, senile and vascular dementia, ischemic brain and heart damage in Oriental traditional medicine. However, there is little known about the mechanism by which the water extracts of Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) rescue cells fromthese damages, and little is known about the protective mechanisms of Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) on oxidative stress in neuronal cells. Therefore, we have investigated the role of Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) on serum and glucose deprived apoptosis in PC12 cells. Methods : PC12 Cells have been used extensively as a model for studying the cellular and molecular effects of neuronal cells. The viability of cells was measured by MIT assay. We used DNA fragmentation and caspase 1, 2, 3, 6, 9-likeproteases activation assay. Transcriptional activation of NF-kB was assessed by using electrophoretic mobility shift assay. Results : Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) rescued PC12 cells from apoptotic death by serum and glucose deprivation in a dose-dependent manner. The nuclear staining of PC12 cells clearly showed that Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) attenuated nuclear condensation and fragmentation, which represent typical neuronal apoptotic characteristics. Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) also prevents fragmentation of genomic DNA and activation of caspase 3-like protease in serum and glucose deprived PC12 cells. Furthermore, Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) reduced the activation of NF-kB by serum and glucose-deprived apoptosis. Conclusions : These findings suggest that serum and glucose deprivation induces reduced glutathione (GSH) depletion, and consequently, apoptosis through endogenously produced reactive oxygen species in PC12 cells. Also, our data indicated that Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) has protective effects against the serum and glucose deprived deaths of PC12 cells, which are mediated by the generation of GSH that, in turn, can reduce oxidative stress caused by reactive oxygen species (ROS) such as hydrogen peroxide.
Proceedings of the Korean Society of Sericultural Science Conference
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2003.04a
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pp.41-41
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2003
To elucidate the apoptosis mechanism of Trichoplusia ni cell, fundamental studies for apoptosis induction and suppression were performed. Hygromycin B, a known inducer of apoptosis, started the inhibition of T ni cell growth at 200 ug/$m\ell$ concentration. Furthermore, at 400 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ concentration, DNA fragmentation was detected on day 2 of incubation. (omitted)
Kim, Hyun-Jeong;Yang, Seung-Ju;Kim, Yoon-Suk;Kim, Tae-Ue
BMB Reports
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v.36
no.5
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pp.468-474
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2003
The molecular mechanism of hypoxia-induced apoptosis has not been clearly elucidated. In this study, we investigated the involvement of extracellular signal-regulated protein kinase (ERK 1/2) in hypoxia-induced apoptosis using cobalt chloride in HeLa human cervical cancer cells. The cobalt chloride was used for the induction of hypoxia, and its $IC_{50}$ was $471.4\;{\mu}M$. We demonstrated the DNA fragmentation after incubation with concentrations more than $50\;{\mu}M$ cobalt chloride for 24 h, and also evidenced the morphological changes of the cells undergoing apoptosis with electron microscopy. Next, we examined the signaling pathway of cobalt chloride-induced apoptosis in HeLa cells. ERK1/2 activation occurred 6 and 9 h after treatment with $600\;{\mu}M$ cobalt chloride. Meanwhile, the pretreatment of the MEK 1 inhibitor (PD98059) completely blocked the cobalt chloride-induced ERK 1/2 activation. At the same time, the activated ERK 1/2 translocated into the nucleus and phosphorylated its transcriptional factor, c-Jun. In addition, the pretreatment of PD98059 inhibited the cobalt chloride-induced DNA fragmentation and apoptotic cell death. These results suggest that cobalt chloride is able to induce apoptotic activity in HeLa cells, and its apoptotic mechanism may be associated with signal transduction via ERK 1/2.
Purpose : This study was aimed to investigate the inhibitory effect of Millettia Reticulatas on the proliferation of human uterine leiomyoma cells and the expression of gene related the mechanism of cell apoptosis. Methods : We counted the number of death cells treated with indicated concentration of Millettia Reticulatas and investigated cell death rate by MTS assay. Furthermore, flow cytometry analyis and DNA fragmentation assay were used to dissect between necrosis and apoptosis. and then we observed the differential gene expression by western blot analysis. Results : 1) The inhibitory effect on the growth of uterine leiomyoma cell treated with Millettia Reticulatas was increased in a concentration proportional. 2) The result of flow cytometry analysis. subG1 phase arrest related3 cell apoptosis was investigated 23.49% in uterine leiomyoma cell treated Millettia Reticulatas and showed the fession of proportional concentration. 3) The gene expression of p27, p53, p21, p16 related cell cycle was increased according to increasing concentration but cyclin E was none exchanged. 4) The character of apoptosis, DNA fragmentation was significantly observed the fession of proportional concentration. 5) The expression of pro-caspase3 and PARP were decreased dependent on treatment concentration. Conclusion : This study showed that Millettia Reticulatas have the inhibitory effect on the proliferation of human uterine leiomyoma cell and the effect was related with apoptosis. The apoptotic mechanism was observed that the gene expression of p27, p53, p21, p16 related cell cycle was increased according to increasing treatment concentration, induced G1 phase arrest and finally cell death was occurred. The decreased expression of pro-caspase 3 and PARP were noted that apoptosis was related with caspase pathway.
Objectives: The water extract of Omija-tang (OMIT) has traditionally been used for treatment of ischemic heart and brain damage in oriental medicine. However, little is known about the mechanism by which the water extract of OMJT rescues cells from these damages. Therefore, this study was designed to investigate the protective mechanisms of OMJT on oxidative stress-induced toxicity in H9c2 cardiomyoblast cells. Methods: Treatments of $H_2O_2$, or $ZnC_{12}$ markedly induced death of H9c2 cardiomyoblast cells in a dose-dependent manner. The characteristics of oxidative stress-induced death of H9c2 showed apparent apoptotic features such as DNA fragmentation. OMJT significantly reduced both ${H_2O_2}-induced$ cell death and chromatin fragmentation. The decrease of B치-XL expression by $H_2O_2$ were inhibited by OMJT. In addition, the increase of Bcl-XS expression was also inhibited by OMJT. In particular, Fas expression, which is generally recognized as cell death-inducing signal by Fas/FasL interaction, was markedly increased by H2O2 in a time-dependent manner. Also, the expression profile of proteins in Chang cells were screened by using two-dimensional (2-D) gel electrophoresis. Among 300 spots resolved in 2-D gels; the comparison of control versus apoptotis cells revealed that signal intensity of 6 spots decreased and 11 spots increased. Results and Conclusions: Taken together, this study suggests that the protective effects of the water extract of OMJT against oxidative damages may be mediated by the modulation of Bcl-XL/S Fas expression.
Angelica decursiva has been used in Korean traditional medicine as an antitussive, an analgesic, an antipyretic and a cough remedy. However, the anti-cancer properties of Angelica decursiva have not yet been well defined. In our current study the cytotoxic activity of ethanol extracts of Angelica decursiva root (EEAD) and the mechanism of cell death exhibited by EEAD were examined in FaDu human head and neck squamous cell carcinoma cells. The cytotoxic effects of EEAD upon the growth of FaDu cells were examined with an MTT assay. In addition, the mechanism of cell death induced by EEAD was evaluated by DNA fragmentation analysis, immunoblotting and caspase activation measurements. EEAD induced apoptotic cell death in FaDu cells in a concentration- and time-dependent manner, as determined by MTT assay and DNA fragmentation analysis. Furthermore, the proteolytic processing of caspase-3, -7 and -9 was increased by EEAD treatment of FaDu cells. In addition, the activation of caspase-3 and -7 was detected in living FaDu cells by fluorescence microscopy. These results suggest that EEAD can induce apoptosis and suppress cell growth in cancer cells and may have utility as a future anticancer therapy.
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