In preliminary tests, we examined the effect of several fractions isolated from fermented pine needle extract on pacemaker potentials in cultured interstitial cells of Cajal (ICCs) from the mouse colon using a whole cell patch clamp technique. Among these fractions, Fraction 3 (F3) elicited the most powerful depolarization of membrane. Therefore, the aim of the present study was to investigate the effect of F3 obtained from fermented extract of Pinus densiflora needle on pacemaker potentials in ICCs and to establish its mechanism of action. Colonic ICCs generated spontaneous periodic pacemaker potentials in the current-clamp mode. F3 depolarized the membrane and decreased the frequency and amplitude of pacemaker potentials in a dose-dependent fashion. The F3-induced effects on pacemaker potentials were blocked by methoctramine, a muscarinic $M_2$ receptor antagonist, and by glycopyrrolate, a muscarinic $M_3$ receptor antagonist. The F3-induced effects on pacemaker potentials were blocked by external $Na^+$-free solution and by flufenamic acid, a non-selective cation channel blocker, as well as by the removal of external $Ca^{2+}$ and in the presence of thapsigargin, a $Ca^{2+}$-ATPase inhibitor in the endoplasmic reticulum. Taken together, these results suggest that F3 of pine needle extract modulates the pacemaker activity of colonic ICCs by the activation of non-selective cation channels via muscarinic $M_2$ and $M_3$ receptors. And external $Ca^{2+}$ influx and intracellular $Ca^{2+}$ release are involved in F3 actions on ICCs.
This study was designed to evaluate the efficacy of dynamic parameters, such as correlation dimension $D_2,$ by comparing spectral electroencephalographic (EEG) parameters. These parameters are used to estimate the depth of halothane anesthesia as defined by the presence of body movement in response to a tail clamp. Six rats were used and each of them was exposed to halothane sequentially at the concentrations of 0%, 0.5%, 1.0% and 1.5% for 30 min. A tail clamp was applied every five min and the movements were recorded at each concentration level. The spectral parameters and the dynamic parameters were derived from 20-sec and 10-sec segments, respectively, from the last 5-mins of EEG recording at each concentration level. Correlation coefficients between the parameters and the movements were calculated. Standardized values of three parameters, betaL power, median power frequency (MPF), and $D_2$ were derived by calculation based on the number of animals showing the movement in response to a tail clamp. The betaL power had the largest correlation coefficient to spontaneous movement and to the response to a tail clamp than any other band parameter. MPF had a better correlation with the movement than 90% spectral edge frequency. Among the dynamic parameters, $D_2$ on the parietal cortex had a better correlation with the movement. The level of deviation and variation of standardized $D_2,$ MPF, and betaL were significant (p<0.01). The order of deviation and variation was; betaL power > MPF > $D_2.$ The correlation dimension serves as a better index for the depth of halothane anesthesia defined in forms of a response to external stimulation.
Jo, Su-Hyun;Kim, Injune;Yung E. Earm;Lee, Chin-Ok;Ho, Won-Kyung
한국생물물리학회:학술대회논문집
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한국생물물리학회 1998년도 학술발표회
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pp.36-36
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1998
We reported previously that HERG current, molecular equivalent of I$_{kr}$, expressed in Xenopus oocytes is blocked by external $Ca^{2+}$ and $Mg^{2+}$. In the present study, we have investigated the effect of external H+ on HERG current (I$_{HERG}$) using the two microelectrode voltage clamp.(omitted)ted)
The objective of this study is to devise an alternative strengthening method to the ones available in the literature. So, external steel members were used to enhance both flexural and shear capacities of reinforced concrete (RC) beams having insufficient shear capacity. Two types of RC beams, one without stirrups and one with lacking stirrups, were prepared in the study. These beams were strengthened with external steel clamps devised by the authors and with external longitudinal reinforcements. Although the use of clamps alone didn't have a significant effect on the load carrying capacity of the tested beams, the ductility increased approximately tenfold and the failure behavior changed from brittle to ductile. Although the use of clamps and longitudinal reinforcements together did not significantly increase the ductility of the beams, it approximately doubled their load capacities. The results of the experimental study were compared to the ones obtained from nonlinear finite element analysis (NLFEA) and it was observed that they were compatible. Finally, it can be concluded that the devised method could be applied to structural members as an alternative to methods in application due to lightness, low-cost, easy applicable and reliable.
So, Keum Young;Kim, Sang Hun;Sohn, Hong Moon;Choi, Soo Jin;Parajuli, Shankar Prasad;Choi, Seok;Yeum, Cheol Ho;Yoon, Pyung Jin;Jun, Jae Yeoul
Molecules and Cells
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제27권5호
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pp.525-531
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2009
We studied the effect of carbachol on pacemaker currents in cultured interstitial cells of Cajal (ICC) from the mouse small intestine by muscarinic stimulation using a whole cell patch clamp technique and $Ca^{2+}$-imaging. ICC generated periodic pacemaker potentials in the current-clamp mode and generated spontaneous inward pacemaker currents at a holding potential of -70 mV. Exposure to carbachol depolarized the membrane and produced tonic inward pacemaker currents with a decrease in the frequency and amplitude of the pacemaker currents. The effects of carbachol were blocked by 1-dimethyl-4-diphenylacetoxypiperidinium, a muscarinic $M_3$ receptor antagonist, but not by methotramine, a muscarinic $M_2$ receptor antagonist. Intracellular $GDP-{\beta}-S$ suppressed the carbachol-induced effects. Carbachol-induced effects were blocked by external $Na^+$-free solution and by flufenamic acid, a non-selective cation channel blocker, and in the presence of thapsigargin, a $Ca^{2+}$-ATPase inhibitor in the endoplasmic reticulum. However, carbachol still produced tonic inward pacemaker currents with the removal of external $Ca^{2+}$. In recording of intracellular $Ca^{2+}$ concentrations using fluo 3-AM dye, carbachol increased intracellular $Ca^{2+}$ concentrations with increasing of $Ca^{2+}$ oscillations. These results suggest that carbachol modulates the pacemaker activity of ICC through the activation of non-selective cation channels via muscarinic $M_3$ receptors by a G-protein dependent intracellular $Ca^{2+}$ release mechanism.
지속적으로 증가하는 세계적인 전력수요로 인해 고전압 해저케이블 수요도 증가하고 있다. 해저케이블은 고가의 제작 비용과 높은 단가의 포설 비용 등이 해결되어야 할 부분 중 하나이다. 해양 환경에 노출된 해저케이블은 파랑 및 해류 등의 외력들에 의해 케이블 손상이나 사고 시에는 높은 유지 보수 비용 등의 문제가 발생할 수 있다. 따라서 해저케이블은 다양한 종류의 보호 기자재를 통해 해저 환경의 불확실성에 대비하고 있다. 본 연구에서는 대표적인 보호 기자재인 피기백 클램프(PBC)와 클램프에 사용되는 스트랩(strap)을 대상으로 해석적 방법을 통해 휨 성능을 살펴보았다. 피기백 클램프의 구조적 성능 검토를 위해 유연 보호 튜브의 최대 굽힘 모멘트 기준치인 15 kN·m 값을 토대로 휨 성능을 분석하였다, 그 결과, 피기백 클램프 및 strap의 굽힘 모멘트에 대한 휨 성능이 확보되었음을 확인할 수 있었다.
Objective : Carotid endarterectomy (CEA) is an effective surgical procedure for treating symptomatic or asymptomatic patients with carotid stenosis. Many neurosurgeons use a shunt to reduce perioperative ischemic complications. However, the use of shunting is still controversial, and the shunt procedure can cause several complications. In our institution, we used two types of modified arteriotomy suture techniques instead of using a shunt. Methods : In technique 1, to prevent ischemic complications, we sutured a third of the arteriotomy site from both ends after removing the plaque. Afterward, the unsutured middle third was isolated from the arterial lumen by placing a curved Satinsky clamp. And then, we opened all the clamped carotid arteries before finishing the suture. In technique 2, we sutured the arteriotomy site at the common carotid artery (CCA). We then placed a curved Satinsky clamp crossing from the sutured site to the carotid bifurcation, isolating the unsutured site at the internal carotid artery (ICA). After placing the Satinsky clamp, the CCA and external carotid artery (ECA) were opened to allow blood flow from CCA to ECA. By opening the ECA, ECA collateral flow via ECA-ICA anastomoses could help to reduce cerebral ischemia. Results : The modified suture methods can reduce the cerebral ischemia directly (technique 1) or via using collaterals (technique 2). The modified arteriotomy suture techniques are simple, safe, and applicable to almost all cases of CEA. Conclusion : Two modified arteriotomy suture techniques could reduce perioperative ischemic complications by reducing the cerebral ischemic time.
Reactive oxygen species (ROS) and nitrogen species (RNS) are involved in cellular signaling processes as a cause of oxidative stress. According to recent studies, ROS and RNS are important signaling molecules involved in pain transmission through spinal mechanisms. In this study, a patch clamp recording was used in spinal slices of rats to investigate the action mechanisms of $O_2{^{{\bullet}_-}}$ and NO on the excitability of substantia gelatinosa (SG) neuron. The application of xanthine and xanthine oxidase (X/XO) compound, a ROS donor, induced inward currents and increased the frequency of spontaneous excitatory postsynaptic currents (sEPSC) in slice preparation. The application of S-nitroso-N-acetyl-DL-penicillamine (SNAP), a RNS donor, also induced inward currents and increased the frequency of sEPSC. In a single cell preparation, X/XO and SNAP had no effect on the inward currents, revealing the involvement of presynaptic action. X/XO and SNAP induced a membrane depolarization in current clamp conditions which was significantly decreased by the addition of thapsigargin to an external calcium free solution for blocking synaptic transmission. Furthermore, X/XO and SNAP increased the frequency of action potentials evoked by depolarizing current pulses, suggesting the involvement of postsynaptic action. According to these results, it was estblished that elevated ROS and RNS in the spinal cord can sensitize the dorsal horn neurons via pre- and postsynaptic mechanisms. Therefore, ROS and RNS play similar roles in the regulation of the membrane excitability of SG neurons.
The whole-cell mode of the patch clamp technique was used to study $Ca^{2+}-activated\;Cl^-\;current$$(I_{Cl_{Ca}})$ in gastric antral myocytes. Extracellular application of caffeine evoked $Ca^{2+}-activated\;current$. In order to isolate the chloride current from background current, all known systems were blocked with specific blockers. The current-voltage relationship of caffeine-induced current showed outward rectification and it reversed at around $E_{Cl^-}$. The shift of reversal potential upon the alteration of external and internal chloride concentrations was well fitted with results which were calculated by the Nernst equation. Extracellular addition of N-phenylanthranilic acid and niflumic acid which are known anion channel blockers abolished the caffeine induced current. Intracellular application of a high concentration of EGTA also abolished this current. Application of c-AMP, c-GMP, heparin, or $AIF^-_4$ made no remarkable changes to this current. Sodium replacement with the impermeable cation N-methylglucamine or with $Cd^{2+}$ rarely affected this current. From the above results it is suggested that the caffeine induced current was a $Cl^-$ current and it was activated by intracellular $Ca^{2+}$.
The effects of $Zn^{2+}$ on spontaneous glutamate and GABA release were tested in mechanically dissociated rat CA3 pyramidal neurons which retained functional presynaptic nerve terminals. The spontaneous miniature excitatory and inhibitory postsynaptic currents (mEPSCs and mIPSCs, respectively) were pharmacologically isolated and recorded using whole-cell patch clamp technique under voltage-clamp conditions. $Zn^{2+}$ at a lower concentration $(30{\mu}M)$ increased GABAergic mIPSC frequency without affecting mIPSC amplitude, but it decreased both mIPSC frequency and amplitude at higher concentrations $({\ge}300{\mu}M)$. In contrast, $Zn^{2+}$ (3 to $100{\mu}M$) did not affect glutamatergic mEPSCs, although it slightly decreased both mIPSC frequency and amplitude at $300{\mu}M$ concentration. Facilitatory effect of $Zn^{2+}$ on GABAergic mIPSC frequency was occluded either in $Ca^{2+}$-free external solution or in the presence of $100{\mu}M$ 4-aminopyridine, a non-selective $K^{+}$ channel blocker. The results suggest that $Zn^{2+}$ at lower concentrations depolarizes GABAergic nerve terminals by blocking $K^{+}$ channels and increases the probability of spontaneous GABA release. This $Zn^{2+}$-mediated modulation of spontaneous GABAergic transmission is likely to play an important role in the regulation of neuronal excitability within the hippocampal CA3 area.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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