Feline panleukopenia virus (FPV) causes fatal leukopenia and severe hemorrhagic diarrhea in cats. Although FPV isolates have been reported worldwide from several animals, the biological and genetic features of South Korean FPVs remain unclear. We characterized molecularly South Korean FPV isolates. Crandell-Rees feline kidney (CRFK) cells were used to isolate FPV from 60 organ homogenates. The isolates were confirmed to be FPVs via analyses of cytopathic effects, immunofluorescence studies, electron microscopy, and polymerase chain reaction. Viral genetic analyses used the full VP2 sequences. Eight isolates propagated in CRFK cells were confirmed to be FPVs. All isolates yielded viral titers ranging from 104.5 to 106.0 TCID50/mL 5 days after inoculation into CRFK cells and exhibited hemagglutination titers ranging from 27 to 212 (using pig erythrocytes). The Korean FPV isolates grew well in cat cells such as CRFK and Fcwf-4 cells. The FPV isolates were most similar to the KS42 strain isolated from a Korean cat in 2008. The FPV isolates will serve as useful antigens in future sero-epidemiological studies and will aid in the development of diagnostic tools.
This study aimed at determining the genetic and virulence characteristics of the Listeria monocytogenes from smoked ducks. L. monocytogenes was isolated by plating, and the isolated colonies were identified by PCR. All the obtained seven L. monocytogenes isolates possessed the virulence genes (inlA, inlB, plcB, and hlyA) and a 385 bp actA amplicon. The L. monocytogenes isolates (SMFM2018 SD 1-1, SMFM 2018 SD 4-1, SMFM 2018 SD 4-2, SMFM 2018 SD 5-2, SMFM 2018 SD 5-3, SMFM 2018 SD 6-2, and SMFM 2018 SD 7-1) were inoculated in tryptic soy broth (TSB) containing 0.6% yeast extract at 60℃, followed by cell counting on tryptic soy agar (TSA) containing 0.6% yeast extract at 0, 2, 5, 8, and 10 min. We identified five heat resistant isolates compared to the standard strain (L. monocytogenes ATCC13932), among which three exhibited the serotype 1/2b and D-values of 5.41, 6.48, and 6.71, respectively at 60℃. The optical densities of the cultures were regulated to a 0.5 McFarland standard to assess resistance against nine antibiotics after an incubation at 30℃ for 24 h. All isolates were penicillin G resistant, possessing the virulence genes (inlA, inlB, plcB, and hlyA) and the 385-bp actA amplicon, moreover, three isolates showed clindamycin resistance. In conclusion, this study allowed us to characterize L. monocytogenes isolates from smoked ducks, exhibiting clindamycin and penicillin G resistance, along with the 385-bp actA amplicon, representing higher invasion efficiency than the 268-bp actA, and the higher heat resistance serotype 1/2b.
Staphylococcus aureus is an important animal and human pathogen implicated in a variety of disease including food-poisoning caused by staphyloccal enterotoxins (SEs). In order to investigate the difference in genomic types and to monitor the transmission of S. aureus isolates, a total of 25 S. aureus isolates from different sources were determined for their genotypic characteristics by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) in addition to their ability to enterotoxin production and antibiotic resistance patterns in this study. All the isolates were susceptible to amikacin, and the resistance pattern to ampicillin and penicillin were most common among 14 different patterns. Eleven of 24 isolates produced one of three SEs, SEA, SEC or SED. Sixteen representative PFGE patterns were obtained by Smal restriction fragments of S. aureus isolates. Analysis of dendrogram based on PFGE band patterns suggested that food-poisoning outbreaks be caused by the diverse sources of food, of which their raw materials were infected with S. aureus. Also, it could be concluded that PFGE was a powerful tool for epidemiological tracing of infection source for food-initiated outbreaks.
Kim, Ki-Yong;Yang, Ho-Chul;Tamplin, Mark-L.;Choi, Sang-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권1호
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pp.78-83
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1999
Thirty-six environmental isolates of Vibrio vulnificus obtained from seawater, sediments, and raw seafoods, and 18 clinical isolates from Vibrio septicemia patients were typed by restriction endonuclease digestion profiles (REDP) of genomic DNA with SfiI. The results revealed a high-level of variation in REDPs, indicating a vast genomic diversity among V. vulnificus strains. Genetic relatedness of the strains showed similarities ranging from 10% to 100%. Different REDPs for isolates from various raw seafoods were obtained, and clustering of strains according to type of seafoods was not observed. In contrast, clinical isolates of V. vulnificus showed higher similarity to one another, and could be subdivided into one separate group. The difference in REDPs of the V. vulnificus isolates from clinical origin and from raw seafoods substantiates the previous observation that only a single type of pathogenic strain was involved in each human infection, despite the numerous genetically polymorphic strains found from implicated oysters.
Marine bacteria, actionmycetes and fungal strains were isolated from continental slope sediment of the Bay of Bengal and studied for fatty acid profile to investigate their involvement in the benthic food-web. Fifteen different saturated and unsaturated fatty acids from bacterial isolates, 14 from actinomycetes and fungal isolates were detected. The total unsaturated fatty acids in bacterial isolates ranged from 11.85 to 37.26%, while the saturated fatty acid ranged between 42.34 and 80.74%. In actinomycetes isolates, total unsaturated fatty acids varied from 27.86 to 38.85% and saturated fatty acids ranged from 35.29 to 51.25%. In fungal isolates unsaturated fatty acids ranged between 44.62 and 65.52% while saturated FA ranged from 20.80 to 46.30%. The higher percentages of unsaturated fatty acids from the microbial isolates are helpful in anticipating the active participation in the benthic food-web of Bay of Bengal.
More than 30 isolates of Alternaria were obtained from various solanaceous crops in Korea. For all isolates, morphological characteristics of the conidia were determined and compared with those of representative isolates of A. solani and A. tomatophila. Pathogenicity test was performed to Potato, tomato, egg plant and red Pepper and molecular characteristics of them including the representative isolates were determined using sequence analyses of ITS rDNA and histone H3 gene, and URP-PCR analysis. Based on morphological characteristics, the isolates from the solanaceous crops were grouped as identical or very similar to either A. tomatophila(ATO), A. solani(ASO), and unidentified Altemaria sp.(ASP). Among the molecular markers used in this study, the URP-PCR analysis was found to be appropriate for taxonomic resolution of these species. Based on the conidial morphology, pathogenicity test and molecular characteristics, A. tomatophila(early blight of tomato) could be distinguished from A. solani(early blight of potato), and the Alternaria sp.(ASP) from potato, which was closely related to A. solani in conidial morphology, was considered as a new species.
The objectives of this study were: i) to detect the presence of Staphylococcus aureus and methicillin-resistant S. aureus (MRSA) in raw milk, cheese, beef minced meat, and chicken meat samples; ii) to evaluate the antimicrobial susceptibility of the isolates; and iii) to determine clonal relation among the isolates by using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) method. Therefore, a total of 160 food samples were randomly collected between August 2014 and May 2015 in Hatay province, located in the southern Turkey. Twenty (12.5%) of the samples were found to be contaminated with S. aureus. A total of 40 isolates from the 20 positive samples were confirmed to be S. aureus by multiplex PCR based on 16S rRNA and nuc gene. The mec A gene was not detected in any of the S. aureus strains. In the present study, 39 out of 40 (97.5%) isolates were found to be resistant to one or more antibiotics. All of isolates were susceptible to gentamicin, oxacillin, and vancomycin. The highest resistance rate was detected in penicillin (95%) and ampicillin (92.5%), followed by tetracycline (30%), erythromycin (20%), ciprofloxacin (12.5%). Nine major patterns were determined by PFGE. In 6 of these patterns, thirty-six strains (90%) had identical PFGE profiles.
This study aimed to evaluate the prevalence of Listeria monocytogenes on livestock farms in Korea and determine their serotypes and genetic correlations. Twenty-five livestock farms in Korea (central: 15, south west: 7, south east: 3) were visited 2-3 times, and 2,018 samples (feces: 677, soil: 680, silage: 647, sludge: 14) were collected. Samples were enriched in LEB (Listeria enrichment broth) and Fraser broth media, and then plated on Palcam agar. The isolates were identified by PCR and 16S rRNA gene sequencing. Then, the sero-types, presence of virulence genes (actA, inlA, inlB, plcB, and hlyA), and antibiotic resistance were determined. Genetic correlations among the isolates were evaluated by analyzing the restriction digest pattern with AscI. Of the 2,018 samples, only 3 (0.15%) soil samples (FI-1-FI-3) from 1 farm in the south east region were positive for L. monocytogenes. Based on biochemical tests and multiplex PCR, the serotype of the isolates were 4ab (FI-1 and FI-3) and 3a (FI-2), which are not common in foodborne L. monocytogenes. The 3a sero-type isolate was positive for all tested virulence genes, whereas the 4ab serotype isolates were only positive for hlyA, actA, and inlA. The isolates were resistant to all 12 tested antibiotics, especially FI-3. The genetic correlations among the isolates were 100% for those of the same serotype and 26.3% for those of different serotypes. These results indicate that the prevalence of L. monocytogenes on livestock farms in Korea is low; however, the isolates are pathogenic and antibiotic resistant.
The objective of this study was to identify the coccoidal bacteria present in 188 samples of fermented yaks’, mares’ and cows’ milk products collected from 12 different regions in Mongolia. Furthermore, we evaluated the fermentation properties of ten selected isolates of the predominant species, Streptococcus (S.) thermophiles, during the process of milk fermentation and subsequent storage of the resulting yoghurt at 4℃. Overall, 159 isolates were obtained from 188 samples using M17 agar. These isolates were presumed to be lactic acid bacteria based on their gram-positive and catalase-negative properties, and were identified to species level using 16S rRNA gene sequence analysis. These coccoid isolates were distributed in four genera and six species: Enterococcus (E.) durans, Enterococcus (E.) faecalis, Lactococcus (Lac.) subsp. lactis, Leuconostoc (Leuc.) lactis, Leuconostoc (Leuc.) mesenteroides. subsp. mesenteroides and S. thermophilus. Among these S. thermophilus was the most common species in most samples. From evaluation of the fermentation characteristics (viable counts, pH, titratable acidity [TA]) of ten selected S. thermophilus isolates we could identify four isolates (IMAU 20246, IMAU20764, IMAU20729 and IMAU20738) that were fast acid producers. IMAU20246 produced the highest concentrations of lactic acid and formic acid. These isolates have potential as starter cultures for yoghurt production.
Distribution of Salmonella enterica serovars and their associated virulence determinants is wide-spread among food animals, which are continuously implicated in periodic salmonellosis outbreaks globally. The aim of this study was to determine and evaluate the diversity of five Salmonella serovar virulence genes (invA, pefA, cdtB, spvC and iroN) isolated from food animals and humans. Using standard microbiological techniques, Salmonella spp. were isolated from the feces of humans and three major food animals. Virulence determinants of the isolates were assayed using PCR. Clonal relatedness of the dominant serovar was determined via pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) using the restriction enzyme, Xbal. Seventy one Salmonella spp. were isolated and serotyped into 44 serovars. Non-typhoidal Salmonella (NTS; 68) accounted for majority (95.8%) of the Salmonella serovars. Isolates from chicken (34) accounted for 47.9% of all isolates, out of which S. Budapest (14) was predominant (34.8%). However, the dominant S. Budapest serovars showed no genetic relatedness. The invA gene located on SPI-1 was detected in all isolates. Furthermore, 94% of the isolates from sheep harbored the spvC genes. The iroN gene was present in 50%, 100%, 88%, and 91% of isolates from human, chicken, sheep, and cattle, respectively. The pefA gene was detected in 18 isolates from chicken and a single isolate from sheep. Notably, having diverse Salmonella serovars containing plasmid encoded virulence genes circulating the food chain is of public health significance; hence, surveillance is required.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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