Zearalenone에 특이한 단크론성 항체를 개발하기위하여 형질세포종세포인 myeloma cell $(P3{\times}63Ag.V653)$과 zearalenone-oxime-bovine serum albumin (BSA) 결합체를 항원으로 면역시킨 BALB/c female mice의 비장세포를 융합시켜 hybridoma cell을 생산하였다. 그들의 항체가를 indirect competitive ELISA법으로 측정한 결과 zearalenone에 대하여 높은 친화력을 갖는 5세포주를 얻었다. 그중 Z-2-M26 hybridoma cell line이 생산하는 단크론성항체는 특히 zearalenone과 민감하게 반응하였고, ${\alpha}-zearalenol$과도 약간의 교차반응을 보였으나 ${\beta}-zearalenol,\;{\alpha}-zearalenol,\;{\beta}-zearalenol$ 및 DON과는 거의 반응하지 않았다. 따라서 본 실험에서 개발된 항체는 앞으로 zearalenone에 대한 민감하고 정량적인 효소면역측정법의 개발을 위한 중요한 면역시약으로 사용될 것으로 생각한다.
The effect of 1,8-cineole on cytochrome P450 (CYP) expression was investigated in male Sprague Dawley rats and female BALB/c mice. When rats were treated orally with 200, 400 and 800 mg/kg of 1,8-cineole for 3 consecutive days, the liver microsomal activities of benzy-loxyresorufin- and pentoxyresorufin-D-dealkylases and erythromycin N-demethylase were dose-dependently induced. The Western immunoblotting analyses clearly indicated the induction of CYP 2B1/2 and CYP 3A1/2 proteins by 1,8-cineole. At the doses employed, 1,8-cineole did not cause toxicity, including hepatotoxicity. Subsequently, 1,8-cineole was applied to study the role of metabolic activation in thioacetamide-induced hepatotoxicity and/or immunotoxicity in animal models. To investigate a possible role of metabolic activation by CYP enzymes in thioacetamide-induced hepatotoxicity, rats were pre-treated with 800 mg/kg of 1,8-cineole for 3 days, followed by a single intraperitoneal treatment with 50 and 100 mg/kg of thioacetamide in saline. 24 h later, thioacetamide-induced hepatotoxicity was significantly potentiated by the pretreatment with 1,8-cineole. When female BALB/c mice were pretreated with 800 mg/kg of 1,8-cineole for 3 days, followed by a single intraperitoneal treatment with 100 mg/kg of thioace-tamide, the antibody response to sheep red blood cells was significantly potentiated. In addition, the liver microsomal activities of CYP 2B enzymes were significantly induced by 1,8-cineole as in rats. Taken together, our results indicated that 1,8-cineole might be a useful CYP modulator in investigating the possible role of metabolic activation in chemical-induced hepato-toxicity and immunotoxicity.
Background: Contents of bioactive substances extractable from different parts of terrestrial plants vary enormously. Aim: To ascertain that parts of Withania somnifera other than its roots can also be used for prevention and cure of unavoidable stress triggered central hypersensitivity to pain. Material and Methods: Groups of male or female mice treated either with Withania somnifera extracts or with metformin, aspirin, imipramine, diazepam and niacin for 11 consecutive days were subjected to "foot-shock stress-induced hyperthermia" and "hot plate" tests on the 1st, 5th, 7th, and 10th days of the experiments. On the 11th day, they were subjected to tail suspension test and on 12th day pentobarbital hypnosis test. Results: Except for diazepam and imipramine, protective effects of all other tested drugs as well as of the Withania somnifera extracts against stress-induced central hypersensitivity to pain were accompanied by their preventive effects against foot-shock stress-induced body weight losses. All observed stress response suppressing effects of all test agents increased with increasing numbers of treatment days. However, mean duration of pentobarbital-induced sleep was shorter in the extracts treated groups and longer in the diazepam treated ones only. Conclusions: Reported observations reveal that pharmacological activity profile of Withania somnifera extracts in male and female mice are almost identical, and are not like those of several drugs currently often prescribed for the treatment of diabetes-associated comorbidities. Withanolides are not the only extractable bioactive constituents of Withania somnifera. The described bioassay system is well suited for pharmacological standardization of diverse types of Withania somnifera extracts.
Canine mammary tumors are among the most frequently observed cutaneous tumors in female dogs. Cancer stem cells (CSCs), referred to as tumor-initiating cells, are thought to have properties similar to normal stem cells such as the ability to self-renewal and to differentiate into various cell types. Biological understanding of CSCs and the critical pathways involved in their maintenance are important in research and therapy for mammary tumors. We conducted the present study on sphere formation from REM134 cells by using methylcellulose to produce tumorspheres on a large scale and compared the specific markers of the spheres-formed and plating-cultured REM134 cells. The results revealed that the tumorspheres cultured in methylcellulose had higher seeding density and improved morphology compared to those produced in normal sphere formation medium. Expression levels of stemness markers and CSC-related markers were higher in tumorsphere-forming cells than in plating-cultured cells. Subsequently, we transplanted the tumorsphere-forming and plating-cultured cells into female nude mice to examine their tumorigenic potential. Tumor volume increased rapidly in mice transplanted with tumorsphere-derived cells compared to plating-cultured cells. We observed a novel sphere-forming condition for REM134 cells and showed that REM134 cell tumorspheres can exhibit improved CSC properties.
Lee, Bo Young;Jo, Jeong Bin;Choi, Donchan;Lee, Sung-Ho;Cheon, Yong-Pil
한국발생생물학회지:발생과생식
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제25권4호
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pp.257-268
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2021
Phthalates and their metabolites are well-known endocrine disrupting chemicals. Di-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) has been widely used in industry and the exposing possibility to adult is high. In this study, DEHP was treated (133 ㎍/L and 1,330 ㎍/L in drinking water) according to the OECD test guideline 443 to mature female mice and their adrenal gland were examined for histological characteristics and steroidogenic gene expression. The wet weight of the adrenal gland was increased in all administrated groups compared to control. The diameter of zona fasciculata (ZF) was increased by DEHP in both outer ZF and inner ZF but there was no difference in morphology of the cells and arrangements into zona between groups. In addition, the arrangement of extracellular matrix was not different between control and DEHP groups. CYP11B1 was mainly localized at ZF and the intensity was not different between groups. DAX1 was localized in zona glomerulosa (ZG) and ZF, and its expression levels were decreased by DEHP administration. Its level was lower in DEHP133 group than DEHP1330 group. On the other hand, CYP17A1 was localized in ZG of DEHP1330 group. These results suggest that chronic low-dose DEHP exposing may modify the microstructure and function of the adrenal cortical cortex.
Kim, Jaedeok;Lee, Nayoung;Suh, Sang Bum;Jang, Sooyeon;Kim, Saeha;Kim, Dong-Gyu;Park, Jong Kook;Lee, Keun-Wook;Choi, Soo Young;Lee, Chan Hee
BMB Reports
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제55권6호
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pp.293-298
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2022
Antipsychotics have been widely accepted as a treatment of choice for psychiatric illnesses such as schizophrenia. While atypical antipsychotics such as aripiprazole are not associated with obesity and diabetes, olanzapine is still widely used based on the anticipation that it is more effective in treating severe schizophrenia than aripiprazole, despite its metabolic side effects. To address metabolic problems, metformin is widely prescribed. Hypothalamic proopiomelanocortin (POMC) neurons have been identified as the main regulator of metabolism and energy expenditure. Although the relation between POMC neurons and metabolic disorders is well established, little is known about the effects of olanzapine and metformin on hypothalamic POMC neurons. In the present study, we investigated the effect of olanzapine and metformin on the hypothalamic POMC neurons in female mice. Olanzapine administration for 5 days significantly decreased Pomc mRNA expression, POMC neuron numbers, POMC projections, and induced leptin resistance before the onset of obesity. It was also observed that coadministration of metformin with olanzapine not only increased POMC neuron numbers and projections but also improved the leptin response of POMC neurons in the olanzapine-treated female mice. These findings suggest that olanzapine-induced hypothalamic POMC neuron abnormality and leptin resistance, which can be ameliorated by metformin administration, are the possible causes of subsequent hyperphagia.
DW-166HC ($^{166}$Holmium-chitosan) is a complex of $^{166}$Ho, $\beta$- and $\gamma$-ray emitter, and chitosan, a polymer of glucosamine, with radiotherapeutic potential. The current study was performed to determine the acute toxicities of $^{165}$Ho-chitosan in mice by two different routes of administration. The both sex mice were given a single intravenous bolus injection of $^{165}$Ho-chitosan complex at doses of 12, 10, 6, 5 and 4 mg/kg or subcutaneous administration at doses of 600, 500, 400 and 300 mg/kg. Chitosan was dosed to control animals as 16 and 800 mg/kg, intravenously and subcutaneously, respectively. The doses of $_{165}$Ho-chitosan complex were expressed as $_{165}$holmium nitrate pentahydrate and the ratio of $^{165}$Ho$(NO_3)_3$).$5H_2O$ to chitosan was 3/4 Severe convulsion and respiratory failure were followed by death within 10 min after intravenous dosing. Transient unilateral hindlimb hypokinesias were found in two mice of 5 mg/kg dosing group during the study period. No abnormalities were observed during the necropsy of survived animals in intravenous dosing group. Only one male animal was found dead in 500 mg/kg subcutaneously dosed group. Alopecia with or without cutaneous ulcer were found in most mice including control animals. During necropsy, omental adhesion was observed in all dose ranges and enlarged spleen was found in several animals including control group. It is suggested that the acute intravenous >).$LD_{50}s$ for male and female mice were 4.90 and 6.03 mg/kg, respectively. The lowest lethal dose in male was 500 mg/kg by subcutaneous administration.
Bonogen shampoo is composed of several plant extracts which are known to be used in oriental medicine. This study was carried out to investigate the effects of Bonogen shampoo on hair growth in an alopecia model of C57BL/6 mice. There were eight male and female experimental groups including distilled water(DW: negative control), a commercial shampoo[M], 3% minoxidil (MXD) and Bonogen shampoo(BNG). Dorsal skin hair of six-week-old mice was trimmed with an electric clipper carefully not to damage the skin. The next day, mice without skin scratch were selected, randomized and separated in 10 mice per group. The test compounds were topically treated with 0.15 ml per mouse or dorsal skin for 21 days daily and then washed thoroughly with DW. The hair regrowth was determined photographically at 0, 4, 7, 10, 15, 18, and 21 days and histologically at day 21. No clinical signs were observed in all mice. Although body weight was slightly increased in 3% MXD group than other groups, it was not significant. Hair regrowth began to be promoted after 14 days and appeared a distinct regrowth pattern in all animals by topical treatment of test compounds at 18 days. In particular, the topical treatment of bonogen shampoo or 3% MXD for 21 days to dorsal skin accelerated hair regrowth faster than DW or M shampoo. At 21 days, the hair regrowth promotion speed was in order of 3% MXD>BNG>M>DW. The bonogen shampoo or 3% MXD also promoted hair follicle elongation compared to the negative control. These results suggest that bonogen shampoo has hair growth promoting activities and may be useful for treatment of bald or alopecia.
This study was conducted to examine the effect of oocyte donor age and micromanipulation medium on the development of mouse cloned embryos receiving cumulus cells. Mouse oocytes were obtained from 6 to 11 week-old mice BDF1 female mice(experiment 1) and cumulus cells were used as donor cells. Micromanipulation procedures for nuclear transfer(NT) were performed in FHM, M2 or Hepes-buffered TCM199(TCM199) medium(experiment 2). After nuclear transfer, the reconstructed oocytes were activated by 10 mM $SrCl_2$ in Ca-free CZB medium in the presence of 5 II ${\mu}$g/ml cytochalasin B for 5 h and cultured in KSOM medium for 4 days. In experiment 1, the survival rate of oocytes after injection of cumulus cells were significantly(p<0.05) lower in oocytes from 6~7 week-old mice(53.3%) than in oocytes from 8~9(80.9%) and 10~11 week-old mice(77.1%). In experiment 2, the survival rate of oocytes after cell injection were significantly(p<0.05) higher in FHM and M2 medium(71.7% and 76.9%) than in TCM199 medium(51.2%). The activation rates of cloned embryos were not different among the micromanipulation media. However, the embryos developed to blastocyst stage were significantly(p<0.05) higher in FHM medium(13.9%) than in M2 and TCM199 medium(0.0% and 0.0%). In conclusion, the present study suggest that oocytes from above 8 week-old mice are superior to oocytes from 6~7 week-old mice as a source of recipient cytoplasm and FHM is superior to M2 and TCM199 as a micromanipulation medium for mouse somatic cell cloning.
종양영상과 치료에 이용할 수 있는 새로운 종양 친화성 물질을 발견하는 것은 핵의학 분야에서 중요하다. Vitamin $B_{12}$는 thymidylate 생합성과정에서 DNA 합성에 필수적인 조효소로서 분열속도가 빠른 세포와 조직 즉 태생기 세포와 일부 종양에 많은 양이 축적된다. 본 연구의 목적은 마우스에서 다양한 조직학적 형태의 종양에 의한 방사표지 vitamine $B_{12}$의 종양 친화성을 결정하여 $^{57}Co$-vitamine $B_{12}$가 종양영상 물질로서 가능한지를 규명하려고 하였다. 17 종류의 종양을 Balb/C와 Balb nu/nu 누드마우스에 피하주사하였다. 종양이 직경 약 $1.0cm^3$ 되었을 때 $^{57}Co$-methylcobalamin을 복강 내로 주사하였다. 24시간 후에 마우스를 희생하여 신장, 간, 종양, 비장, 뼈(우측 대퇴골), 장, 지방조직(복강내), 근육, 혈액(100 ul), 췌장을 제거하여 무게를 챈 후 gamma countcr로 방사능을 측정하였고 cpm/mg tissue로 표시하였다. 이때 마우스 문제에 따른 차이를 없게하기 위해 20g 몸무게로 표준화 하였다. 다양한 종류의 종양에서 $^{57}Co$-vitamine $B_{12}$가 의의 있게 축적되었고 종양대 정상조직의 섭취비도 대부분의 조직에서 높았으며 특히 배후 방사능에 중요한 영향을 미치는 뼈, 근육, 혈액에서 뚜렷하게 높았다. 본 연구의 결과 vitamin $B_{12}$는 종양친화성 물질로서 종양영상에 사용이 가능한 물질로 생각되며 앞으로 종양영상면에서 임상적 이용에 대한 더 많은 연구가 이루어져야겠다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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