Small multidrug resistance(SMR) family(TC #2.A.7.1)에 속하는 막단백질 중 하나를 coding하는 Bacillus subtilis의 yvaE유전자의 발현을 유도한 결과, 발현된 YvaE단백질에 의해 대장균세포내에서 살균제를 포함한 다양한 양이온 약제에 대한 efflux활성을 촉매하는 것으로 확인되었다. 같은 operon내에 인접한 yaD유전자의 동시발현을 유도한 결과, 이러한 efflux활성은 억제가 되는 것으로 나타났다. Ethidium bromide를 기질로 하여 fluorimeter를 이용한 efflux transport실험결과, YvaE 단백질이 발현된 대장균세포의 경우 vector만을 함유한 대조세포에 비해 현저히 빠른 efflux활성을 보여주었다 따라서 YvaE 막단백질은 multidrug export를 촉매하는 SMR-type efflux pump임을 확인하였다.
본 연구는 MarA와 함께 MarB가 AcrAB efflux pump를 목표로 하는지 여부, 그리고 항생제의 균체외 배출기능에 대하여 어떤 조절 작용이 있는지를 항생제 내성검사를 통하여 살펴보았다. 본 연구 결과는 MarB가 MarA와 함께 AcrAB/TolC efflux pump의 항생제 배출기 능을 억제적으로 조절한다는 것을 간접적으로 보여 주었으며, 한편 이미 알려진 대로 MarA는 acrRAB operon의 발현을 전사 수준에 서 positive regulation하므로, MarB는 AcrAB efflux pump의 기능을 억제적으로 조절한다는 것을 암시하고 있다. 그리고 MarA와 함께 MarB단백질의 작용 목표는 AcrAB efflux pump임을 간접적으로 보여주고 있다. 또한 MarB는 MarA와 함께 대장균의 다른 efflux system(들)의 항생제 배출기능에 대해서도 억제적으로 조절할 가능성이 높은 것으로 나타났다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.200.1-200.1
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2003
The purpose of this study is to examine whether an brain to blood efflux system for taurine is present on the blood-brain barrier (BBB) or not and this efflux transport system is regulated by CNS cell damage with oxidative stress agent such as diethyl maleate (DEM) or tumor necrosis factor-a (TNF-${\alpha}$), by using the brain efflux index (BEI) method. The brain efflux index value is defined as the relative amount of test compound efflux from cerebrum compared with that of a reference compound, [$\^$14/C] carboxyinulin, which has limited BBB permeability. (omitted)
Background: This study investigated the temporal variation in soil $CO_2$ efflux and its relationship with soil temperature and precipitation in the Quercus glauca and Abies koreana forests in Jeju Island, South Korea, from August 2010 to December 2012. Q. glauca and A. koreana forests are typical vegetation of warm-temperate evergreen forest zone and sub-alpine coniferous forest zone, respectively, in Jeju island. Results: The mean soil $CO_2$ efflux of Q. glauca forest was $0.7g\;CO_2\;m^{-2}\;h^{-1}$ at $14.3^{\circ}C$ and that of A. koreana forest was $0.4g\;CO_2\;m^{-2}\;h^{-1}$ at $6.8^{\circ}C$. The cumulative annual soil $CO_2$ efflux of Q. glauca and A. koreana forests was 54.2 and $34.2t\;CO_2\;ha^{-1}$, respectively. Total accumulated soil carbon efflux in Q. glauca and A. koreana forests was 29.5 and $18.7t\;C\;ha^{-1}$ for 2 years, respectively. The relationship between soil $CO_2$ efflux and soil temperate at 10 cm depth was highly significant in the Q. glauca ($r^2=0.853$) and A. koreana forests ($r^2=0.842$). Soil temperature was the main controlling factor over $CO_2$ efflux during most of the study period. Also, precipitation may affect soil $CO_2$ efflux that appeared to be an important factor controlling the efflux rate. Conclusions: Soil $CO_2$ efflux was affected by soil temperature as the dominant control and moisture as the limiting factor. The difference of soil $CO_2$ efflux between of Q. glauca and A. koreana forests was induced by soil temperature to altitude and regional precipitation.
Unlike eukaryotic efflux pumps energized by ATPase bacterial efflux pumps are energized by the proton motive force. That is the reason why CCCP, an inhibitor of proton motive forcer is widely used to study the bacterial efflux pump. In many cases, efflux systems have been observed only in quinolone-resistant bacteria. Most of the quinolone-susceptible strains have been found to maintain little efflux pump. However some susceptible bacteria skewed the increased intracellular quinolone concentration only at a low concentration (0.01 or 0.1 mM) but net at a high concentration (1 mM) of CCCP. If bacterial cells were killed at high concentrations of CCCP and lost the integrity of their membranes, the intracellular quinolone would leak out from cells with no efflux system. The efflux pump system in the quinolone-susceptible strains could net be detected at the same concentration used for resistant bacteria. To test this hypothesist the intracellular quinolone concentration in the quinolone-susceptible and -resistant strains of Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus aureus was assayed at various concentrations of CCCP. Since the effect of CCCP is very rapid, the survival of bacteria was observed by assaying the DNA synthesis in 5 min. In the case of E. coli, but not P. aeruginosa or S. aureus, the quinolone susceptible strain was more susceptible to CCCP than the quinolone resistant ones, especially when the incubation with CCCP was extended. Decrease of the intracellular quinolone concentration resulted in a false result-no or weak efflux system in the quinolone susceptible strains. Results suggested that the concentration of CCCP should be optimized in order to detect the efflux system in the quinolone susceptible strains of E. coli.
The purpose of this study was to clarify the efflux transport system of choline from brain to blood across the blood-brain barrier (BBB) in rats using the brain efflux index (BEI) method. $[^3H]$Choline was micro-injected into parietal cortex area 2 (Par2) of the rat brain, and was eliminated from the brain with elimination halflife of 45 min. The BBB efflux clearance of $[^3H]$choline was about 124 mL/min/g brain, which was determined from combination of an elimination rate constant $(1.54X10^{-2}min^{-1})$ and the distribution volume in the brain (8.05 mL/g brain). The efflux of $[^3H]$choline was inhibited by unlabeled choline in a dose-dependent manner and was significantly inhibited by cationic substrates, such as hemicholinium-3 and tetraethylammonium (TEA). These results suggest that the BBB may act as an efflux pump for choline to reduce the excessive choline concentration in the brain interstitial fluid.
Multidrug-resistant strain of Acinetobacter baumannii (MDRAB) is an emerging pathogen in health care facilities, preventing MDRAB is a public health concern. We conducted this experiment on a clinical isolate of A. baumannii with two main goals: the role of the efflux pump system in the stress provision of carbapenem and the response to the transcription level of the efflux pump gene. A total of 34 strains of A. baumannii was isolated from the Yangsan Hospital of Pusan National University. First, when we compared and observed the expression of the efflux pump gene and antibacterial resistance to carbapenem, a strong correlation was observed between carbapenem resistance and overexpression of adeB (P=0.0056). Second, a correlation between the efflux pump and concentration gradient and tolerance to carbapenem stress at the AdeABC efflux pump genes transcription level was confirmed. Our results revealed that the expression of the AdeABC efflux pump is an important resistance determinant in obtaining antibiotic resistance of the carbapenem group in A. baumannii.
The purpose of the present study was to investigate the bidirectional transport of 1-anilino-8-naphthalene sulfonate (ANS) using isolated rat hepatocytes. The initial uptake rate of ANS by isolated hepatocytes was determined. The uptake process of ANS was saturable, with a $K_m of 29.1\pm3.2 \mu M and V_{max} of 2.9\pm0.1$ mmol/min/mg protein. Subsequently, the initial efflux rate of ANS from isolated hepatocytes was determined by resuspending preloaded cells to 3.0% (w/v) BSA buffer. The efflux process for total ANS revealed a little saturability. The mean value of the efflux clearance was $2.2\pm0.1 \mu$ L/min/mg protein. The efflux rate of ANS from hepatocytes was markedly decreased at $4^{\circ}C$, indicating that the apparent efflux of ANS might not be attributed to the release of ANS bound to the cell surface, but to the efflux of ANS from intracellular space. The efflux clearance was furthermore corrected for the unbound intracellular ANS concentration on the basis of its binding parameters to cytosol. The relation between efflux rate and unbound ANS concentration was fitted well to the Michaelis-Menten equation with a saturable and a nonsaturable components. The $V_{max} and K_m$ values were 0.54 mmol/min/mg protein, and 10.0 $\mu$ M, respectively. Based on the comparison of the ratios of $V_{max} to K_m (V_{max}/K_m)$ corresponding to the transport clearance, the influx clearance was two times higher than the efflux clearance. Together with our preliminary studies that ATP suppression in hepatocytes substantially inhibited ANS influx rate, we concluded that the hepatic uptake of ANS is actively taken up into hepatocytes via the carrier mediated transport system.
It is necessary to determine the amount of carbon dioxide ($CO_2$) absorbed by plants and released from forest floor into atmosphere, to gain a better understanding how forests participate in the global carbon cycle. Soil $CO_2$ efflux, litter production, and decomposition were investigated in Q. variabilis and P. densiflora stands in the vicinity of Gwangju, Chonnam province. Soil $CO_2$ efflux was measured using Infrared Gas Analyzer (IRGA) at midday of the 10th day at every month over 12-month period, to quantify seasonal and annual budgets of soil $CO_2$ efflux. Soil temperature and soil moisture were measured at the same time. Seasonal soil $CO_2$ efflux in Q. variabilis and P. densiflora were the highest in summer season. In August, maximum soil $CO_2$ efflux in Q. variabilis and P. densiflora was 7.49, $4.61CO_2{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$, respectively. Annual $CO_2$ efflux in each stand was 1.77, $1.67CO_2kg{\cdot}m^{-2}$ respectively. Soil $CO_2$ efflux increased exponentially with soil temperature and related strongly in Q. variabilis ($r^2$=0.96), and in P. densiflora ($r^2$=0.91). Litter production continued throughout the year, but showed a peak on November and December. Annual litter production in the Q. variabilis and P. densiflora stands were $613.7gdw{\cdot}m^{-2}{\cdot}yr^{-1}$ and $550.5gdw{\cdot}m^{-2}{\cdot}yr^{-1}$.$yr^{-1}$, respectively. After 1 year, % remaining mass of Q. variabilis and P. densiflora litter was 48.2, 57.1%, respectively. The soil $CO_2$ efflux rates in this study showed clear seasonal variations. In addition, the temporal variation in the $CO_2$ efflux rates was closely related to the soil temperature fluctuation rather than to variations in the soil moisture content. The range of fluctuation of soil $CO_2$ efflux and litter decomposition rate showed similar seasonal changes. The range of fluctuation of soil $CO_2$ efflux and litter decomposition rate was higher during summer and autumn than spring and winter.
In the present study, we examined the effects of several therapeutics of Alzheimer's disease, such as donepezil hydrochloride, tacrine and $\alpha$-phenyl-n-tert-butyl nitrone (PBN) on choline efflux from brain to circulating blood. The brain-to-blood efflux of [$^3H$]choline in rats was significantly inhibited by tacrine and PBN. Also the [$^3H$]choline efflux was reduced by tacrine and donepezil hydrochloride in the TR-BBB cells, in vitro the blood-brain barrier (BBB) model. These results suggest that these drugs may influence choline efflux transport from brain to blood and regulate the choline level in brain resulting in the increase of acetylcholine synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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