This article focuses on the effects of glycine betaine on preventing caramelization, and increasing DCW and $\small{L}$-lysine production. The additional glycine betaine not only decreased the browning intensity (decreased 4 times), and the concentrations of 5-hydroxymethylfurfural (decreased 7.8 times) and furfural (decreased 12 times), but also increased the availability of glucose (increased 17.5%) for $\small{L}$-lysine production. The DCW and $\small{L}$-lysine production were increased by adding no more than 20 mM glycine betaine, whereas the DCW and $\small{L}$-lysine production were decreased with the reduction of pH values, although pH had a better response to prevent caramelization than did glycine betaine. For $\small{L}$-lysine production, the highest increase (40%) was observed on the media with 20 mM glycine betaine. The crucial enzymes in glycolysis and $\small{L}$-lysine biosynthesis pathway were investigated. The results indicated that additional glycine betaine increases the activity of enzymes in glycolysis, in contrast to the effect of pH. All the results indicated that glycine betaine can be used to prevent caramelization and increase the $\small{L}$-lysine production. By applying this strategy, glucose would not be have to be separated from the culture media during autoclaving so that factories can save production costs and shorten the fermentation period.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.109-109
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2018
Bacillus subtilis B22, a chemotrophic and aerobic bacterial strain was isolated from homemade kimchi, identified by 16S rRNA gene sequencing. B22 was primarily screened by biochemical, carbon source utilization tests. B22 was used to produce pectinase and ${\beta}$-glucosidase by submerged fermentation under different light sources. B22 was incubated in pectin media and basal media (pH 7.0) under blue, green, red and white light-emitting diodes (LEDs), fluorescent white light, and in darkness at $37^{\circ}C$, orbital shaker 150 rpm for 24 hours. Fermentation under blue LEDs maximized pectinase production ($71.59{\pm}1.6U/mL$ at 24 h) and ${\beta}$-glucosidase production ($56.31{\pm}1.6U/mL$ at 24 h). Further, the production of enzyme increased to pectinase ($156{\pm}1.28U/mL$) and ${\beta}$-glucosidase ($172{\pm}1.28U/mL$) with 3% glucose as a carbon source. Activity and stability of the partially purified enzymes were higher at pH 6.0 to 8.0 and $25-55^{\circ}C$. The effect on the metal ions $Na^+$ and $K^+$ and (moderateactivity) $Mn^{2+}$ and $Ni^{2+}$ increased activity, while $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Fe^{2+}$, and $Fe^{2+}$ inhibited activity. EDTA, phenylmethylsulfonyl fluoride and 5,5-dithiobis (2-nitrobenzoicacid) reduced activity, while tetrafluoroethylene and 1,10-phenanthroline inhibited activity. The amylase was highly tolerant of the surfactants TritonX-100, Tween-20, Tween-80 and compatible with organic solvents methanol, ethanol, isoamylalcohol, isopropanol, t-butylalcohol and the oxidizing agents hydrogen peroxide, sodium perborate and sodium hypochlorite, although potassium iodide and ammonium persulfate reduced activity. These properties suggest utility of pectinase and ${\beta}$-glucosidase produced by B. subtilis B22 under blue LED-mediated fermentation for industrial applications.
Media optimization for the production of MR-387A and B, novel aminopeptidase M inhibitors by Streptomyces sp. SL-387 isolated from a soil was studied. Optimized medium was consisted of 1% glucose, 3% soybean meal, 0.2% yeast extract, 0.1% beef extract, 0.3% NaCl, 0.01% $K_2HPO_4$, 0.3% $CaCO_3$, 0.001% $MnCl_2{\cdot}4H_2O$, 0.001% $ZnCl_2{\cdot}7H_2O$, and 0.0005% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and adjusted to pH 7.0 before autoclaving. When the optimized medium was used as a fermentation medium, maximum productivity of MR-387 was reached at 120 hours of fermentation, and total productivity was 909.1 U/ml.
Tyrosinase is an enzyme which catalyzes an enzymatic browning of some foods and in vivo synthesis of melanin. In order to produce natural and edible inhibitor of the enzyme which is expected to have whitening effect on melanogenesis, a microorganism was selected from fermented foods. It was named as NU-7, and cultured in mushroom (Lentinus edodes, Shiitake) media. Optimal media to produce tyrosinase inhibitor was formulated by varing nitrogen or carbon content. If glucose content was in a range of 3-20% and ammonium sulfate was in a range of 0-0.25%, production of inhibitor was independent of cell mass. Addition of ammonium sulfate as a nitrogen source had little effect on inhibitor production. Production of inhibitor (Y) was proportionally related to shiitake content (X) with a regression equation of Y= -0.96X$^{2}$ + 13.07X + 14.43 (R = 0.96). These results indicate that shiitake and glucose are necessary for the production of tyrosinase inhibitor. In the analysis of mycotoxin in culture broth, aflatoxin was not detected, suggesting that it would be probably edible.
Transactions of the Korean hydrogen and new energy society
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v.17
no.4
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pp.379-388
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2006
Two mesophilic trickling bed bioreactors filled with two different types of media, hydrophilic- and hydrophobic-cubes, were designed and conducted for hydrogen production under the anaerobic fermentation of sucrose. Each bioreactor consisted of the column packed with polymeric cubes and inoculated with heat-treated sludge obtained from anaerobic digestion tank. A defined medium containing sucrose was fed by the different hydraulic retention time(HRT), and recycle rate. Hydrogen concentrations in gas-phase were constant, averaging 40% of biogas throughout the operation. Hydrogen production rate was increased till $10.5\;L{\cdot}h^{-1}{\cdot}L^{-1}$ of bioreactor when influent sucrose concentrations and recycle rates were varied. At the same time, the hydrogen production rate with hydrophobic media application was higher than its hydrophilic media application. No methane was detected when the reactor was under a normal operation. The major fermentation by-products in the liquid effluent of the both trickling biofilters were acetate, butyrate and lactate. In order to run in the long term operation of both reactor filled with hydrophilic and hydrophobic media, biofilm accumulation on hydrophilic media and biogas produced should be controlled through some process such as periodical backwashing or gas-purging. Four sample were collected from each reactor on the opposite hydrogen production rate, and their bacterial communities were compared by terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP) analysis of PCR products generated using bacterial 16s rRNA gene primers (8f and 926r). It was expressed a marked difference in bacterial communities of both reactors. The trickling bed bioreactor with hydrophobic media demonstrates the feasibility of the process to produce hydrogen gas. A likely application of this reactor technology can be hydrogen gas recovery from pre-treatment of high carbohydrate-containing wastewaters.
This study has investigated the effect of Ganoderma lucidum water soluble extract on higher alcohol production of Saccharomyces cerevisiae. S. cerevisiae was inoculated in malt wort media which were added 0, 0.01, 0.1, 0.5 or 1.0% extracts of G. lucidum and fermented at $15^{\circ}C$ for 120 hours respectively. Some results about cell growth, changes of pH and sugarity and alcohol composition during fermentation are as follows; The cell growth of S. cerevisiae was remarkablely increased as G. lucidum extract was added into each step. It was increased to 1.2, 1.5, 1.9 times on added group of 0.1%, 0.5%, 1.0% G. lucidum extract than control group after the fermentation of 120 hours. Content of sugar was systematically low on step of addition of G. lucidum extract after the fermentation of 120 hours but pH was systematically high. The more the quantity of G. lucidum extract was added, the more total alcohol quantity were produced during fermentation. Especially higher alcohol content was more increased about 1.8 times on 1.0% group (219.9 ppm w/v) than on control group (117.26 ppm w/v) after the fermentation of 120 hours.
Park, Sang-Min;Eum, Kyuri;Kim, Sangyong;Jeong, Yong-Seob;Lee, Dohoon;Chun, Gie-Taek
KSBB Journal
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v.29
no.3
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pp.155-164
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2014
Succinic acid, a representative biomass-derived platform chemical, is a major fermentation product of Actinobacillus succinogenes. It is well known that carbon dioxide is consumed during the succinate fermentation, but the biochemical mechanism behind this phenomenon is not yet understood well. In this study, it was found that the addition of carbonic anhydrase (CA)s into media significantly enhances the succinic acid production by A. succinogenes during the fermentation supplied with carbon dioxide. It is likely that the (bi) carbonate produced by the CA activity from gaseous carbon dioxide is favoured by A. succinogenes for consumption and utilization. Therefore, the $MgCO_3$ requirement could be significantly reduced without compromising the succinate productivity. Furthermore, because of too high price of the commercial carbonic anhydrase, it was undertaken to economically overproduce a cyanobacterial carbonic anhydrase by the use of a recombinant Pichia pastoris. An expression vector system was constructed with the carbonic anhydrase gene PCR-cloned from Cyanobacterium Synechocystis sp., and introduced into P. pastoris for fermentation studies. About 95.9 g/L of succinic acid was produced in the production medium with 30 ppm of carbonic anhydrase, approximately 2 fold higher productivity compared to the parallel process with no supplementation of the enzyme. It is expected that this method can provide a valuable way of overcoming inefficiencies inherent in gas supply during $CO_2$-based bioprocesses like succinic acid fermentation.
Organic acid (OA) profiling analysis was performed in culture media from Lactobacillus pentosus K34 (L. pentosus K34) and Pediococcus lolli PL24 (P. lolli PL24) by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) following methoxime/tert-butyldimethylsilyl derivatives. 12 OAs were positively identified in culture media. Most of OA levels from L. pentosus K34 of hetero lactic fermentation were found to be higher when compared with those from P. lolli PL24 of homo lactic fermentation, which may explain different OA metabolism in each strain. In addition, the distorted dodecagonal star patterns were readily distinguishable, and the characteristics of each strain were well represented. The present study demonstrates that the OA metabolic profiling method by GC-MS combined with star pattern recognition is useful for the monitoring study of characteristic OA metabolism in various microorganisms.
Mass production of biocontrol agent is an essential step for its commercial use. Media composition and culture conditions for production of Bacillus amyloliquefaciens SKU-78, a potential biocontrol agent against bacterial wilts, were optimized by a flask culture. Low cost media combining nitrogen and carbon sources were tested. Maximum cell growth (> $2{\times}10^9$ CFU/ml) was obtained in a medium of 5% soy flour combined with 3% corn starch after 24 h cultivation. The optimum initial pH, temperature and shaking speed was 5.5, $30^{\circ}C$ and 150-250 rpm, respectively. Fermentation of SKU-78 was scaled up in 30 L fermenter and the profiles of cell density, pH, dissolved oxygen and spore formation were recorded. After 8 h lag phase, exponential growth occurred and reached at maximum viable cell number ($1.2{\times}10^{11}$ CFU/ml) after 20 h. The SKU-78 strain grown in a low cost medium exhibited the high suppression of bacterial wilts. The results indicate that SKU-78 strain can be produced in a low cost medium and provide a basis for scaling up to industrial level.
Trichoderma harzianum ZF-2 producing laccase was isolated from decaying samples from Shandong, China, and showed dye decolorization activities. The objective of this study was to optimize its culture conditions using a statistical analysis of its laccase production. The interactions between different fermentation parameters for laccase production were characterized using a Plackett-Burman design and the response surface methodology. The different media components were initially optimized using the conventional one-factor-at-a-time method and an orthogonal test design, and a Plackett-Burman experiment was then performed to evaluate the effects on laccase production. Wheat straw powder, soybean meal, and $CuSO_4$ were all found to have a significant influence on laccase production, and the optimal concentrations of these three factors were then sequentially investigated using the response surface methodology with a central composite design. The resulting optimal medium components for laccase production were determined as follows: wheat straw powder 7.63 g/l, soybean meal 23.07 g/l, $(NH_4)_2SO_4$ 1 g/l, $CuSO_4$ 0.51 g/l, Tween-20 1 g/l, $MgSO_4$ 1 g/l, and $KH_2PO_4$ 0.6 g/l. Using this optimized fermentation method, the yield of laccase was increased 59.68 times to 67.258 U/ml compared with the laccase production with an unoptimized medium. This is the first report on the statistical optimization of laccase production by Trichoderma harzianum ZF-2.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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