An expression vector system was developed for the secretory production of recombinant Bacillus stearothermophilus L1 lipase in Saccharomyces cerevisiae. The mature L1 lipase gene was fused to ${\alpha}-amylase$ signal sequence from Aspergillus oryzae for the effective secretion into the culture broth and the expression was controlled under GAL10 (the gene coding UDP-galactose epimerase of S. cerevisiae) promoter. S. cerevisiae harboring the resulting plasmid successfully secreted L1 lipase into the culture broth. To examine an optimum condition for L1 lipase expression in the fed-batch culture, L1 lipase expression was induced at three different growth phases (early, mid, and late-exponential growth phases). Maximum product on of L1 lipase (1,254,000 U/l, corresponding to 0.65/1) was found when the culture was induced at an early growth phase. Secreted recombinant L1 lipase was purified only through CM-Sepharose chromatography, and the purified enzyme showed 1,963 U/mg of specific activity and thermoalkalophilic properties similar to those reported for the enzyme expressed in Escherichia coli.
Purpose: Several accelerated partial breast radiation (APBR) techniques have been investigated in patients with early-stage breast cancer (BC); however, the optimal treatment delivery techniques remain unclear. We evaluated the feasibility and toxicity of APBR delivered using intensity-modulated radiation therapy (IMRT) in elderly patients with stage I BC, using a novel fractionation schedule. Materials and Methods: Forty-two patients aged ${\geq}65$ years, with stage I BC who underwent breast conserving surgery were enrolled in a phase I/II study evaluating APBR using IMRT. Forty eligible patients received 40 Gy in 4 Gy daily fractions. Patients were assessed for treatment related toxicities, and cosmesis, before APBR, during, and after completion of the treatment. Results: The median age was 73 years, median tumor size 0.8 cm and the median follow-up was 54 months. The 5-year locoregional control was 97.5% and overall survival 90%. Erythema and skin pigmentation was the most common acute adverse event, reported by 27 patients (69%). Twenty-six patients (65%) reported mild pain, rated 1-4/10. This improved at last follow-up to only 2 (15%). Overall the patient and physician reported worst late toxicities were lower than the baseline and at last follow-up, patients and physicians rated cosmesis as excellent/good in 93% and 86 %, respectively. Conclusion: In this prospective trial, we observed an excellent rate of tumor control with daily APBR. The acceptable toxicity profile and cosmetic results of this study support the use of IMRT planned APBR with daily schedule in elderly patients with early stage BC.
This study was performed to establish normal hepatoscintiangiographic(HSA) pattern of hepatic blood flow and to investigate dynamic differential HSA findings of primary and metastatic carcinomas and abscess of the liver. HSA was carried out after intravenous bolus injection of 10 mCi of Tc-99m-phytate by obtaining sequential anterior images of 1-second exposure for 16 seconds. Observations included (1) baseline study of normal hepatic blood flow pattern by correlating with contrast angiogram, (2) time sequence phasing of normal HSA, and (3) analysis of altered patterns in primary and metastatic carcinomas and abscesses of the liver. Materials consisted of 20 normal subjects, 28 primary hepatocellular carcinomas, 16 metastatic carcinomas and 7 liver abscesses. Results were: (1) Normal HSA demonstrated 3 distinct phases of arterialization(AP), of arterial hepatogram(AHP), and of portal venous hepatogram(PVHP). The means of each phase were 5.3, 6.3 and 8.3 seconds, respectively. Portal vein could be seen in all but one of 20 normal subjects. (2) Pattern changes in diseases groups were early start of AP in carcinomas and very early start of AP in abscesses. AP became prolonged in all disease group. (3) Distinction between AHP was sharp in metastasis and abscesses but un sharp in primary hepatoma. Cold area or areas became vascularized in primary hepatoma but not in abscess. Cold areas of metastasis were inhomogeneously vascularized in late AP and throughout AHP and became relatively vascular as PVHP began. The cold area of abscess showed rim enhancement during AH and APH. These differences in HSA pattern were very useful in differential diagnosis of the diseases studied.
This study investigated the anticancer activity of methanol extract from Platycarya strobilacea leaf in AGS human gastric cancer cells. We determined the cell viability effect of P. strobilacea using MTS assay. Apoptosis induction and cell cycle arrest were confirmed by fluorescein isothiocyanate and propidium iodide staining using cellometer K2. The mRNA expression levels of the Bcl-2 family were confirmed by reverse transcription-polymerase chain reaction. The cell viability was decreased in a dose-dependent manner treated with different concentrations of P. strobilacea. Total, early, and late apoptotic cells were dramatically increased, and the cell cycle was arrested at the sub-G1 phase. The mRNA expressions of Bcl-2 and Bcl-xL were reduced, whereas pro-apoptotic factors, Bax and Bak, were increased in a dose-dependent manner. These results suggested that P. strobilacea leaf extract induced significant apoptotic activity through an intrinsic mitochondria pathway.
The first hospice care center in Korea dates back to the East West Infirmaries (Dongseodaebiwon in the Korean language) of the Goryeo period in the early 11th century. It has been 50 years since hospice care was introduced in Korea. Initially hospice care was provided in the private sector, including those with a religious background, and its development was slow. In the 1990s, related religious organizations and academic associations were established, and then, a full-swing growth phase was ushered in as the Korean government institutionalized hospice care in the early 2000s. As a result, enhanced quality of hospice care service could be provided, which meant better pain management and higher quality of life for late stage cancer patients and their families. Still, the nation lacked a realistic reimbursement system which was needed to for financial stability of the affected patients. However, the national health insurance scheme began to cover hospice palliative expenses in 2015. In 2016, the Act on Decisions on Life-Sustaining Treatment for Patients in Hospice and Palliative Care or at the End of Life was legislated, allowing terminally-ill patients to refuse meaningless life-sustaining treatments. As the range of diseases subject to hospice palliative care was expanded, more challenges and issues need to be addressed by the service providers.
The usefulness of hypertermia for cancer therapy have well been established. The purpose of the present investigation was to ascess the effect of step-up $(42^{\circ}{\rightarrow}44^{\circ}C$ sequence) and step-down $(44^{\circ}{\rightarrow}42^{\circ}C$ sequence) heating on the skin of the hind foot of the mouse. Hyperthermic treatments were given by immersion the hind foot of the mouse in circulating water baths. Skin response was studied by the leg reaction, which was scored according to a numerical scoring system proposed by Urano et al (1980). The results were as follows 1. The skin damage of $44^{\circ}C$ control group was more severe than $42^{\circ}C$ control group (P<0.05), except for 15 min. heating group. 2. The Skin damage of step-down group was more severe than step-up group (P<0.05). 3. The skin damage of $44^{\circ}C$ control group was more severe than step-up group when there is no difference in $44^{\circ}C$ heating time of step-up group from $44^{\circ}C$ control group (P<0.05). 4. In step-down group, the skin damage was more severe than $44^{\circ}C$ control group after preheating 45 min at $44^{\circ}C$ (P<0.05). Therefore, the above findings suggest the normal tissue damage by step-up heating was correlated with heating time of post step-up. The dropping of heating temperature in late phase had more severe damage of the skin than that in early phase during hyperthermia, and so contineous control of satisfactory temperature should be considered as the one of the most important factor for prognosis, complications of clinical hyperthermia
Saad, N.;Urdaci, M.;Vignoles, C.;Chaignepain, S.;Tallon, R.;Schmitter, J.M.;Bressollier, P.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.12
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pp.1635-1643
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2009
The aim of this study was to provide new insight into the mechanism whereby the housekeeping enzyme glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) locates to cell walls of Lactobacillus plantarum 299v. After purification, cytosolic and cell wall GAPDH (cw-GAPDH) forms were characterized and shown to be identical homotetrameric active enzymes. GAPDH concentration on cell walls was growth-time dependent. Free GAPDH was not observed on the culture supernatant at any time during growth, and provoked cell lysis was not concomitant with any reassociation of GAPDH onto the cell surface. Hence, with the possibility of cw-GAPDH resulting from autolysis being unlikely, entrapment of intracellular GAPDH on the cell wall after a passive efflux through altered plasma membrane was investigated. Flow cytometry was used to assess L. plantarum 299v membrane permeabilization after labeling with propidium iodide (PI). By combining PI uptake and cw-GAPDH activity measurements, we demonstrate here that the increase in cw-GAPDH concentration from the early exponential phase to the late stationary phase is closely related to an increase in plasma membrane permeability during growth. Moreover, we observed that increases in both plasma membrane permeability and cw-GAPDH activity were delayed when glucose was added during L. plantarum 299v growth. Using a double labeling of L. plantarum 299v cells with anti-GAPDH antibodies and propidium iodide, we established unambiguously that cells with impaired membrane manifest five times more cw-GAPDH than unaltered cells. Our results show that plasma membrane permeability appears to be closely related to the efflux of GAPDH on the bacterial cell surface, offering new insight into the understanding of the cell wall location of this enzyme.
HoxB4, a homeodomain-containing transcription factor, is involved in the expansion of hematopoietic stem cells and progenitor cells in vivo and in vitro, and plays a key role in regulating the balance between hematopoietic stem cell renewal and cell differentiation. However, the biological activity of HoxB4 in other cells has not been reported. In this study, we investigated the effect of overexpressed HoxB4 on cell survival under various conditions that induce death, using the Ba/F3 cell line. Analysis of phenotypical characteristics showed that HoxB4 overexpression in Ba/F3 cells reduced cell size, death, and proliferation rate. Moreover, the progression from early to late apoptotic stages was inhibited in Ba/F3 cells subjected to HoxB4 overexpression under removal of interleukin-3-mediated signal, leading to the induction of cell cycle arrest at the G2/M phase and attenuated cell death by Fas protein stimulation in vitro. Furthermore, apoptotic cell death induced by doxorubicin-treated G2/M phase cell-cycle arrest also decreased with HoxB4 overexpression in Ba/F3 cells. From these data, we suggest that HoxB4 may play an important role in the regulation of pro-B cell survival under various apoptotic death environments.
Seven gtrains of Lactobacillus produce bacteriocin being active for Lacidophilus. All strains producing bacteriocin were found to be L. acidophilus except with one strain of L. gasseri. The maximum activity of bacteriocin produced by Lactobacillus strains was obtained at a middle or late stage of the log phase, or a early stage of the stationary phase. After the maximum was reached, however, the activity was rapidly decreased. The bacteriocins were inactivated easily by the treatment with proteolytic enzymes but not with nucleolytic enzymes, suggesting that the bacteriocin was proteinaceous. The bacteriocins were different from the other previously reported lactobacillus bacteriocin in their flexibility to the treatment at 10$0^{\circ}C$. Bacteriocins of L. acidophilus ATCC 9857 and 4357 decreased in activity by the treatment with diethylether, presumably the bacteriocin contained of a lipid component. It sums likely that L. acidophilus A4 bacteriocin adsorb to a regularly arrayed layer of the cell wall.
In this study, the Ni base superalloy was recycled by Argon oxygen decarburization(AOD) process using an inconel 713C scrap. During AOD process, argon gas was continuously injected 1,000 sccm and oxygen gas was injected into 10, 20 and 30 minutes of 100, 250 and 500 sccm.. In early stage of oxygen injection, the oxygen dose increased with increasing Al, Cr, and Mo content and decreasing C content. And Al content was decreased by carburization with added elements in late stage Because of oxidation was occurred with Al, Cr etc. after the reaction of carbon has been finished. From the results, the ratio of ${\gamma}^{\prime}$ phase reduced due to decreasing of Al content for that reason Al is the main element to form the ${\gamma}^{\prime}$ phase. Also carbide reduced owing to decreasing of C content so the mechanical properties of the specimens excessively injected by excess $O_2$ gas were decreased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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