Monascus purpureus ATCC 16365에 의한 5-liter 배양기에서 pH 조절을 통하여 세포외로 이차대사물인 수용성 적색소의 생산 증가 현상 와 황색소 보다 적색소로의 대사과정을 촉진시켜 적색소의 생산성을 향상시킬수 있는지의 가능성에 대하여 실험을 수행하였다. 황색소와 적색소의 분석은 UV-Vis spectrophotometer를 이용하여 각각 385nm 와 495nm에서 측정하였다. 실험결과 곰팡이의 최대균체량과 황${\cdot}$적색소를 포함한 총 색소 생산양은 pH 8보다 pH 4.0-5.5인 산성조건에서 2배 및 4배정도 증가하였다. 적색소 및 황색소의 전구물질인 홍색소는 pH 4.0에서 많이 생성되며 또한 홍색소에서 적색소로의 대사과정도 산성 조건 하에서 촉진된다고 보고되었다. 본 실험에서도 같은 경향을 보였으며 또한, 산성 조건 하에서 특히 수용성 적색소가 곰팡이 세포 외로 유출되는 양이 증가하는 경향을 나타내었다.
An antagonistic bacterium Pseudomonas stutzeri YPL-1 liberated extracellular chitinase and $\beta$-1,3-glucanase which are key enzymes in the decomposition of fungal hyphal walls. The lytic enzymes caused abnormal swelling and retreating at the hyphal tips of plant pathogenic fungus Fusarium solani in a dual culture. Scanning electron microscopy revealed the hyphal degradation of F. solani in the regions interacting with P. stutzeri YPL-1. The production of chitinase and properties of a crude preparation of the enzyme from P. stutzeri YPL-1 were investigated. Peak of the chitinase activity was detected after 4 hr of cultivation. The enzyme had optimum temperature and pH of 50$^{\circ}C$ and pH 5.3, respectively. The enzyme was stable in the pH range of 3.5 to 6.0 up to 50$^{\circ}C$. The enzyme was significantly inhibited by metal compounds such as $HgCl_2$, but was stimulated by $CoCl_2$. P. stutzeri YPL-1 produced high levels of the enzyme after 84 hr of incubation. Among the tested carbon sources, chitin was the most effective for the enzyme production, at the concentration level of 3%. As a source of nitrogen, peptone was the best for the enzyme production, at the concentration level of 4%. The maximum amount of enzyme was produced by cultivating the bacterium at a medium of initial pH 6.8.
A bacterial strain, designated as WY22, producing extracellular chitinase was isolated from the soil around the Youngduck area, after enrichment culture in a medium containing $1{\%}$ (w/v) wet colloidal chitin as a sole carbon source. The isolate was identified as a strain of Bacillus sp. based on its morphological and physiological characteristics. It was observed that Bacillus sp. WY22 could inhibit the growth of Fusarium oxysporum with hyphal extention-inhibition assay on potato dextrose agar plate supplemented with $1{\%}$ collidal chitin. Optimum culture conditions of Bacillus sp. WY22 were examined for chitinase production in a chitin medium. High level production of chitinase was observed not only in the chitin medium but in a medium supplemented with $1{\%}$ N-glucosamine or lactose instead of chitin. The optimum concentrations of colloidal chitin and yeast extract were 3.0 and $0.5{\%}$, and the optimum culture conditions for initial pH of medium and temperature were 7.0 and $30^{\circ}C$, respectively, for the production of chitinase.
Solar ultraviolet (UV) irradiation leads to distinct changes in the skin connective tissues by degradation of collagen, which is a major structural component in the extracellular matrix. UV irradiation induces the production of matrix metalloproteinases (MMP) capable of attacking native fibrillar collagen and responsible for inhibiting the construction of collagenous extracellular matrix. In this study, we attempted to investigate the protective actions of Rubus coreanus ethanol extract (RCE) on the MMP production and the consequent procollagen/collagen degradation in UV-B-irradiated human dermal fibroblasts. The analytical data showed that Rubus coreanus ethanol extract was mostly comprised of cyanidin 3-rutinoside. Pre-treatment of fibroblasts with this extract inhibited UV-B-induced production of MMP-1, MMP-8 and MMP-13 in dose-dependent manners. In addition, Western blot analysis and immunocytochemical staining assay revealed that RCE markedly augmented the cellular levels of procollagen/collagen declined in UV-B-exposed dermal fibroblasts. These results demonstrate that RCE blocks UV-B-induced increase of the collagen degradation by inhibiting MMP production. Thus, RCE may act as an agent inhibiting excessive dermal collagen degradation leading to the skin photoaging.
토양으로부터 균체외(菌體外) 단백질 생산균주 17주(株)를 분리하여 이 중 단백질생산이 강한 T219를 선정하여 동정(同定)하였으며 단백질 생산에 영향을 미치는 인자(因子)들을 검토하였다. T219균주(菌株)는 Bacillus속으로 동정(同定)되였으며 균체외(菌體外) 단백질생산 최적온도는 $25^{\circ}C$, pH는 7.5이었다. 단백질생산균주들이 분비하는 단백질에서는 protease와 amylase활성은 보이지 않았으며, 배양시간에 따른 단백질생산은 배양 2일에서 최대로 되었다. yeast extract와 meat extract를 함유한 배지에서 균체증식은 컸지만, 단백질 축적은 거의 없었고, polypeptone은 균체(菌體) 증식과 단백질생산에 큰 효과를 보였다. 또한 배지에 glycine과 L-isoleucine을 혼합하여 첨가하였을때 단백질생산의 효과가 커서 4mg/ml의 단백질축적이 있었다. T219균주(菌株)는 streptemycin의 $30{\mu}g/ml$이상의 농도에서 생육이 저해되었고, EDTA의 5mM농도에서는 생육에 영향을 받지 않았다. 또한, 이들 물질은 단백질생산에 영향을 미치지 않았다.
The effects of bicarbonate concentration, atmospheric carbon dioxide level, and reduced atmospheric oxygen on biomass and geosmin production and geosmin/biomass (G/B) values for Streptomyces halstedii, a producer of the off-flavor compound geosmin, were determined. In addition, a study was performed to determined possible synergistic relationships between a cyanobacterium, Oscillatoria tenuis UTEX #1566, and S. halstedii in the enhancement of actinomycete growth and/or geosmin production. These studies took into consideration those conditions that can occur during cyanobacterial bloom die-offs. Increasing bicarbonate concentration caused slight decreases in geosmin production and G/B for S. halstedii. Increasing atmospheric oxygen promoted geosmin production and G/B while lower oxygen levels resulted in a decrease in geosmin production and G/B by S. halstedii. Biomass production by S. halstedii was adversely affected by reduced oxygen levels while changes in bicarbonate concentration and atmospheric carbon dioxdie levels had little effect on biomass production. Sonicated cells of O. tenuis UTEX #1566 promoted biomass production by S. halstedii, and O. tenuis culture (cells and extracellular metabolites) and culture supernatnat (extracellular metabolites) each promoted geosmin and G/B yields for S. halstedii. In certain aquatic systems, environmental conditions resulting from cyanobacterial blooms and subsequent bloom die-offs could favor actinomycete growth and off-flavor compound by certain actinomycetes.
알바비스커스 잎으로부터 세포외 지질을 대량 생산하는 효모를 분리하고 동정한 결과 Rhodotorula graminis SW 214로 확인하였으며, $25^{\circ}C$에서 8일간 진탕배양시 Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량은 7.31g/l였다. 배지내의 질소원과 탄소원의 농도는 세포의 지질 생산에 큰 영향을 주었는데 배지내의 질소원이 효모 성장에 거의 이용되고 탄소원이 아직 남아 있을때 지질 생산이 활발히 이루어졌다. 배지내에 질소원 농도가 높은 동안에는 지질 생산이 더디게 이루어졌다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 gluaminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 glucose 8%, yeast extract 2.5g/l, $KH_{2}PO_{4}\;1g/l,\;MgSO_{4}{\cdot}7H_{2}O\;0.2g/l$, pH6에서 8일간 배양할 때임을 알 수 있었고 효모건조 균체량은 8.05g/l, 지방 생산량은 8.89g/l였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질의 TLC에 의한 분별 정량 결과는 triglyceride 75.16%, phospholipid 10.77%, free fatty acid 5.88, esterified sterol 4.94%, free sterol 3.25%였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지방의 주된 지방산 조성은 3-hydroxypentadecanate 37.90%, 3-hydroxypentadecanate 20.80%, trans-9-octadecanate 11.53%, cis-9-headecanate 10.93%, 15-methylhexadecanate 9.82%, 18-methylnonadecanate 4.63%, octadecanate 2.64%, 3-hydroxytridecanate 1.75%였다.
유산균이 생성하는 다당류에 관한 연구의 일환으로서 발효유 제품의 종균으로 널리 사용되고 있는 Str. themophilus, Lb. bulgaricus, Lb. casei 등을 10% 환원멸균 탈지유에 배양하면서 다당류 생성에 따른, 우유 배양액 점도의 경시적 변화 및 다당류의 최적 생성 조건에 대하여 조사하였다. 1. 시험균 중에서 Str. thermophilus 510이 가장 높은 점도를 나타냈으며 $41^{\circ}C$ 배양 5일째에 5,000 CP로서 다른균에 비해서 1,000 CP 이상 높았다. 2. 인공합성배지를 사용하여 흡광도를 측정한 결과 $41^{\circ}C$에서의 흡광도가 가장 높았으며 다당류 합성을 위한 탄소원으로서는 Sucrose의 이용성이 1~5% 농도에서 가장 높았다. 3. 다당류 합성효소의 금속염에 대한 영향을 살펴본 결과 $Mg^{++}$의 효과가 인정되었다.
Kluyveromyces marxianus로 부터 inulase를 생산하고 정제하며 intra 및 extracellular inulase의 성질을 조사하였다. 본 균주는 stationary phase인 24시간째 intra 및 extracelullar enzyme의 생산이 최고에 달했으며 유기 질소원으로 YNB를 사용하고 배양 중 pH를 조절해 줌으로써 효소 생산을 향상시킬 수 있었다. 조효소는 DEAE-cellulose에 의해 intra 및 extracellular inulase 모두 2개의 fraction으로 분리되었고 각 fraction의 전기영동 양상은 비슷하여 주 band를 비롯 모두 3개의 glycoprotein band가 관찰되었으며 이중 주 band만 inulase 및 invertase activity를 보유하고 있었다. 정제 효소의 inulase 및 invertase의 최적 pH는 각각 5.0과 4.5였고 intra가 extracellular enzyme 에 비해 다소 넓은 범위의 pH에서 높은 활성을 나타내었다. 모든 fraction의 최적 온도는 inulase가 $40^{\circ}C$, invertase가 $50^{\circ}C$였으며 intracellular enzyme이 더 넓은 범위의 온도에서 안정하였고 열에 대한 안정성도 intracellular inulase가 extracellular inulase보다 높게 나타났다. Km value는 intra가 $16{\sim}19mM$, extracellular inulase가 $9{\sim}11mM$로써 extracellular inulase가 inulin에 대한 친화력이 더 높았으나 모두 exo-type의 inulase로 판명되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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