Pronase 등 8개의 단백분해효소를 사용하여 말쥐치를 가수분해시 생성되는 펩타이드의 양을 측정한 결과, bromelain과 neutrase에 의한 가수분해물의 펩타이드 생성량은 4시간 가수분해시 6.13 mg/ml와 6.01 mg/ml로 높은 생성량을 보였으며, 유리아미노산의 생성량은 4시간 가수분해시 alcalase에 의한 가수분해물이 4.20 mg/ml로 높은 유리 아미노산의 생성량을 보였다. 가수분해도를 측정한 결과, 4시간 가수분해시 esp/sav와 alcalase의 가수분해물은 88.9%와 86.2%의 비교적 높은 가수분해도를 보였다. 또한 핵산관련 물질은 5'-GMP가 다른 핵산 관련물질에 비해 높은 생성량을 보였다. 가수분해물의 펩타이드의 평균길이는 $8.5{\sim}14.5$로 bromelain에 의한 가수분해물이 가장 짧은 펩타이드 길이를 가진 반면, neutrase에 의한 가수분해물은 14.5로 가장 긴 펩타이드로 구성되었다.
BACGROUND/OBJECTIVES: In this randomized, placebo-controlled, double-blind study, we evaluated the antihypertensive effects of enzymatic hydrolysate from Styela clava flesh tissue in patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) and hypertension. SUBJECTS/METHODS: S. clava flesh tissue hydrolysate (SFTH) (n = 34) and placebo (n = 22) were randomly allocated to the study subjects. Each subject ingested two test capsules (500 mg) containing powdered SFTH (SFTH group) or placebo capsules (placebo group) during four weeks. RESULTS: In the SFTH group, systolic and diastolic blood pressure decreased significantly 4 weeks after ingestion by 9.9 mmHg (P < 0.01) and 7.8 mmHg (P < 0.01), respectively. In addition, the SFTH group exhibited a significant decrease in hemoglobin $A_{1c}$ with a tendency toward improvement in homeostasis model assessment of insulin resistance, triglyceride, apolipoprotein B and plasma insulin levels after 4 weeks. No adverse effects were observed in other indexes, including biochemical and hematological parameters in both groups. CONCLUSION: The results of our study suggested that SFTH exerts a regulatory, antihypertensive effect in patients with T2DM and hypertension.
In this study, we attempted to enrich cyclo-His-Pro (CHP) using enzymatic hydrolysis of yeast and to evaluate the functionality of yeast hydrolysate (YH)-enriched CHP. Flavourzyme offered a better performance in enhancing CHP content than other proteases. The CHP enrichment conditions were optimized as follows: addition of 1% Flavourzyme, 48-h incubation at 60oC, and pH 6.0. The CHP content significantly increased by 20-fold after ultra-filtration (UF). Maximal CHP translation was obtained after heating for 8 h at 50oC and pH 7.0. YH showed poor foaming capacity between pH 3.0 to 9.0. The emulsifying activities of YHs were slightly higher at near acidic pH. Increase in heating temperature and time resulted in decreased CHP content. The results indicate that YH is more heat stable after UF. Therefore, the CHP in YH after UF can be used as a food additive with physiological CHP activity and high heat stability.
Enzymatic hydrolysate of porphyran from Porphyra yezoensis was prepared by treatment with ${\beta}$-agarase. The hydrolysate was fractioned into molecular sizes of <3, 3-30, and 30-300 kDa using an ultrafiltration membrane. The membrane fractions were further separated into neutral and anionic fractions using Dowex $1{\times}8$ ion exchange chromatography. After hydrolysis of porphyran with ${\beta}$-agarase, 23.2% of the starting porphyran was recovered as a neutral fraction of low-molecular weight (<3 kDa), and 28.9% remained as an enzyme-resistant anionic fraction of high molecular weight (>300 kDa). Desulfation of porphyran and $^{13}C$-NMR analysis of the anionic fraction of low molecular weight (<3 kDa) showed that the anionic fraction has a backbone consisting of 3-linked ${\beta}$-D-galactose units alternating with either 4-linked a-L-galactose 6-sulfate or 3, 6-anhydro-a-L-galactose units. These results indicate that porphryan is a copolymer of two moieties, about 25% of which are composed of neoagarose moieties and 75% as anionic moieties.
지충이 물 추출물을 알긴산 분해능을 가진 V. crassostreae PKA 1002 유래 조효소액을 이용하여 가수분해시킨 후 pH, 색도 및 항산화 활성의 변화를 살펴보았다. 지충이 물 추출물과 조효소액을 30℃에서 0, 3, 6, 12 및 24시간 반응시켜 환원당 생성능과 점도의 변화를 살펴본 결과, 환원당 생성능은 반응 6시간에서 357.82 μg/ml로 가장 높아졌으며, 점도는 0시간에서 1.57 cp에서 반응 6시간에서 1.22 cP로 가장 낮아져 6시간에서 최적분해 조건임을 확인하였다. 최적 조건에서 pH 및 색도는 지충이 물 추출물과 효소분해물이 각각 6.11과 6.15로 유의적인 차이를 보이지 않았으며, 색도는 효소분해물이 물 추출물보다 명도는 감소하고 적색도 및 황색도는 모두 증가하는 것을 확인하였다. TPC 함량은 지충이물 추출물과 효소분해물이 2.54 및 2.55 mg/g으로 유의적인 차이를 보이지 않았다. DPPH 라디칼 소거능 측정 결과, 지충이 효소분해물이 0.05−5 mg/ml 농도에서 물 추출물보다 낮은 DPPH 라디칼 소거능을 보였다. 반면, chelating effect 측정 결과, 0.05−5 mg/ml 농도에서 효소분해물의 활성이 물 추출물보다 유의적으로 높아짐을 확인하였다. Reducing power 측정 결과, 0.005−1 mg/ml 농도에서 지충이 물 추출물과 효소분해물간 유의적인 차이를 보이지 않았다. 따라서 지충이 효소분해물은 지충이 물 추출물보다 금속봉쇄력의 활성이 증진됨을 확인하여, 주로 DPPH 라디칼 소거능에서 항산화 활성을 나타낸 지충이 물 추출물과 달리 금속봉쇄력작용에 의해 항산화 활성을 나타냄을 확인하였다.
In order to utilize marine processing waste which would normally be discarded, cod liver protein was hydrolysed by ${\alpha}$-chymotrysin, and the hydrolysate was investigated for the new angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitor. Thy hydrolysate was separated into three major types, with molecular weight cut-off (MWCO) values less than 10 kDa, 5 kDa and 1 kDa of ultrafiltration membranes, respectively. ACE inhibitory peptides were isolated from the fractions passed through MWCO 1 kDa membrane, and purified by using ion-exchange chromatography on a SP-Sephadex C-25 column, gel filtration on a Sephadex G-15 column, and HPLC on an ODS column. The purity was identified with capillary electrophoresis. The amino acid sequences of two peptides were Met-Ile-Pro-Pro-Tyr-Tyr (IC50=10.9 ${\mu}$M) and Gly-Leu-Arg-Asn-Gly-Ile (IC50=35.0 ${\mu}$M)
본 연구에서는 농산부산물인 배추 겉잎의 이용성을 증진시키기 위하여 배추의 불용성 식이섬유인 hemicellulose를 분획한 후 효소 처리하여 수용성 식이섬유를 함유한 가수분해물을 생산하고자 하였다. 이를 위해 다양한 pH, 온도, 기질농도 및 효소농도에서 hemicellulose 분획을 효소 처리한 후 환원당 함량을 측정한 결과, pH 5.0, $40^{\circ}C$, 효소농도 45 unit (Shearzyme plus), 21 unit Viscozyme L)의 조건으로 가수분해 했을 때 가장 높은 분해율을 나타내었다. 선정된 조건으로 72시간 가수분해하여 수율을 측정한 결과, Shearzyme plus 및 Viscozyme L 처리 시 각각 22.64%와 24.73%의 수율을 보였다. 또한 알코올 불용성 식이섬유의 겔크로마토그래피에 의한 분자량 분포를 확인한 결과, Shearzyme plus 및 Viscozyme L에 의해 생성된 식이섬유는 반응 시간이 증가함에 따라 저분자화 되는 것을 확인 할 수 있었다. 이상의 결과에서 배추 부산물 hemicellulose 분획을 효소로 가수분해함으로써 불용성 식이섬유가 저분자화 되어 수용성 식이섬유로 전환됨을 확인하였으며, 생산된 식이섬유소 함유 가수분해물은 기능성 식품 및 식품가공 분야에 다양하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
The chemical and rheological properties of natural and enzymatically hydrolyzed porphyran isolated from Pyropia yezoensis were investigated. The enzymatic hydrolysate was prepared by hydrolysis of porphyran using ${\beta}$-agarase followed by fractionation based on molecular weight (>300 kDa (Fr-1), 100-300 kDa (Fr-2), 10-100 kDa (Fr-3) and 1-10 kDa (Fr-4) using an ultrafiltration membrane. Each hydrolysate fraction consisted mainly of galactose (42.7-57.5%), 3,6-anhydro galactose (6.5-15.1%) and ester sulfate (8.6-14.1%). The sulfate content of the enzymatically hydrolyzed fractions decreased with an increase in molecular weight, whereas the 3,6-anhydro galactose content increased significantly. The rheological behavior of porphyran and enzymatically hydrolyzed porphyran solutions demonstrated a pseudoplastic behavior, which agrees with the Herschel-Bulkley model. The effect of temperature on the viscosity of the porphyrans and hydolysate fractions were measured and modeled using the Arrhenius equation. The activation energy of the porphyrans and enzymatically hydrolyzed porphyran (Fr-1) increased from 12.30 to 20.29 kJ/mol and 9.06 to 23.84 kJ/mol, respectively with increasing concentrations from 3% to 7%. These data indicate that the extent of the apparent viscosity of porphyran and enzymatically hydrolyzed porphyran are influenced by both temperature and concentration.
굴 가수분해물의 이취 제거를 위한 가수분해 및 발효의 최적 조건과 이의 항산화 효과를 검토하였다. 이취 제거를 위한 굴 가수분해물의 최적 추출 조건은 Neutrase를 이용하여 E/S 3.3%, $50^{\circ}C$, 8.3시간이었으며, 발효 공정은 $24^{\circ}C$에서 glucose 0.5%와 Saccharomyces cerevisiae를 5% 접종하였다. 굴 가수분해 발효물의 구성 아미노산은 25.7%에 해당하였으며, Glu, Asp, Lys, Leu, Arg, Gly 및 Ala이 전체의 61.2%를 차지하였다. 유리 아미노산 조성의 경우 Leu, Ala, Phe, Val 및 Tau의 순으로 높게 나타났다. 또한 무기질 함량은 Na, P, K, Zn, Fe이 높게 나타났으며, 정상 간세포주인 Chang cell에 대한 독성은 나타나지 않았다. 이상의 결과로 미루어 S. cerevisiae에 의해 수산물의 이미취를 masking 할 수 있으나, 기능성 원료로 사용하기 위해 최종 제품의 카드뮴 함량을 저감시킬 대책이 필요하다.
Dissolving part of xylan and lignin in lignocellulosic biomass by base can be used as pretreatment technique. Cork oak was pretreated with sodium hydroxide solution and the pretreatment effects were evaluated with two critical factors - NaOH concentration and pretreatment temperature. Some of xylan and lignin were removed by base pretreatment. At $90^{\circ}C$ and 13% NaOH pretreatment, 22.0% of lignin and 78.8% of xylan removed by base treatment. Enzymatic hydrolysis of cork oak which was pretreated at higher temperature or concentration was further improved. After pretreatment of cork oak with 13% NaOH at $90^{\circ}C$, the conversion rate of cellulose to fermentable sugars were reached up to 91.3%. At ethanol fermentation with enzymatic hydrolysate from different pretreatment conditions, all enzymatic saccharification liquids were well fermented by Saccharomyces cerevisiae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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