Osteoporosis is recognized as one of the major hormonal deficiency diseases, especially in menopausal women and the elderly. When the estrogen level is reduced in the body, local factors, which are known to be related with bone resorption, are increased and promote osteoclastogenesis. In our previous study, we validated the estrogenicity of silkworm pupa. In this study, we investigated the effect of silkworm pupa extract (SPE) on the function of osteoblastic MC3T3-E1 cells. SPE (10 and $50\;{\mu}g/mL$) significantly elevated cell viability, alkaline phosphatase (ALP) activity, and collagen content in the cells. The effect of SPE ($50\;{\mu}g/mL$) in increasing cell viability, ALP activity, and collagen content was completely inhibited by the presence of $10^{-6}\;M$ of cycloheximide and $10^{-6}\;M$ of tamoxifen, suggesting that SPE's effect results from a newly synthesized, protein component and that it might be partly involved in estrogen action. Furthermore, we examined the effect of SPE on the $H_2O_2-induced$ apoptosis and production of local factors in osteoblasts. Treatment with SPE ($50\;{\mu}g/mL$) decreased the 0.2 mM $H_2O_2-induced$ apoptosis and the production of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-6 and nitric oxide (NO) in osteoblasts. Our data indicate that the enhancement of osteoblast function by silkworm pupa may prevent osteoporosis and inflammatory bone diseases.
The major protocol features of the rodent uterotrophic assay have been evaluated using a range of reference chemicals. The protocol variables considered include the selection of the test species and route of chemical administration, the age of the test animals, the maintenance diet used, and the specificity of the assay for estrogens. The rodents were ovariectomized under general anesthesia via bilateral flank incisions and randomly assigned to groups of 5 animals. Chemicals were DEHP, DBP, BPA and NP, were injected sc once daily with combinations of chemicals treatments for 3 days. In the results, the reported estrogenic chemicals DEHP and DBP were both negative in the single dose treatments. But, in the combinations of chemicals treatments, DEHP and DBP increased in bud number of mammary gland. Treatment of ovariectomized mice with combinations of other chemicals resulted in uterine and vaginal hyperplasia. The additive estrogenic effects were seen with the combinations of $17{\beta}$-Bestradiol and DBP treatment. the competitive estrogenic effects were seen with the combinations of $17{\beta}$-Bestradiol and nonylphenol, $17{\beta}$-Bestradiol and bisphenol-A treatments. These results offers a sysmatic and mechanistically informative approach to assessing estrogenicity. it provides a useful profile of activity using a reasonable amount of resources and is compatible with the study of individual chemicals as well as the investigation of interactions among combinations of chemicals. The results described illustrate the intrinsic complexity of evaluating chemicals for estrogenic activities and conform the need for rigorous attention to experimental design and criteria for assessing estrogenic activity.
Dietary flavonoids have attracted a great deal of attention as agents for preventing estrogen-related diseases, such as postmenopausal symptoms, and for reducing the risk of estrogen-dependent cancer. Kaempferol is one of the most commonly found dietary phytoestrogen. The aim of this study was to investigate the estrogenic and/or antiestrogenic effect of kaempferol, which can confirm its potency as a preventive agent against estrogen-related diseases. Kaempferol has both estrogenic and antiestrogenic activity, which are biphasic response on estrogen receptor. The estrogenic activity of kaempferol induced via ER-mediated pathway depending on $E_2$ concentration $(\leq\;10^{-12}M)$. Kaempferol $(10^{-5}\;M)$ also caused antiproliferative effect on MCF-7 cell in the presence of $E_2\;(10^{-11}\;M)$ and restored to the addition of excess $E_2\;(10^{-7}\;M)$, which confirms that antiproliferation of kaempferol was induced via ER-dependent pathway. However, at $10^{-4}\;M$, concentration higher than the concentrations at which the estrogenic effects of kaempferol are detected $(10^{-5}\;M)$, kaempferol induced strong antiproliferative effect, but were unaffected by the addition of excess $E_2\;(10^{-7}\;M)$ indicating that kaempferol exerts antiproliferation via ER-independent pathway. In particular, kaempferol blocked the focus formation induced by $E_2$, which confirms that kaempferol might inhibit the malignant transformation caused by estrogens. Therefore, we suggested that kaempferol might regulate a suitable level of estrogenic activity in the body and is expected to have potential beneficial effects in preventing estrogen imbalance diseases (breast cancer, osteoporosis, cardiovascular disease and etc.).
환경호르몬 물질의 생체내에서의 상호작용에 의한 상자 또는 상승 작용을 알아보기 위하여 환경호르몬 물질들을 조합하여 마우스에 처치한 후 생체내에서 생식기의 변화 정도를 조직병리학적으로 관찰하였다. 암컷 ICR마우스에 난소적출술을 실시하고 2주 후에 DEHP, DBP, BPA의 환경호르몬 물질을 단독 또는 두개씩 조합하여 마우스에 피하로 주입하였다. 육안적인 변화에서는 모든 군에서 이상이 관찰 되지 않았으며, 부검 후 자궁의 무게를 측정한 결과에 있어서도 유의적인 변화를 관찰할 수 없었으나, 자궁 내 fluid존재에 있어서는 E2 단독 투여 군과 E2와 함께 투여한 모든 그룹(E2+DEHP, E2+DBP, E2+BPA)에서 관찰되었다. 조직병리학적인 관찰에 있어서는.자궁상피세포, 질 상피세포, 유선의 변화 그리고 난관 직경의 변화를 관찰하였다. 그 결과 민감도에 있어서 가장 유의적인 변화를 보인 항목은 질 상피세포의 변화였으며, 환경호르몬 물질을 두개씩 혼합하여 처치한 그룹에 있어 단독으로 처치한 그룹과 비교 시 변화의 정도가 심한 것이 일부 관찰 되었으나 통계학적으로 유의성을 가지고 있다고 결론을 내리기 는 힘들었다. 결론적으로 환경호르몬물질간의 생체내에서 상가 혹은 상승작용에 대한 명확한 결과는 도출할 수 없었으나, 환경호르몬물질이 생체내 작용하는 데에 있어서 서로 간에 상승작용을 할 수 있다는 가능성은 충분한 것으로 판단되어진다.
Objectives: Phthalates, which are widely used as plasticizers, have been recognized as endocrine disruptors. In the present study, we provided information on the regulation of these chemicals and summarized the information available on their detection and toxicity in children's products and those of their alternatives. Methods: The regulatory frameworks related to phthalates in children's products in Korea, the United States (US), and the European Union (EU) were compared. Data on the detection concentration of 16 phthalates and seven phthalate alternatives that could be used in polyvinyl chloride (PVC) plastic products for children as well as on their toxicity classification and endocrine disruption toxicity were collected from the literature. Results: Korea adopted US and EU chemical standards for six phthalates (DEHP, BBP, DBP, DINP, DIDP, and DNOP), but not others (e.g., DIBP, DPP, DHP, and DCHP). Among the ten phthalates and seven substitutes for which regulatory standards were not determined, DIBP, DHP, DEHA, DIBA, DINA, and DEHT were detected in children's products made from PVC plastic. DIBP and DHP, which have a reproductive toxicity classification of 1B, were frequently detected in PVC toys. The reproductive toxicity, estrogenicity, and anti-androgenic activity of the unregulated phthalates and their alternatives have been reported in diverse in vitro and in vivo assays. Conclusion: The use of unregulated phthalates and their substitutes in children's products is increasing. Further monitoring and toxicological information on phthalate alternatives is required to develop proper management plans.
Background: Organic ultraviolet (UV) filters are widely used in sunscreen products and have been identified as an emerging contaminant. Organic UV filters co-exist with multiple components, but their mixture toxicity remains largely unknown. Objectives: We investigated the toxicity of single and binary mixtures of commonly used UV-filters using the human adrenocarcinoma (H295R) cell line. Methods: After exposure to non-cytotoxic concentrations of avobenzone (AVO), homosalate (HS), octisalate (OS), octinoxate (OMC), and octocrylene (OC), the levels of testosterone (T) and 17β-estradiol (E2) were measured. The median effective concentration (EC50) values for the E2 of the individual substances were used to determine the mixture effect of four binary combinations: OMC+AVB, OMC+HS, OMC+OS, and OMC+OC. The synergistic, additive, and antagonistic effects of the mixture were determined by calculating toxic units (TU). To examine the mechanism of mixture toxicity, eight genes involved in steroidogenesis were analyzed using the real-time polymerase chain reaction. Results: The significant increase in E2 in H295R cells exposed to AVO, HS, OS, OMC, and OC suggest an estrogenic effect of the tested UV-filters. A significant decrease in T was observed in cells exposed to HS and OS. EC50 values for E2 increase were 105 nM for AVO, 110 nM for HS, 120 nM for OS, 55 nM for OMC, and 80 nM for OC. Both binary mixtures consisting of OMC+HS and OMC+OS have synergistic effects. Conclusions: Our results showed that five types of UV-filter substances increase E2 in H295R cells. We examined the mixture toxicity in terms of increased estrogenicity and confirmed that E2 significantly increased when OMC was mixed with a salicylate-based UV-filters. These findings highlight the importance of determining the impact of UV filter mixtures.
미성숙 흰쥐에서 누에 번데기 수용성과 지용성 추출 물 및 한약재가 첨가된 누에 번데기 수용성 추출물을 투여하여 에스트로젠 증식 관련 인자의 발현을 확인한 결과는 다음과 같다. 미성숙 흰쥐에서 누에 번데기 수용성 추출물(KW), 누에 번데기 지용성 추출물(KO) 및 KW에 하수오, 인삼, 울금을 7:1:1:1의 비율로 첨가한 복합체(MK)를 각각 100 mg/kg와 500 mg/kg의 농도로 30일간 경구투여한 결과 체중은 유의적인 변화를 나타내지 않았다. 체중에 대한 자궁의 무게는 정상 대조군에 대하여 실험군에서 KW500을 제외하고는 모두 유의적인 증가를 나타내었으며 K0500, KW100, MK100 순으로 각각 $0.49\%,\;0.48\%,\;0.44\%$의 높은 값을 나타내었다. 체중에 대한 난소의 무게는 정상 대조군에 대해 MK군을 제외하고 모두 유의적인 변화를 보였으며 KW100군이 가장 높은 값을 나타내었다. 미성숙 흰쥐의 혈청 내 AST와 ALT 활성 및 creatinine 농도는 모두 군 간에 유의적인 변화는 보이지 않았다. 즉 모든시료가 간과 신장에 독성을 나타내지 않은 결과이다. $ER\alpha$와 $ER\beta$의 발현을 densitometer로 수치화하여 정상대조군을 기준으로 발현의 증가와 억제를 백분율로 표시한 결과 KW100(100 mg/kg)와 MK500(500 mg/kg) 군이 $ER\alpha$의 발현을 유의적으로 증가시켰으며 KW100(100 mg/kg), KW500(500 mg/kg), 및 MK100(100 mg/kg)군이 $ER\beta$의 발현을 유의적으로 증가시켰다. 따라서 누에 번데기 수용성 추출물 및 한약재(인삼, 하수오, 울금)를 첨가한 누에 번데기 수용성 추출물이 생체에서 높은 에스트로젠 활성을 가지고 있는 것으로 사료된다.
약용식물내 에스트로겐성과 항-에스트로겐성을 조사하고 항암인자를 발견하기 위하여, 본 연구는 에탄올추출로 제조된 9종류의 한국산 약용식물에 대하여 재조합효모와 MCF-7 사람유방암세포주를 이용하여 스크리닝하고 비교하였다. 재조합효모를 이용한 실험결과, 7종류의 약용식물에서 에스트로겐성이 나타났고, 4종류에서 안드로겐성이 나타났다. 또한 MCF-7 사람유방암세포주를 이용한 실험결과, 8종류의 추출물이 MCF-7 세포의 성장을 억제하는 것으로 확인되었으며 비스페놀 A와 동시 처치한 경우에도 유의적으로 억제하는 것으로 나타났다. 또한 Glycyrrhiza uralensis, Cassia tora, Syringa velutina, Zingiber officinale, Malva verticillata, Panax ginseng C.A. Meyer는 식물성 에스트로겐으로서 에스트로겐에 양성인 사람유방암세포의 증식을 유의적으로 억제시키는 흥미로운 결과가 제시되었다. 따라서 이번 연구는 한국산 약용식물이 식물성 에스트로겐과 항암인자로서 이용될 수 있으며, 에스트로겐의 활성을 조사하는데 유용하게 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구는 bisphenol A의 실제 식품을 통한 사람의 노출농도에서 에스트로젠 효과를 알아보기 위하여 사람의 유방암 세포인 MCF-7와 난소를 적출한 무흉선 마우스를 이용하여 살펴보았다. MCF-7세포를 이용한 genistein 과 bisphenol A가 용매대조군과 무처치대조군에 비하여 genistein(10nM, 100nM, 1uM, 10uM)과 bisphenol A(2ng/ml, 4ng/ml, 8ng/ml, 16ng/ml)의 세포 성장촉진 효과가 용량의 증가에 따라 증가하는 경향을 보였다. genistein의 경우 1uM을 정점으로 세포성장촉진이 극에 달하다가 10uM 투여군에서 1uMxndurns에 비하여 약 40% 정도 세포성장이 감소하였으나 대조군에 비하여 여전히 세포의 성장을 촉진하였다. 이러한 결과는 bisphenol A와 genistein이 에스트로젠과 같이 에스트로젠 수용체와 결합하는 경로로 MCF-7세포의 성장을 촉진한 것으로 생각된다. 따라서 이러한 결과를 확인하기 위하여, 에스트로젠 의존적으로 유전자가 발현되는 유전자 중의 하나인 pS2 유전자의 발현을 살펴보았다. Genistein과 bispheno A가 pS2 유전자의 발현을 유도하는 것이 northern blot 분석에 의하여 관찰되었다. 또한, 21일령의 무흉선 마이스를 이용한 in vivo 연구에서, 무처치 대조군에 비하여 genistein과 bisphenol A를 투여한 마우스 군에서 유선의 발달과 둥-bud 의 형성이 유의하게 증가됨이 관찰되었다(p<0.05). 결론적으로, bispheno A와 genistein이 MCF-7 세포에서 에스트로젠 효과가 매우 낮은 농도에서도 나타날 수 있다는 것은 식품위생상 큰 의미를 갖고 있으며, 이러한 물질들이 실제 사람에서의 위해성 특히 성장기 유아의 위해성에 대하여 좀더 면밀히 연구되어야 할 것이다.광에 따른 입자의 분쇄보다는 마광시 구형의 입자가 소성변형으로 인해 flake형상으로 변하여 체질입도분석시 입도의 증가를 초래하였으며, 반면 철산화물은 마광에 따른 입자의 미세화가 발생함을 볼 수 있었다. 나. 철분구 외수 실험 1) 광양의 dust를 40분간 마광하여 심강(분급)실험을 행했을 때 Fe 99.17% 품위 철분말을 37.8% 회수할 수 있었다. 2) 재항의 C/F dust를 40분간 마광하여 심강(분급)실험을 행했을 때 Fe 98.38% 품위의 철분말을 44.42% 회수할 수 있었다. 3) 70 gauss 자석을 사용하여 자력선별을 행했을 때 +65-200 mesh 사이에서 Fe 품위 98% 이상의 철분말을 회수 할 수 있으나 회수율(14%)이 낮다.0^{\circ}C$의 경우 20시간(20時間)에 가장 색도(色度)가 높아 갈변반응속도(褐變反應速度)가 0.2로 나타났다. the esophageal mucous cells pf Bryzoichthys lysimus contained small amount of neutral mucin, while on the other hand a feww mucous cells contained small amount of neutral mucin and minimal amount of sialomucin. But the esophageal mucous cells of Takifugu pardalis contained considerable amount of neutral mucin only.분해가 더욱 촉진되었으며, 30℃에서 교반 처리를 행한 경우가 10℃에서 교반 처리를 행한 경우 보다 지방분해가 더욱 촉진되었다. 산양유 원유는 30℃에서 교반 처리 시간이 연장되어도 지방분해는 뚜렷한 증가를 나타내지 않았다.와 표준체중군 여자에게서 가장 높게 나타났다. 5. 남자의 53.9%, 여자의 83.2%가 체중 조절에 관심이 있다고
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[게시일 2004년 10월 1일]
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