Three kinds of serine protease inhibitors, members of the Bowman-Birk trypsin inhibitor, were purified from Dolichos lablab seeds and named Dolichos protease inhibitor 1, 2 and 3 (DI-1, DI-2 and DI-3), respectively. Each inhibitor showed a single band with gel mobility at around 15.9, 12.1 and 14.6 kDa on 20% SDS-PAGE under reducing conditions. To characterize inhibitory specificity, the inhibition constant (Ki) for these inhibitors was measured against several known serine proteases. All three Dolichos protease inhibitors (DI-1, DI-2 and DI-3) inhibited the activity of trypsin and plasmin, but had no effect on thrombin and kallikrein (either for human plasma kallikrein or for porcine pancreas kallikrein). DI-1 inhibited chymotrypsin most effectively (Ki = $3.6{\times}10^{-9}\;M$), while DI-2 displayed inhibitory activity for porcine pancreatic elastase (Ki = $6.2{\times}10^{-8}\;M$). Pre-treatment of the 33 mg/kg of DI-mixture (active fractions from $C_{18}$ open column chromatography that included DI-1, DI-2 and DI-3) inhibited the induction of pseudomonal elastase-induced septic hypotension and prevented an increase in bradykinin generation in pseudomonal elastase-treated guinea pig plasma. Also, the increase of kallikrein activity, by injection of pseudomonal elastase, was inhibited by the pretreatment of the DI-mixture in a guinea pig. Since the DI-mixture had no inhibitory effect on kallikrein activity when Z-Phe-Arg-MCA was used as a substrate in vitro, its inhibitory activity in the pseudomonal elastase-induced septic hypotension model might not be due to a direct inhibition of plasma kallikrein in the activation cascade of the Hageman factor and prekallikrein system. These results suggest that the Dolichos DI-mixture might be used as an inhibitor in pathogenic bacterial protease-induced septic shock.
Kim, Dongwook;Kim, Hee-Jin;Chae, Hyun-Seok;Park, Nam-Gun;Kim, Young-Boong;Jang, Aera
한국축산식품학회지
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제34권6호
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pp.844-851
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2014
This study focused on the anti-oxidative and collagenase- and elastase inhibition effects of low molecular weight peptides (LMP) from commercial Jeju horse leg bone hydrolysates (JHLB) on pancreatin, via enzymatic hydrolysis. Cell viability of dermal fibroblasts exposed to UVB radiation upon treatment with LMP from JHLB was evaluated. Determination of the antioxidant activity of various concentrations of LMP from JHLB were carried out by assessing 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2-azino-bis-3-ethybenzothiazoline-6-sulphonic acid (ABTS) radical scavenging activity, ferric reducing antioxidant power (FRAP), and oxygen radical absorbance capacity (ORAC). The DPPH radical scavenging activity of LMP from JHLB (20 mg/mL) was 92.21% and ABTS radical scavenging activity (15 mg/mL) was 99.50%. FRAP activity (30 mg/mL) was $364.72{\mu}M/TE$ and ORAC activity (1 mg/mL) was $101.85{\mu}M/TE$. The anti-wrinkle potential was assessed by evaluating the elastase- and collagenase inhibition potential of these LMP. We found that 200 mg/mL of LMP from JHLB inhibited elastase activity by 41.32%, and 100 mg/mL of LMP from JHLB inhibited collagenase activity by 91.32%. The cell viability of untreated HS68 human dermal fibroblasts was 45% when exposed to a UVB radiation dose of $100mJ/cm^2$. After 24 h of incubation with $500{\mu}g/mL$ LMP from JHLB, the cell viability increased to 60%. These results indicate that LMP from JHLB has potential utility as an anti-oxidant and anti-wrinkle agent in the food and cosmetic industry. Additional in vivo tests should be carried out to further characterize these potential benefits.
In this study, the antioxidant and anti-skin aging properties of the Korean marine algae Ishige foliacea were investigated. Solvent extracts from I. foliacea were prepared with 70% ethanol, 80% methanol, and water. The extraction yields of various solvent extracts ranged from 9.55% to 35.12%. In terms of antioxidant activity, the ethanol extract showed the highest ABTS (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt) radical scavenging activity, nitrite oxide scavenging activity, reducing power, and FRAP (ferric reducing antioxidant power). Regarding anti-skin aging activity, evaluation of the skin whitening and anti-wrinkle activities revealed that the methanol, water, and ethanol extracts possessed the highest tyrosinase (IC50=0.98 mg/mL), elastase (IC50=0.15 mg/mL), and collagenase (IC50=0.06 mg/mL) inhibitory activities, respectively. These results suggest that I. foliacea holds potential as an antioxidant and anti-skin aging substance in food and cosmetic materials.
Objectives : The purpose of this study is to confirm the anti-inflammatory, antioxidant and anti-aging efficacy of Pyeonggangaeuljihyeol-tang(PGJT) extract. Methods : In order to confirm the anti-inflammatory activity of PGJT extract, the inhibitory effect on NO PGE2 production were evaluated and the expression level of iNOS, COX-2 and IL-6 mRNA were measured through qRT-PCR, Antioxidant activity was evaluated for radical scavenging activity using DPPH and ABTS, anti-aging activity was evaulated for collagenase, elastase, tyrosinase and L-DOPA oxidation inhibitory activity. Results : PGJT extract shows anti-inflammatory effect by inhibiting the production of NO and PGE2 by reducing the expression level of iNOS, COX-2 and IL-6 mRNA, antioxidant effect by increasing DPPH and ABTS scavenging abillity in a concentration dependent manner. In addition, the anti-aging effect was confirmed by inhibiting collagenase, elastase, tyrosinase production and L-DOPA oxidation. Conclusion : This suggests that PGJT showed an overall excellent anti-inflammatory effect and an inhibitory effect on the activity of antioxidant and anti-aging related enzymes.
본 연구에서는 흑진미(Oryza sativa cv. Heugjinmi) 추출물을 이용하여 항산화 및 미백 관련 기능성 화장품 소재로서의 활용 가능성을 검증하고자 항산화 및 미백 관련 인자들의 효능을 분석하였다. 그 결과, SOD 유사 활성, FRAP, 환원력, xanthine oxidase 저해 활성, elastase저해 활성에서 대조군과 유사한 활성을 나타내었다. Tyrosinase 저해 활성은 열수 추출물에서는 효과가 없었고 에탄올 추출물에서는 59%의 억제 활성을 나타내었다. 에탄올 추출물은 B16F10 세포주에서 생존율에 영향을 미치지 않을 농도인 25, 50, 100 ㎍/mL 농도에서 cellular tyrosinase와 멜라닌 생합성을 저해하는 것으로 확인되었다. 또한, tyrosinase, TRP-1, TRP-2의 mRNA 발현을 확인한 결과는 최고농도인 100 ㎍/mL에서 각각 37%, 51%, 34%의 억제율을 보였다. 따라서 흑진미(O. sativa) 추출물은 항산화 및 미백 관련 기능성 화장품 소재로서의 활용 가능성이 있을 것으로 판단된다.
최종당화산물은 환원당과 단백질, 지질 또는 핵산 사이의 당화반응에 의해서 생성되는 물질로 이물질은 피부 노화 과정에 밀접하게 연관되어 있다고 보고되어 있다. 본 연구에서는 항산화 활성, 최종당화산물 생성 저해, 콜라겐과 최종당화산물의 교차결합 저해 및 억제, 엘라스타제 활성 저해 효능 시험을 통해서 비자나무 유박 추출물의 항노화 효과를 평가하였다. 시험 결과, 비자나무 유박 추출물은 폴리페놀과 플라보노이드를 함유하고 있으며, DPPH와 ABTS 자유라디칼을 50% 소거할 수 있는 농도는 각각 $16.4{\mu}g$ (Dried materials, DM)/mL과 $16.7{\mu}g\;DM/mL$ 로 관찰되었다. 또한, 비자나무 유박 추출물은 농도 의존적으로 최종당화산물 생성과 엘라스타제 활성을 저해하였고, 콜라겐과 최종당화산물의 교차결합을 저해 및 억제하였다. 따라서 본 연구 결과를 바탕으로 비자나무 유박 추출물은 항노화 효능이 있는 화장품 소재로서 활용가치가 있음을 확인하였다.
The photoprotective effects of minerals from Korean indigenous ores, consisting mainly of sericite, on UVA-irradiated human dermal fibroblast (HDF) were examined. Zymographic analysis showed that the treatment of the minerals significantly reduced the UVA-enhanced MMP-1 activity and mRNA level. The minerals also showed strong inhibitory effect on MMP-2 activity and mRNA expression. Moreover, the minerals were better than polyphenol in reducing MMP-1 and MMP-2 expressions. Notably, the minerals significantly enhanced collagen biosynthesis in the HDF. Inhibition of the elastase activity and protection against the oxidatively damaged HDF cell were also found in the presence of the minerals. Taken together, the ore minerals may be used as the potent photo-protective and anti-skin-aging ingredients which can prevent skin cell damage by UVA.
열매가 성숙하는 과정은 유전학적으로 프로그램화 되어 있는 과정으로 다른 여러 유전자 발현과 효소의 작용에 의한 생화학적, 생리적 조절의 결과물이다. 이런 일련의 과정에서 과실과 채소에 화학적 조성과 활성 물질에 변화가 나타나는 것을 당연한 결과일 것이다. 해당화의 열매가 성숙하는 과정에서 이들 활성 물질의 변화를 측정하기 위해 우리는 성숙단계 별로 채집 된 열매 시료 추출물에서의 항산화 활성의 차이, 항 elastase 활성 및 polyphenol 화합물의 함량을 분석하였다. 결과적으로 미성숙 단계의 열매 추출물에서 높은 phenolic 화합물과 플라보노이드 함량이 검출되었으며, 그에 따라 높은 radical 소거능, 환원력 및 ORAC 활성을 나타냈다. 또한 elastase 저해 활성에서도 다른 성숙 단계의 추출물에 비해 미성숙 단계의 열매 추출물에서 높은 활성을 나타내는 것으로 조사되었다. 더불어 성숙과정에서 플라보노이드 생합성 과정에 관련된 유전자의 발현이 감소하는 것을 확인하였으며, 이를 통해 플라보노이드의 함량이 감소하는 것을 설명할 수 있었다. HPLC분석을 통해 다른 성숙 단계의 추출물과 비교하여 미성숙 열매 추출물에서 높은 함량의 myricetin, caffeic acid, chlorogenic acid, syringic acid, р-coumaric acid 등이 검출되었다. 구조 기반의 molecular doking을 사용하며 이들 화합물과 elastase의 결합부위와 패턴을 분석하였으며 이를 통해 chlorogenic acid와 elastase가 강하게 결합하는 것을 확인하였다. 따라서, 본 연구를 통해서 해당화 열매의 성숙 정도가 이 식물의 약리학적 가치에 영향을 미치는 것을 규명하였고, 미성숙한 해당화 열매는 향후 활성산소 생성에 의해 유발되는 피부 노화 억제 효과뿐 아니라 피부의 탄력성 강화를 위한 기능성 천연소재로서의 가능성을 입증하였다.
To use mountain ginseng adventitious roots (MGAR), which is superior in functionality compared to ginseng, and to mass produce raw materials as a functional cosmetic material, the antioxidant and cosmeceutical activities of the extracts of MGAR at different ethanol concentrations (0, 20, 40, 60 and 80%) were compared and analyzed. At first, different ethanol concentrations were compared to determine the best solvent for the extraction of phenolic compounds from MGAR. An 80% ethanol extract with 10.07 mg of gallic acid equivalents/g sample and 0.94 mg of quercetin equivalents/g sample was the best solvent in the extraction of phenolic compounds. However, the 60% ethanol extract had the highest antioxidant activity, evident by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging, Trolox equivalent antioxidant capacity (35.01 mM Trolox/g sample) and ferric reducing antioxidant power (460.94 mM $FeSO_4/g$ sample). However, the inhibitory activities of the 80% ethanol extract from the MGAR against tyrosinase and elastase were higher than those of the other extracts. The results of this study show that the extract of MGAR can be used as an easily accessible source of natural antioxidant and as a possible cosmetic ingredient in the cosmeceutical industry. However, the components responsible for the antioxidant and cosmeceutical activities of the MGAR extracts are currently unclear. Therefore, it is suggested that further studies should be carried out to isolate and identify the antioxidant and cosmeceutical components in MGAR.
Han, JeungHi;Kim, Mi-Ryung;Park, Yooheon;Hong, Yang Hee;Suh, Hyung Joo
한국축산식품학회지
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제33권3호
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pp.356-362
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2013
We investigated the skin permeability and various biological activities of porcine homogenate of placenta (HP) with the highest protein contents (452.89 ${\mu}g/mg$). The content of protein in subcritical extract of HP (SPE) was decreased from the initial content of 452.9 ${\mu}g/mg$ to 262.7 ${\mu}g/mg$ at 3 h subcritical extract. The contents of amino type nitrogen (A-N) were sharply increased from 35.1 ${\mu}g/mg$ of initial content to 305.9 ${\mu}g/mg$ at 3 h subcritical extract. The HP showed a noticeable activity in terms of antioxidant capacity for ferric reducing antioxidant power (FRAP) assay and especially for 2,2'-Azinobis- (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) method. HP, SPE-0.5, SPE-2 and SPE-3 showed inhibitory effect on elastase activities with an $IC_{50}$ of 46.1, 42.9, 31.6 and 34.7 ${\mu}g/mL$, respectively. SPEs showed more significantly inhibitory effect than HP (p<0.05). The skin permeability of the SPEs was higher than that of the HP. SPE-3 showed highest skin permeation and the permeability was significantly higher than that of HP. SPE-2 also showed significantly higher permeation than HP after 4 h. As expected, increase of extraction time significantly increased skin permeability in the subcritical extract of HP (SPE). From these results, in terms of cost and source availability, porcine placenta extracted with subcritical extraction has advantages over untreated PE and have potential as a cosmetic ingredient.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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