• 대한의생명과학회지
• /
• 제7권2호
• /
• pp.85-89
• /
• 2001

Many Staphylococcus aureus strains produce enterotoxins causing food poisoning. Staphylococcal enterotoxins are classified by serological criteria into five major groups - subtype A to E. It is difficult, time-consuming, and expensive to detect staphylococcal enterotoxins in the clinical laboratory. In this study, we fried to detect the enterotoxin genes of Staphylococcus aureus strains isolated from clinical specimens and Kimbap - rice rolled in a sheet of laver - using multiplex PCR technique. A total of 77 strains of Staphylococcus aureus from clinical specimens and 78 strains from Kimbap were isolated. Among clinical isolates of S. aureus, 60 strains (78.0%) were identified as producing enterotoxins. A total offs strains (91.6%) in the 60 staphylococcal enterotoxin producing strains were enterotoxin subtype C. In case of kimbap: 43 (55.1%) strains were detected to produce enterotoxins and 39 (90.6%) enterotoxin producing strains were subtype A.

• 한국동물위생학회지
• /
• 제33권3호
• /
• pp.255-261
• /
• 2010

At the present study, it was aimed to explore the states of antimicrobial resistant Staphylococcus aureus isolates from 320 pigs and cattle carcass (160 pigs and 160 cattle) slaughtered in Busan province from March 2008 to November 2009. Among 320 samples, 26 of Staphylococcus aureus were isolated from pigs (10.6%) and cattle (5.6%). In antimicrobial susceptibility test, all of the isolates were demonstrated susceptibility to oxacillin, cefoxitin, cephalothin, vancomycin, rifampin and linezolid. But the isolates were showed resistance other antibiotics in order of penicillin (92.3%), gentamicin (76.9%), tetracycline (69.2%), erythromycin (65.4%), and clindamycin (61.5%). In case of enterotoxin production, 7.7% of 2 strains produced enterotoxin A.

• 미생물학회지
• /
• 제16권4호
• /
• pp.161-169
• /
• 1978

Escherichiae-like organisms were isolated from rectal specimens of 56 children who were either in preschool age or in elementary school. The isolated strains were subjected to tests to screen enteropathogens producing heat-labile enterotoxin and susceptibility test to various antibiotics by disc diffusion method on agar plates. Production of heat-labile enterotoxin by the strains was assyed in the sensitive and reproducible cultured adrenal tumor cell system. The assay was sterodogenesis of the cell in the presence of heat-labile enterotoxin. Among 56 strains, gave positive reaction in the test of toxin production. This meant that about 10% of the children population objected to the study harbored the toxigenic strain of enteropathogenes. Some of these toxigenic strains were resistant to the antibiotics employed in the test. This study suggested that considerable population in Korea may harbor entertoxigenic E. coli as a part of intestinal normal flora. The toxigenic strains which are resistant to antibiotics may bring issue of public health in the future.

• 대한미생물학회지
• /
• 제18권1호
• /
• pp.53-58
• /
• 1983

Enterotoxigenic E. coli is one of causative agents of the infantile diarrhea and traveler's diarrhea. A modified infant mouse assay(IMA) was developed for the detection of heat stable enterotoxin (ST) of E. coli isolated from diarrheal and control infants and assay system was established with using enterotoxin producing reference strains. The supernatant of the 24 hour-shaking culture of E. coli in Casamino Acid Yeast Extract Salt Broth(CYES-2) was ingested orally into the 2-4 day old ICR mice. After the mice were kept at $25^{\circ}C$ for 4 hours, they were sacrificed and the gut weight body weight ratio(GW/BW) was taken as the index of fluid accumulation induced by heat stable enterotoxin of E. coli. The results obtained were as follows; 1. The GW/BW responses of IMA tested with enterotoxin reference strains of E. coli(E. coli O148H28:$ST^+LT^+$, E. coli $O78H^-:ST^+LT^+$, E. coli O15H11:$ST^-LT^+$, E. coli O1H7:$ST^-LT^-$) appeared ta be ST dose-dependent, and not LT-dependent. From the dose-response curve, $25{\mu}l$ of culture supernatant was determined as test amount of the IMA. 2. Frequency distribution of IMA result from 643 strain of E. coli showed normal distribution at low GW/BW ratio and dispersed pattern at high GW/BW ratio. The GW/BW ratios of $0.056{\pm}0.004(mean{\pm}SD)$ of normal distribution which distributed from 0.044 to 0.068(P<0.01) was considered as ST negative. Thus the GW/BW ratio above 0.069 could be regarded as ST positive.

• 한국식품과학회지
• /
• 제20권6호
• /
• pp.780-786
• /
• 1988

본 실험은 Staphylococcus aureus로부터 생성되는 enterotoxin A의 분리를 위하여 각종 분리방법을 조사하였고 그 특성들을 상호 비교하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Amberlite 수지는 배지로부터 처음 toxin을 분리 하는 데에는 간편한 수지이나 정제도에 있어서는 약 70%수준으로 다른 방법들에 비해 낮은 편이었다. CM-cellu-lose수지는 0.2M phosphate buffer로 용출했을 때 75% 정도의 정제도를 가진 toxin을 분리할 수 있었으나 stepwise법으로 용출했을 때에는 80% 이상으로 정제도를 높일 수 있었고 Amberlite 수지와 함께 사용했을 때에는 90%정도의 toxin을 얻을 수 있었다. Amberlite나 CM-cellulose수지로 정제한 후 gel filtration을 실시하면 정제도를 더 높일 수 있었다. FPLC는 분리도와 정제도에서 가장 우수하였으며 FPLC의 결과에 따라 Amberlite 수지는 toxin 분획을 중심으로 앞의 분획을 그리고 CM-cellulose 수지는 뒤의 분획을 주로 제거 하는 특징을 가진다. 따라서 위의 column중 하나만 사용한 후 FPLC를 사용하면 95%이상의 toxin을 분리하는 것이 가능하였다.

• 동아시아식생활학회지
• /
• 제11권1호
• /
• pp.26-32
• /
• 2001

독소원성 대장균(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC, EC81, serotype O148:H28)이 생산하는 heat labile enterotoxin(LT)를 검색해 본 결과, reversed passive latex agglutination(RPLA)법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서까지 양성반응을 보였으며 polymerase chain reaction (PCR)기법에 있어서는 10 ng으로부터 1 pg희석용액에서까지 147-base pair(bp)의 LT DNA fragment가 확인되었다. Clostridium perfringens A형 (NCTC8238, Hobbs serotype 2)이 생산한는 장독소를 검색해 본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서 까지 양성반응을 보여 독소원성대장균이 생산하는 LT와 일치하였으나, PCR기법에 있어서는 10ng로부터 10 pg 희석용액에서 까지 354-bp의 DNA fragment가 확인되어 독소원성대장균이 생산하는 LT보다 1/10의 낮은 감도를 보였다. PCR기법은 RPLA법에 비하여 훨씬 신속하고 소량의 sample로 장독소를 확인할 수 있었다.

• 한국식품과학회지
• /
• 제35권1호
• /
• pp.97-102
• /
• 2003

Cook-chill 제품의 원료로 사용하는 시금치와 수세한 시금치에 대해 Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus, Campylococcus spp., Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 등 12종류의 병원성세균의 존재 여부를 확인하였다. 이들 시금치로부터 4종의 병원성세균을 분리하여 API kit와 ATB 자동 동정기를 포함한 형태학적 및 생화학적 방법에 의해 동정하였다. MacConkey agar에서 분리된 균은 그람 음성 간균으로 glucose를 이용하여 gas를 생성하며, lactose 음성, sucrose 양성, lysine 양성으로 ATP system에서 A. hydrophila 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Cereus Selective agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 포자 형성균으로 catalase 양성, mannitol 음성, lecithinase 양성, Simmon's citrate 음성, $NO_2$ 생성 양성, arginine 양성균으로 ATB system에서 B. cereus 종에 대해 99.8%의 상동성을 보였다. Clostridium Perfringens agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 혐기성균으로 포자를 형성하며, mannitol 양성, lecithinase 양성으로 ATB system에서 C. perfringens 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Baird-Parker agar에서 분리된 균주는 그람 양성 구균으로 mannitol, lecithinase, lactose, clumping factor, coagulase 및 hemolysin 양성, xylose 음성으로 ATB system에서 S. aureus 종에 대해 97.8%의 상동성을 보였다. Salmonella spp., E. coli O157:H7, Y. enterocolitica를 포함한 다른 병원성세균은 분리되지 않았다. 시금치에서 분리한 S. aureus 5균주 중 2균주는 SET-RPLA kit에서 enterotoxin type A를 생성하였고 3균주는 enterotoxin을 생성하지 않았다. B. cereus 5균주는 CRET-RPLA kit에서 모두 enterotoxin을 생성하였다.

• 한국환경보건학회지
• /
• 제23권4호
• /
• pp.45-49
• /
• 1997

Clostridium perfringens A형이 생산하는 장독소를 검색해본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액으로부터 64배로 희석한 용액 (NCTC 8239 Hobbs serotype 3 CPE$^+$)에서까지 양성반응을 보였으며 PCR 기법에 있어서는 10 pg 희석 용액까지 364 bp의 장독소 DNA fragment(NCTC 8238 Hobbs serotype 2 CPE$^+$)를 확인 할수 있었다. 그러므로 장독소를 검색하기 위해서는 PCR기법이 RPLA법에 비하여 훨씬 감도가 높음을 확인할 수 있었다.

• 한국환경보건학회지
• /
• 제38권6호
• /
• pp.510-519
• /
• 2012

Objectives: This study was conducted in order to evaluate the microbiological contamination of the indoor air of the lunchrooms at child care centers and investigate the toxin genes and toxin production ability of food-borne pathogens. Methods: A total of 64 child care centers were sampled to test total aerobic bacteria, coliform bacteria, fungi, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus and Salmonella spp. according to the Korea Food Code. All toxin genes of pathogens were detected using the Polymerase Chain Reaction method. The Sthaph. aureus enterotoxin was detected by a Staphylococcus aureus enterotoxin-reversed passive latex agglutination kit. The heamolysin BL (HBL) and non-heamolytic enterotoxin (NHE) produced by B. cereus were detected using a B. cereus enterotoxin-reversed passive latex agglutination kit and Bacillus diarrheal enterotoxin visual immunoassay kit, respectively. Results: The means of total aerobic bacteria and coliform bacteria were $1.91{\pm}1.84$ log CFU/plate and $0.47{\pm}0.62$ log CFU/plate, respectively. The mean of fungi also showed $0.59{\pm}0.71$ log CFU/plate. Among the pathogenic bacteria tested in this study, Staphy. aureus and B. cereus were detected in four (6.3%) and 21 (32.8%) out of 64 indoor air samples from lunchrooms in child care centers, respectively. All Staphy. aureus tested in this study possessed no toxin genes and did not produce enterotoxin. The detection rate of nheABC, hblCDA, entFM and ces toxin gene in B. cereus was 100, 57.1, 76.2 and 0%, respectively. B. cereus isolates were classified into four groups according to the presence or absence of toxin genes. The nheABC gene was the major toxin gene among B. cereus tested in this study. The HBL was detected in 11 out of 21 B. cereus isolates (52.4%) and three B. cereus isolates produced NHE (14.3%). Conclusion: The results indicated that the contamination by microorganisms in the indoor air of lunchrooms was unqualified to supply safe catering in child care centers. The ongoing control of indoor air quality is required.

• 한국어병학회지
• /
• 제37권1호
• /
• pp.79-88
• /
• 2024

Aeromonas spp. 감염은 관상어 산업뿐만 아니라 양식업에서도 상당한 경제적 손실을 초래하는 것으로 보고되고 있다. 한편 2022년 12월부터 2023년 1월 사이에 국내에서 사육중인 금붕어(Crassius auratus)에서 Aeromonas병증을 보이는 어체에 대해서 발병 원인균을 규명하기 위해서 조사 하였다. 병증을 보이는 금붕어의 피부와 내부 장기에서 그람 음성균이 분리되었다. Biochemical test와 16S rRNA gene으로는 Aeromonas 속까지 동정할 수 있었으나 종레벨까지는 구분하기 어려웠다. 이에 가장 상동성이 높았던 A.veronii를 대상으로 species-specific PCR을 수행했고 명확히 종 수준으로 동정할 수 있었다. 아울러서 장독소 유전자, 감염 실험 및 항생제 내성 분석을 수행하였다. 금붕어에 대한 균주의 생체 내 병원성 시험 결과, 실험 주사 후 일주일 이내에 감염된 숙주에서 100%의 치사율을 나타냈다. 장독소 유전자인 act 독력 유전자가 검출되었다. 균주의 항균제 감수성 분석 결과 대부분의 항균제에 감수성을 보였으나, Ampicillin, Imipenem, Meropenem 및 Clindamycin 약제에는 내성을 보였다.