Kim, Borim;Lee, Soojin;Park, Joohong;Lu, Mingshou;Oh, Minkyu;Kim, Youngrok;Lee, Jinwon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권9호
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pp.1258-1263
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2012
2,3-Butanediol (2,3-BD) is a major metabolite produced by Klebsiella pneumoniae KCTC2242, which is a important chemical with wide applications. Three genes important for 2,3-BD biosynthesis acetolactate decarboxylase (budA), acetolactate synthase (budB), and alcohol dehydrogenase (budC) were identified in K. pneumoniae genomic DNA. With the goal of enhancing 2,3-BD production, these genes were cloned into pUC18K expression vectors containing the lacZ promoter and the kanamycin resistance gene to generate plasmids pSB1-7. The plasmids were then introduced into K. pneumoniae using electroporation. All strains were incubated in flask experiments and 2,3-BD production was increased by 60% in recombinant bacteria harboring pSB04 (budA and budB genes), compared with the parental strain K. pneumoniae KCTC2242. The maximum 2,3-BD production level achieved through fed-batch fermentation with K. pneumoniae SGJSB04 was 101.53 g/l over 40 h with a productivity of 2.54 g/l.h. These results suggest that overexpression of 2,3-BD synthesis-related genes can enhance 2,3-BD production in K. pneumoniae by fermentation.
Alam, Mohammad Khairul;Ogata, Yasumichi;Sato, Yukari;Sano, Hiroaki
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권4호
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pp.523-529
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2016
An isotope dilution method using $[U-^{13}C]glucose$ and $[1-^{13}C]leucine$ (Leu) was conducted to evaluate the effects of rice straw supplemented with urea and molasses (RSUM-diet) on plasma glucose and Leu turnover rates in sheep. Nitrogen (N) balance, rumen fermentation characteristics and blood metabolite concentrations were also determined. Four sheep were fed either mixed hay (MH-diet), or a RSUM-diet with a crossover design for two 21 days period. Feed allowance was computed on the basis of metabolizable energy at maintenance level. The isotope dilution method was performed as the primed-continuous infusion on day 21 of each dietary period. Nitrogen intake was lower (p = 0.01) for the RSUM-diet and N digestibility did not differ (p = 0.57) between diets. Concentrations of rumen total volatile fatty acids tended to be higher (p = 0.09) for the RSUM-diet than the MH-diet. Acetate concentration in the rumen did not differ (p = 0.38) between diets, whereas propionate concentration was higher (p = 0.01) for the RSUM-diet compared to the MH-diet. Turnover rates as well as concentrations of plasma glucose and Leu did not differ between diets. It can be concluded that kinetics of plasma glucose and Leu metabolism were comparable between the RSUM-diet and the MH-diet, and rumen fermentation characteristics were improved in sheep fed the RSUM-diet compared to the MH-diet.
한국식물학회 1995년도 식물학심포지움 식물로부터 유용 2차대사산물의 생산 PRODUCTION OF USEFUL SECONDARY METABOLITES FROM PLANTS
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pp.40-56
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1995
During the past two decades, China has seen her great progress in plant biotechnology. Since the Chinese market of herb medicine is huge, while the plant resources are shrinking, particular emphasis has been placed in plant tissue and cell cultures of medicinal plants, this includes fast propagation, protoplast isolation and regeneration, cell suspension cultures and large scale fermentation. To optimize culture conditions for producing secondary compounds in vitro, various media, additives and elicitors have been tested. Successful examples of large scale culture for the secondary metabolite biosynthesis are quite limited : Lithospermum ery throrhizon and Arnebia euchroma for shikonin derivatives, Panax ginseng, P. notoginseng, P. quinquefolium for saponins, and a few other medicinal plants. Recent development of genetic transformation systems of plant cells offered a new approach to in vitro production of secondary compounds. Hairy root induction and cultures, by using Ri-plasmid, have been reported from a number of medicinal plant species, such as Artemisia annua that produces little artemisinin in normal cultured cells, and from Glycyrrhiza uralensis. In the coming five years, Chinese scientists will continue their work on large scale cell cultures of a few of selected plant species, including Taxus spp. and A. annua, for the production of secondary metabolites with medicinal interests, one or two groups of scientists will be engaged in molecular cloning of the key enzymes in plant secondary metabolism.
Aflatoxin is a secondary fungal metabolite and is a public health hazard because it is a human carcinogenic and has many deleterious effects in men and animals. Rice is one of the better substrates for the fungus which can produce aflatoxins. This study was performed to investigate aflatoxin reduction during the cooking and processing of rice. Aflatoxin was produced by Aspergillus parasiticus ATCC 15517 on well-milled rice(Japonica type) at the level of 13.2 ppb. Cooked rice, rice cakes (baek-sol-gi, plain steamed rice bread), fermented rice (sik-hye, sweet rice beverage), and popped rice were prepared from the aflatoxin-contaminated rice. Aflatoxin content in the samples was determined by high performance liquid chromatography. The total aflatoxin level was decreased to 46.9% in the cooked rice, 85.6% in the rice cakes, 11.4% in the fermented rice, and 7.6% in the popped rice, respectively (p<0.05). This reduction brought the level of aflatoxins down to below the Standard and Specification of Korea (10 ppb), except for the rice cakes. These results indicate that washing, steaming, fermentation, and popping of rice was helpful in reducing the aflatoxin level in the rice and the most helpful factors were high temperature & high pressure. More research is needed to understand why the preparation of rice cakes did not reduce the level of aflatoxin as much as the other cooking methods.
Ilavenil, Soundarrajan;Arasu, Mariadhas Valan;Vijayakumar, Mayakrishnan;Jung, Min-Woong;Park, Hyung Soo;Lim, Young Cheol;Choi, Ki Choon
한국초지조사료학회지
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제34권3호
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pp.174-178
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2014
The present study was planned to analyze the nutritional quality, microbial counts and fermentative acids in Italian ryegrass (IRG) 80% and alfalfa 20% (IRG-HV) mediated silage inoculated with lactic acid bacteria (LAB) as a probiotic strain for 3 months. Crude protein (CP), acid detergent fiber (ADF), and neutral detergent fiber (NDF), total digestible nutrient (TDN) and In-vitro dry matter digestibility (IVDMD), lactic acid bacteria (LAB), yeast and fungi counts and fermentation metabolites such as lactic acid, acetic acid and butyric acids were analyzed. The result shows that the nutritional quality and metabolite profiles of silage were significantly improved with LAB. For microbial counts, LAB showed dominant followed by yeast as compared with control silage. The pH of the silage also reduced significantly when silage inoculated with LAB. The result confirmed that silage preparation using different crops with L. plantarum inoculation is most beneficial for the farmers.
We investigated the effects of dissolved oxygen (D.O.) and fructose (C-source) on cell growth and biosynthesis of cyclosporin A (CyA) produced as a secondary metabolite by a wild-type filamentous fungus, Tolypocladium inflatum. This was performed by controlling the level of D.O. and the residual C-source, as required, through adjustment of medium flow rate, medium concentration and agitation rate in fed-batch cultures. CyA production was furned out to be maximal, when D.O. level was controlled around 10% saturated D.O. and concentration of the C-source was maintained sufficiently low (below 2 g/L) not to cause carbon catabolite repression. Under this culture condition, we obtained the highest values of CyA concentration (507.14 mg/L), Qp (2.11 mg CyA/L/hr), $Y_x/s$ (0.49 g DCW/g fructose), $Y_p/s$<(22.56 mg CyA/g fructose), and YTEX>$_p/x$ (48.31 mg CyA/g DCW), but relatively lower values of cell concentration (11.98 g DCW/L) and cell productivity (0.043 g DCW/L/hr), in comparison with other parallel fed-batch fermentation conditions. These results implied that, in the carbon-limited culture with 10% saturated D.O. level, the producer microorganism utilized the C-source more efficiently for secondary metabolism.
Ran Liu;Xuehua Han;Jing Gao;Min Luo;Dale Guo;Guangzhi Wang
Mycobiology
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제51권3호
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pp.148-156
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2023
Penicillium oxalicum strain can be isolated from the Bletilla striata (Thunb.) Reichb. f. tubers. Its solid-state fermentation products are concentrated by percolation extraction. Separation and purification have been conducted to the ethyl acetate extracts by preparative HPLC. Based on the use of spectrometry, we have determined 17 known compounds, 12,13-dihydroxy-fumitremorgin C (1), pseurotin A (2), tyrosol (3), cyclo-(L-Pro-L-Val) (4), cis-4-hydroxy-8-O-methylmellein (5), uracil (6), cyclo-(L-Pro-L-Ala) (7), 1,2,3,4-tetrahydro-4-hydroxy-4-quinolin carboxylic acid (8), cyclo-(Gly-L-Pro) (9), 2'-deoxyuridine (10), 1-(b-D-ribofuranosyl)thymine (11), cyclo-(L-Val-Gly) (12), 2'-deoxythymidine (13), cyclo-(Gly-D-Phe) (14), cyclo-L-(4-hydroxyprolinyl)-D-leucine (15), cyclo-(L)-4-hydroxy-Pro-(L)-Phe (16), uridine (17). Here, we report compounds 1-3, 5, 7-8, 11-12, 14-17 are first found and isolated from this endophyte.
새로운 제초제 개발을 위한 선도물질을 발견하고자 본 연구를 실시하였다. 국내에 8개 지역으로부터 채취한 11개 자생식물로부터 총 187개의 식물내생곰팡이를 분리한 후 감자즙액배지와 쌀고체배지에 배양한 다음, 밭잡초와 좀개구리밥에 대한 제초활성을 조사하였다. 그 결과, 소나무에서 분리한 Gliocladium catenulatum F0006 균주의 액체배지와 고체배지 추출물이 실험에 사용한 10개의 밭잡초 중에서 도꼬마리에 대해서만 선택적으로 70%의 제초활성을 보였다. 칡에서 분리한 F0034 균주의 고체배지 추출물은 10가지 밭잡초 모두에 20%에서 100%까지의 제초활성을 보였는데, 특히 수수, 돌피, 왕바랭이 및 미국 개기장 등이 민감하게 반응하였다. 그리고 소나무에서 분리한 F0043 균주의 고체배지 추출물은 5가지 화본과 식물에 대해서만 20%에서 70%까지의 제초활성을 보였다. 한편, 좀개주리밥에 대한 실험 결과, 액체배지는 8개 균주가 배지농도 5% 이하의 농도에서, 고체배지 추출물에서는 12개 균주가 좀개리밥의 생장을 100% 억제하는 높은 활성을 보였다. G. catenulatum F0006 균주의 고체배양체로부터 반복적인 컬럼과정과 생물검정을 통하여 한 개의 제초활성 물질을 분리하였다. 이 물질은 도꼬마리에 대해서만 특이적으로 제초활성을 보였는데, $500\;{\mu}g/ml$에서는 완전히 치사시켰고, $100\;{\mu}g/ml$에서는 도꼬마리 생장을 85% 억제하였다. 분리한 물질의 분자량은 238 daltons 이었다.
곰팡이 균인 Aspergillus terreus로서 고지혈증인 치료제인 lovastatin을 생산하기 위해 탄소원 조절에 의한 유가식 배양을 통해 lovastatin 생산 발효 조건을 확립하고자 하였다. 또한 발효시 곰팡이의 형태구조가 이차대사산물 생산에 중요함으로 유가식 배양에서의 공급배지농도와 공급속도에 따른 형태 구조의 변화가 생산성과 관련이 있는지를 구명하였다. Glucose 용액을 일정하게 또는 증가시켜 공급하는 방법을 실험하였으며 이 때 펠 의 분포를 비교하였다. Glucose 용액을 일정하게 공급한 경우가 1 mm 이하의 펠 이 더 많이 분포하였으며, lovastatin 생산량도 높았다. Lovastatin 생산에 적절한 펠 의 크기가 1 mm이었다는 연구 결과와 일치하였다. 또한 배양 방법 중 3일간 회분 배양 후 4일째부터 glucose를 일정하게 공급한 경우에서 높은 lovastatin 생산량을 나타내었다. 회분식 발효에서 lovastatin 생산을 위한 물리적 조건 중 교반 속도는 400 rpm으로 조절하였고 pH에 대한 영향을 조사하였다. 그 결과 pH 5.8로 유지하였을 때 lovastatin 생산량은 pH 7.4의 7배 이상인 384 mg/L로서 발효 기간 중 pH 조절이 중요하다는 것을 알 수 있었다. 플라스크에서의 유가식 배양과 회분식 배양결과를 토대로 하여 발효조에서 유가식 배양시 pH 5.8, 400 rpm, 초기 glucose 농도를 30 g/L 로 하여 3일간 회분 배양 후 4일째부터 180 g/L의 glucose 용액을 공급한 결과, 회분식 배양의 lovastatin 생산량보다 1.5배 많은 547 mg/L를 얻었으며, 생산성은 3.25 mg/L $\cdot$ hr였다.
재래식 간장의 맛을 개선하기 위하여 대두 자숙액, 당 및 젖산균과 효모를 접종하고 자연조건에서 발효시키면서 젖산발효와 알코올발효 효과를 조사하였다. 젖산균과 효모 접종구에서 젖산의 생성량이 2.91%로 가장 높았고, 그 다음이 간장 덧에 당만을 첨가한 구에서 2.38%, 대두 자숙액 만을 첨가한 대조구에서 2.05%로 나타나 모든구의 간장에서 젖산발효의 효과가 있었으나, 알코올은 모든 처리구에서 소량 검출되어 젖산균에 의해 생성된 초산 때문에 효모의 생육이 저해되어서 알코올발효 효과는 없는 것으로 나타났다. 기호도에서도 젖산균과 효모 접종구와 당 첨가구가 우수하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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