Effects of enzymatic hydrolysis of polysaccharides with using three commercial mixed enzymes (Ultrazyme, Celluclast, Viscozyme) were investigated on supernatant ratio, solid yields and viscosity of sea mustard extracts. The result showed that enzymatic hydrolysis prior to extraction increased the solids concentration up to 27.3% and the solids yield up to 14.0%. However the supernatant ratio after centrifugation of the sea mustard suspension was rather reduced. The viscosity of the extracts was significantly increased during initial enzymatic hydrolysis.
The ground persimmon puree was treated with two kinds of commercial polysaccharide hydrolyzing enzymes (Viscozyme and Celluclast) in order to study their effects on the extraction yield, viscosity, color, titratable acidity and sugars. Hydrolysis with Viscozyme which has enzymatic activity of arabinase, cellulase, xylanase, hemicellulase and ${\beta}-glucanase$ significantly increased the extraction yield, L-value and reducing sugar and decreased in viscosity by treatment for 10 min at $50^{\circ}C$. The extraction yield of the juice was increased from 42.7% to 80% by Viscozyme while the Celluclast to 73.3%. On the other hand, the sensory properties of persimmon-like flavor, scarlet and orange color were greatly improved for the juice hydrolyzed with Viscozyme for 60 min.
Park, Mi-Ji;Kim, Yeon-Hee;Kim, Gun-Do;Nam, Soo-Wan
Journal of Life Science
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v.25
no.12
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pp.1393-1398
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2015
In this study, we investigated the extraction condition of alginate from Laminaria japonica, the enzymatic degradation of the extracted alginate, and the inhibitory activity of the degraded alginate on the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes. The optimal conditions for the efficient extraction, precipitation, and recovery of alginate from the brown seaweed L. japonica were 1% for Na2CO3 concentration, 80℃ for extraction temperature, and ethanol for precipitation solvent. In the enzymatic reaction for the production of low-molecular-weight alginate (LMWA) by using alginate lyase from Flavobacterium sp., the initial concentration of Laminaria alginate was 3%. The low-molecular-weight degree from alginate was independent with the enzyme concentration, and the optimal concentration of alginate lyase was found to be 5 unit/ml. Through the enzymatic reaction with 5 unit/ml of alginate lyase at 37℃ for 3 hr, the viscosity and molecular weight of LMWA were 4.5 cp and 307 kDa, respectively. Treatment with LMWA significantly suppressed the accumulation of lipid droplet and triglyceride in 3T3-L1 preadipocytes with a dose-dependent manner. Therefore, it seems that LMWA treatment could inhibit the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes. These results indicate that LMWA or the degraded alginate produced by alginate lyase enzyme can be useful for the development of anti-obesity biosubstances.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.9
no.2
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pp.550-555
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2008
An efficient production method of spirulina extract was developed by enzymatic treatment using proteolytic enzymes. The suitable dosage of Tunicase, a cell lytic enzyme, was used to be 2.0% (w/w). To maximize solid recovery and spirulina extraction (SE) index, which indicates nucleic acid-related substances content, the dosage of Alcalase, commercially available pretense, was found to be 1.0% (w/w). By simultaneous treatments using optimal dosages of Tunicase and Alcalase, the highest SE index and solid recovery were obtained. The SE index and solid recovery of simultaneous treatments were notably enhanced by 100% ($11.4%\;{\rightarrow}\;22.8%$) and 56% ($45.2%\;{\rightarrow}\;70.7%$), respectively, than those of the non-treated extracts.
Jahan, Nusrat;Park, Taeseong;Kim, Young Hwan;Lee, Dongsun;Kim, Hackyoung;Noh, Kwangmo;Kim, Young Jun
Mass Spectrometry Letters
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v.4
no.3
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pp.41-46
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2013
The goal of this study is to find an experimental condition which enables us to perform enzymatic studies on the cellular behavior of PTEN (phosphatase and tensine homolog) through identification of molecular species of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphates and their quantitative analysis in a mammalian cell line using mass spectrometry. We initially exployed a two-step extraction process using HCl for extraction of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphates from two mammalian cell lines and further analyzed the extracted phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphates using tandem mass spectrometry for the identification of them. We finally quantified the concentration of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphates using internal standard calibration. From these observation, we found that HEK 293-T cells is a good model to examine the enzymatic behavior of PTEN in a cell, and the minimum amount of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphates is more than 50 pmol for quantification in a mass spectrometer. These results suggest that the well-optimized experimental conditions are required for the investigation of the cellular PTEN in terms of the catalytic mechanism and further for the detailed identification of cellular substrates.
In, Man-Jin;Gwon, Su-Yeon;Chae, Hee-Jeong;Kim, Dong-Chung;Kim, Dong-Ho
Applied Biological Chemistry
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v.50
no.4
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pp.304-307
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2007
An efficient production method of spirulina extract was developed by enzymatic treatment using cell lytic and proteolytic enzymes. The suitable dosage of Tunicase, a cell lytic enzyme, was found to be 2.0% (w/w). Proteolytic enzymes were screened to obtain high solid recovery and spirulina extraction (SE) index, which indicates nucleic acid-related substances content. Among the seven tested proteases, Esperase was selected and optimal dosage of this enzyme was 2.0% (w/w). The solid recovery and SE index of simultaneous treatment and co-treatment using optimal dosages of Tunicase and Esperase were greatly similar, respectively. However, co-treatment had the effect of shortening total hydrolysis time. The SE index and solid recovery of co-treatment were significantly enhanced by 75% $(11.4{\rightarrow}20.0)$ and 45% $(45.2%{\rightarrow}65.3%)$, respectively, than those of the non-treated extracts.
Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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v.29
no.1
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pp.108-117
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2017
Laver, Porphyra, is distinctive for its high content of proteins and polysaccharides such as porphyran and hemicellulose. The chemical properties of the polysaccharides extracted with different extraction methods such as hot water, dilute acid(pH 4.0) or alkali solution(2N NaOH) were examined to investigate the suitable extraction conditions for porphyran and hemicellulose from laver. For porphyran extraction, dilute acid solution was more preferable to hot water and alkali solution because of its higher 3,6-anhydrogalactose content and lower protein content. However, alkali solution was more suitable to extract the hemicellulose because of higher mannose content indicating the extraction of mannan. To decrease contamination of the polysaccharides with protein, the dried lavers were pretreated with enzymes (Protamex, Flavourzyme, Alcalase, Viscozyme) before hot water extraction. All enzyme pretreatments increased the yield of polysaccharides by compared with control (enzyme unpretreated) and Flavourzyme pretreatment was most effective to decrease protein contamination in the polysaccharide. All viscosities of porphyran solutions pretreated by enzymes were lower compared to the control porphyran solution and showed pseudoplastic behavior with yield stress. In case of alkali extraction of residues obtained after enzyme hydrolysis and hot water extraction, protease pretreatment increased the mannose contents in the polysaccharide while the xylose content was increased by Viscozyme pretreatment.
Fish scales have potential in functional food preparation due to their antioxidant and antihypertensive properties. We investigated the angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitory activity of Tilapia mossambica scale extracts. Hydrolysates of tilapia scales were prepared by enzymatic extraction using five proteases (${\alpha}$-chymotrypsin, Alcalase, Kojizyme, Protamex and trypsin) after scales were treated with hot water for 3 hr. Scale enzymatic hydrolysates prepared using both hot water and enzyme treatments exhibited elevated hydrolysis (about 25%-55%) compared to only enzyme treatment (about 15%-45%). Enzymatic hydrolysates (1 mg/mL) prepared by both hot water and enzyme treatments also showed significantly increased ACE inhibitory activities from about 20%-75%. The pattern of ACE inhibitory activities was similar to the degree of hydrolysis. Alcalase and ${\alpha}$-chymotrypsin hydrolysates displayed the highest ACE inhibitory activities ($IC_{50}$ = 0.83 mg/mL and 0.68 mg/mL, respectively). In addition, the ACE inhibitory effects of $IC_{50}$-chymotrypsin hydrolysates increased with decreasing molecular weight (5 kDa>, 10 kDa> and 30 kDa>), with the 5 kDa> fraction displaying the highest ACE inhibitory activity (about 89.9% and $IC_{50}$ = 0.1 mg/mL). We suggest that the peptide compounds of enzymatic hydrolysates prepared from tilapia scale enhances ACE inhibitory activity and might be useful as an antihypertensive material.
This experiment was carried out to investigate the effects of autohydrolysis and extraction conditions on the separation of the chemical substances, the extractability of lignin by dioxane, and the yield of reducing sugars from cellulosic substrates by using a commercial cellulase derived from Trichoderma viride. Air-dried wood meals through 0.42mm (40 mesh) screen and retained on 0.25 mm (60 mesh) of Populus alba-glandulosa and Pinus koraiensis were autohydrolyzed with water at $180^{\circ}C$ for 30 and/or 60 minutes in a 6 liter stainless-steel digester with or without 2% 2-naphthol. The hydrothermally-treated wood meals were extracted the lignin with 100%, 90%, 75% and 50% dioxane solutions at $70^{\circ}C$ for 4 hours, respectively. The results obtained were as follows; 1) After autohydrolysis of Populus alba-glandulosa, the yield of wood meals decreased with lengthening the auto hydrolysis time from 30 minutes to 60 minutes and with 2% 2-naphthol addition. In case of Pinus koraiensis, the yield was not affected by 2%, 2-naphthol addition at the autohydrolysis in the digester. 2) After autohydrolysis and lignin extraction of Populus alba-glandulosa, the yield of wood meals decreased with lengthening the autohydrolysis time from 30 minutes to 60 minutes and with 2% 2-naphthol addition. Extraction of 50% dioxane solution was the best solvent for the yield among the solutions of 100%, 90%. 75% and 50% dioxane. In case of Pinus koraiensis, the yield was not affected by 2% 2-naphthol addition and the solution of 90% dioxane was the poorest solvent for the yield. 3) After autohydrolysis and lignin extraction of Populus alba-glandulosa, the Klason lignin content in cellulosic substrates for enzymatic hydrolysis decreased with lengthening the autohydrolysis time from 30 minutes to 60 minutes and with 2% 2-naphthol addition. Klason lignin content was the lowest after extraction by 90% or 75% dioxane solution. The content was also affected by interaction of the three factors-autohydrolysis time, 2% 2-naphthol addition and concentration of dioxane. In case of Pinus koraiensis, the Klason lignin content increased with 2% 2-naphthol addition but was not affected by the concentration of dioxane solution. 4) After autohydrolysis and lignin extraction of Populus alba-glandulosa, the extractable Klason lignin content by extraction increased with lengthening the auto hydrolysis time from 30 minutes to 60 minutes and with 2% 2-naphthol addition. The extractable lignin content was the highest after extraction by 90% or 75% dioxane solution. In case of Pinus koraiensis, the extractable lignin content increased with 2% 2-naphthol addition. Extractions by 100%, 90% and 50% dioxane solutions were more effective for the extraction of Klason lignin than by 75% dioxane solution. 5) After autohydrolysis and lignin extraction of Populus alba-glandulosa, the yield of reducing sugars increased with lengthening the autohydrolysis time from 30 minutes to 60 minutes but was not affected by 2% 2-naphthol addition and the concentration of dioxane. The yield of reducing sugars after enzymatic hydrolysis was slightly higher by extractions with 90%, 75% and 50% dioxane solutions than with 100% dioxane. In case of Pinus koraiensis, the yield of reducing sugars was not affected by 2% 2-naphthol addition but affected by the concentration of dioxane. The yield of reducing sugars was the highest in cellulosic substrates extracted by 100% dioxane solution.
Background: Minor saponins or human intestinal bacterial metabolites, such as ginsenosides Rg3, F2, Rh2, and compound K, are more pharmacologically active than major saponins, such as ginsenosides Rb1, Rb2, and Rc. In this work, enzymatic hydrolysis of ginsenoside Rb1 was studied using enzyme preparations from cultured mycelia of mushrooms. Methods: Mycelia of Armillaria mellea, Ganoderma lucidum, Phellinus linteus, Elfvingia applanata, and Pleurotus ostreatus were cultivated in liquid media at $25^{\circ}C$ for 2 wk. Enzyme preparations from cultured mycelia of five mushrooms were obtained by mycelia separation from cultured broth, enzyme extraction, ammonium sulfate (30-80%) precipitation, dialysis, and freeze drying, respectively. The enzyme preparations were used for enzymatic hydrolysis of ginsenoside Rb1. Results: Among the mushrooms used in this study, the enzyme preparation from cultured mycelia of A. mellea (AMMEP) was found to convert ginsenoside Rb1 into compound K with a high yield, while those from G. lucidum, P. linteus, E. applanata, and P. ostreatus produced remarkable amounts of ginsenoside Rd from ginsenoside Rb1. The enzymatic hydrolysis pathway of ginsenoside Rb1 by AMMEP was $Rb1{\rightarrow}Rd{\rightarrow}F2{\rightarrow}$ compound K. The optimum reaction conditions for compound K formation from ginsenoside Rb1 were as follows: reaction time 72-96 h, pH 4.0-4.5, and temperature $45-55^{\circ}C$. Conclusion: AMMEP can be used to produce the human intestinal bacterial metabolite, compound K, from ginsenoside Rb1 with a high yield and without food safety issues.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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