본 연구는 체외에서 배양된 생쥐 완전탈출 배반포기배를 동결보존액 EFS35를 이용하여 초자화 동결하였을 때 체내발달의 적합성 여부를 조사하기 위해 실시하였다. 공시된 완전탈출 배반포기배($\theta$ 130$\mu\textrm{m}$)는 체내에서 생산된 전핵기 수정란을 5일 동안 체외배양하여 얻었으며, 10% ethylene glycol(EG)에 5분 노출한 후 EFS35(35% EG, 18% Ficoll, 0.3 M sucrose)에 30초 동안 노출하거나, 초자화 동결하였다. 융해 후, 재팽창이 이루어진 완전탈출 배반포기배는 가임신 3일된 대리모의 한쪽 또는 양쪽 자궁각(4~6개/자궁각)에 이식하였다. 대리모의 임신율과 착상율은 임신 15일재 외과적 해부로 판정하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 융해 30분 후, 완전탈출 배반포기배의 체외생존율은 노출군(65.5%)과 동결군(54.5%)간에 유의한 차이는 없었다. 또한, 체내발달율을 조사하였던 바, 착상율에 있어서 동결군(41.0%)과 대조군(58.5%)간에 유의한 차는 없었지만, 정상산자율에서는 동결군(24.0%)의 결과가 대조군(58.3%)보다 유의하게 낮게 나타났다(p<0.05). 이러한 결과는 EFS35를 이용한 완전탈출 배반포기배의 초자화 동결은 정상산자율은 감소하였지만, 완전탈출 배반포기배의 이용 효율성을 넓히는데 이용될 수 있다는 것을 알 수 있었다.
세리아 입자의 합성을 위하여 분무열분해 시 유기 첨가제인 EG(ethylene glycol)과 CA(citric acid)를 첨가하여 중공성 및 다공성을 갖는 $CeO_2$ 마이크로 크기의 입자를 제조하였으며 첨가량에 따른 특성을 비교하였다. 분무열분해과정, 후소성 및 볼밀링 과정을 적절히 조합하여 만든 6가지 경로에 의해 나노 크기의 세리아 입자를 합성하였다. 6가지 경로 중 EG 및 CA가 0.05M 첨가된 Ce(III)가 전구체 수용액을 이용하여 분무열분해${\rightarrow}$후소성${\rightarrow}$볼밀링${\rightarrow}$후소성의 경로에 의해 얻어진 $CeO_2$ 입자에 대해 TEM 분석으로 측정한 입자의 평균 크기 24 nm(편차=3.8 nm)는 Debye-Scherrer식에 의해 계산된 1차 입자의 크기(20 nm)와 가장 유사한 크기를 나타내었다. 제조된 나노입자분말의 형태적 및 구조적 특성을 알아보기 위하여 SEM(Scanning Electron Microscopy), XRD(X-Ray Diffractometer) 및 TEM(Transmission Electron Microscopy)을 통하여 특성을 분석하였다.
전도성 고분자로 주목을 받고 있는 poly(3,4-ethylenedioxythiophene)- polystyrene sulfonate (PEDOT/PSS)는 분산 용매에 따라서 전기적 특성이 변화한다. 본 논문에서는 고형으로 최근 시판되고 있는 PEDOT/PSS를 물, 에탄올 (EtOH), 에틸렌 글리콜 (EG) 및 디메틸설폭사이드 (DMSO)에 분산시킨 용액을 PET 필름 상에 코팅하여 표면 저항을 측정한 결과, EG 및 DMSO를 사용하였을 경우에 약 100배 정도 더 낮은 표면 저항치를 나타내었다. 코팅된 필름의 열적 특성 및 화학적 특성을 TGA 및 XPS로 분석한 결과, 용매에 따른 차이는 발견되지 않았다. 그러나 분산액 자체의 입도를 분석한 결과, EG 및 DMSO 용액에서는 $1-3{\mu}m$ 정도의 입자로 존재하였으나, 물에서는 $0.1{\mu}m$ 이하의 미세 입자로 존재하는 것을 확인할 수 있었다. 전기적 특성의 차이는 분산 상태에서의 PEDOT/PSS 입자 크기에 영향을 받는 것으로 판단된다.
The purpose of this study was to evaluate survival rates of vitrified mouse blastocysts in various vitrification solutions (cryoprotectants) and apparatuses. The mouse blastocysts were harvested from culture of mouse 2 cell embryo and were divided into three group (i) untreated (control); (ii) exposed to cryoprotectant agents; or (iii) cryopreserved by various vitrification apparatuses. Vitrification solutions are 40% ethylene glycol (EG) + 5.8 mg/mL ficoll + 0.5M sucrose (EFS solution), 3M glycerol + 3M EG (ES solution), 20% EG + 20% dimethyl sulfoxide (ED solution), 3M EG + 1.0 m sucrose (ES solution). Vitrification apparatuses consisted of 5 groups ; closed plastic straw (CPS), electron microscope (EM) grid, cryoloop, open pulled straw (OPS), and glass micropippete in plastic straw (GPS). The survival rates of control were 88.0%. The survival rates of exposed blastocysts in EFS, GE, ED, and ES solutions were 70.8%, 43.5% (P<0.01), 83.3% and 65.2%, respectively. The survival rates of vitrified blastocysts in CPS, EM grid, cryoloop, OPS and GPS were 56.5% (P< 0.01), 72.7%, 83.3%, 60.9% (P<0.05) and 54.2% (P<0.01), respectively. Among the vitrification solutions, the highest survival rate was seen in blastocysts vitrified in EG + DMSO (83.3%). The survival rate was not significantly different from that of the control (88%). Blastocysts cryopreserved with glycerol in all groups had an overall low survival rate of 43.5%. Survival rate of mouse blastocysts between vitrification apparatuses showed higher in cryoloop.
무촉매 또는 촉매 존재하 반응온도 $190{\sim}240^{\circ}C$에서 DMT와 EG간의 에스테르교환반응을 속도론적으로 살펴 보았다. 반응도는 반응기내에서 계외로 유출된 메탄올의 양을 측정함으로써 계산하였다. 이러한 계외로 유출되는 메탄올로 인한 반응물과 촉매량의 보정을 행하였다. 속도론적인 처리를 한 후 촉매농도, 몰비, 촉매종류, 그리고 온도 의존성에 대하여 살펴보았다. 촉매활성은 Ti>Zn>Sn>Sb의 순이었고 활성화에너지 값은 Zn>Ti>Sn>Sb 순으로 나타났다.
본 연구에서는 에틸렌 글리콜 기반의 ZnO 나노유체의 열전도도를 비정상열선법(Transient Hot Wire Method)를 이용하여 $10^{\circ}C$에서 $50^{\circ}C$까지 측정하였다. 에틸렌 글리콜 기반의 ZnO 나노유체는 전기선 폭발법을 사용하여 부피비 1%, 3%, 5.5%로 제작 되었으며, 투과전자현미경(Transmission Electron Microscope, TEM)을 이용하여 제작된 에틸렌 글리콜 기반의 ZnO 나노유체의 분산·부유 특성을 확인하였다. 열전도도 측정 결과 에틸렌 글리콜 기반의 ZnO 나노유체는 부피비에 따라 향상하였으며, 5.5%의 부피비에서 최대 26.5%의 열전도도 향상을 보였다. 측정 결과는 기존의 열전도도 예측 모델인 Maxwell 및 Hasselman & Johnson model 과 비교하였다.
소 미성숙 난자 (GV stage)의 동결에 중요한 영향을 미치는 평형시간과 동결속도가 융해후 생존율 및 배발달율에 미치는 영향을 알아보기 위하여 미성숙 난자의 동결 융해후 체외성숙, 체외수정 및 배반포 발달 능력을 알아보았다. 본 실험에 사용한 동결액의 조성은 침투성 보호제(Ethylene glycol, EG)와 비 침투성 보호제(Ficoll ; F, polyvinylpyrrolidone; PVP, Sucrose; S, Trehalose ; T)를 혼합하여 네가지 조성의 동결액을 준비하였다. 즉EFT: 10% EG + 5% F + 0.05M T, EFS: 10% EG + 5% F + 0.05M S, EPT: 10% EG + 5% P + 0.05M T, EPS: 10% EG + 5% P + 0.05M S이다. 네가지 동격액 (EFT, EFS, EPT, EPS)을 이용하여 미성숙 소 난자 (GV stage)의 최적 평형 시간을 알아보기 위하여 각각 10, 15, 20분의 평형후 동결 응해하였다(실험 1). EPT액에서 15분의 평형시간이 가장 좋은 생존율을 나타내었다(83.05%). 동결 속도가 생존율에 미치는 영향을 알아보기 위하여 각각 17$^{\circ}C$, $0^{\circ}C$ 및 -6$^{\circ}C$로 동결 속도를 달리 설정하여 동결 융해를 실시하였다(실험 2). 융해후 생존율은 대부분 $0^{\circ}C$로 시작하는 동결속도에서 가장 좋은 성적을 나타내었다. 즉 EFT, EPT, EPS에서 각각 78.1, 73.7, 74.7%의 생존율을 나타내었다. 동결융해 하지 않은 신선란과 동결 응해한 미성숙 난자의 핵 성숙율은 각각 87.2%와 62.3%가 metaphase II로 발달하였다. 동결 응해 미성숙 난자의 IVM, IVF후 난분할율은 EFT, EFS, EPT 그리고 EPS에서 각각 32.57, 23.21, 38.39 그리고 21.33%로 EPT에서 가장 높았으나 유의차는 없었다. 배반포 발달율도 각각 2.86, 3.57, 4.46 그리고 0.47%로서 유의적인 차이를 보이지 않았다. 동결융해 미성숙 난자의 IVM, IVF후 TCM199와 CR-1aa배양액을 이용하여 소 난관상피세포(BOEC)와 공배양 한 결과 배양액의 종류에 따라 난분할율과 배반포 발달율에서는 차이를 보이지 않았다. 또한 미성숙 소 난자의 동결 융해후 얻은 배반포 수정란을 자연발정 Holstein 수란우에 7일째 비외과적으로 이식하였다. 6두에 9개의 수정란을 이식하여 2두가 임신이 확인되었으나 1두는 45일경 유산되었고, 나머지 1두는 장기재태로 분만을 유도하였으나 사산되었다.
최근에 알칼리막연료전지의 막전극접합체에서 이오노머에 의한 촉매 피독에 대한 연구 결과들이 보고되고 있다. 본 연구에서는 이를 해결하기 위해서 전극 제조 시에 사용되는 유기용매의 성분을 조절하여 막전극접합체의 성능을 향상시키고자 하였다. Fuma-Tech사의 상용 이오노머를 사용하여 N-Methyl-2-pyrrolidone (NMP)와 Ethylene glycol (EG)를 이용한 4가지의 혼합용매를 제조하였다. 혼합용액을 이용하여 제조된 캐소드 전극은 NMP기반의 상용 이오노머에 비해서 약 36%의 향상된 분극성능을 나타내었다. 이것은 용매의 종류에 따른 이오노머의 분산성 차이에 따른 결과로 추측되며 비균일성 분포의 이오노머가 전극의 성능을 향상시키는 것으로 관찰되었다. 이에 관한 원인분석을 위해서 막전극 접합체의 고주파 저항, 내부저항 보정 분극곡선, Tafel 기울기, Mass activity 및 임피던스 분광법을 사용하여 특성 분석을 실시하였다. 이오노머의 비용매의 비율 증가에 따라서 캐소드 전극 성능이 개선되는 것을 확인하였고, 이것은 이오노머의 입도 분포에 따라서 촉매의 피독이 감소되는 결과로 판단된다.
목적: 유리화 동결액의 조성조절과 냉각속도 증진을 통한 동결보호제의 농도를 낮추는 전략을 통해 세포에 미치는 독성을 감소시켜 유리화 동결 및 융해 후 생쥐 배아의 생존율 및 발생률을 증진시키고, 궁극적으로 배아의 유리화 동결법을 개선하고자 하였다. 연구방법: 생쥐 배아와 포배기를 그리드를 이용한 유리화 동결법을 이용하여 동결/융해하였다. 동결액 내 ethylene glycol와 dimethylsulphoxide (DMSO)의 농도와 당의 농도를 조절하여 생쥐 배아의 융해 후 생존율과 발생률을 관찰하였고, 냉각속도의 증가와 동결억제제의 농도와의 상관관계를 포배기의 융해 후 생존율과 발생률에 따라 비교하였다. 또한 융해 후 배아를 대리모에 이식하여 산자를 생산함으로 냉각속도의 효율성을 알아보았다. 결과: EG를 단독으로 사용한 동결보존액 보다는 DMSO와 혼합된 동결보존액의 사용이 보다 유리하다는 결과를 얻을 수 있었다. 슬러시 질소에 의한 냉각속도의 증가가 동결보존의 대상의 상해를 줄여 유리화 동결의 효율성을 증진시키는 것으로 생각된다. 결론: 혼합된 동결보호제를 사용하였을 때 생쥐 배아의 유리화 동결 후 생존과 발생률이 증진되었다. 슬러시 질소를 이용한 유리화 동결의 도입은 냉각속도의 증가를 통해 기존 유리화 동결방법의 효율을 증진시켜 생존율과 융해후 발생률, 임신율 증진에 기여하였다. 또한 냉각속도의 증진은 유리화 동결의 필수요건인 고농도의 동결억제제에 대한 노출을 감소시킬 수 있었다. 이러한 노력은 생식력의 보전을 위한 유리화 동결법의 효율 향상에 기여할 것이다.
Different factors may affect the sensitivity of porcine oocytes during cryopreservation. The effect of two methods (cooling and vitrification), four cryoprotectants [glycerol (GLY), 1, 2-propanediol (PROH), dimethyl sulfoxide (DMSO) or ethylene glycol (EG)] and two vitrification media (1 M sucrose (SUC)+8 M EG; 8 M EG) on the developmental capacity of porcine oocytes at the germinal vesicle (GV) stage or after IVM at the metaphase II (M II) stage were examined. Survival was assessed by FDA staining, maturation and cleavage following IVF and IVC. A toxicity test for different cryoprotectants (GLY, PROH, DMSO, EG) was conducted at room temperature before cooling. GV and M II-oocytes were equilibrated stepwise in 1.5 M cryoprotectant and diluted out in sucrose. The survival rate of GV-oocytes in the GLY group was significantly lower (82%, p<0.01) than that of the other group (92 to 95%). The EG group achieved a significantly higher maturation rate (84%, p<0.05) but a lower cleavage rate (34%, p<0.01) than the DMSO group and the controls. For M II-oocytes, the survival rates for all groups were 95 to 99% and the cleavage rate of the GLY group was lower than the PROH-group (21 vs 43%, p<0.01). After cooling to $10^{\circ}C$, the survival rates of GV-oocytes in the cryoprotectant groups were 34 to 51%, however, the maturation rates of these oocytes were low (1%) and none developed after IVF. For M II-oocytes, the EG group showed a significantly higher survival rate than those of the other cryoprotectant groups (40% vs 23-26%, p<0.05) and the cleavage rates of PROH, DMSO and EG group reached only 1 to 2%. For a toxicity test of different vitrification media, GV and M II-oocytes were equilibrated stepwise in 100% 8 M EG (group 1) and 1 M SUC + 8 M EG (group 2) or equilibrated in sucrose and then in 8 M EG (SUC+8 M EG, group 3). For GV-oocytes, the survival, maturation and cleavage rates of Group 1 were significantly lower than those in group 2, 3 and control group (p<0.05). For M II-oocytes, there were no differences in survival, maturation and cleavage rates between groups. After vitrification, the survival rates of GV and M II-oocytes in group 2 and 3 were similarly low (4-9%) and none of them matured nor cleaved after in vitro maturation, fertilization and culture. In conclusion, porcine GV and M II-oocytes do not seem to be damaged by a variety of cryoprotectants tested, but will succumb to a temperature decrease to $10^{\circ}C$ or to the process of vitrification, regardless of the cryoprotectant used.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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