The dpp gene originated from the silkworms is an important gene that is well conserved in the genome of humans, cattle, rodents, poultry and Drosophila. The dpp gene belonging to the TGF-beta (Transforming Growth Factor-beta) superfamily is known to play an important role in several developmental stages. The $TGF-{\beta}$ gene family is a genetically well-conserved and playing an important role gene family in various species such as determining cell proliferation and differentiation, apoptosis and cell fate. In this review, we have confirmed the following studies data. The recent studies on the silkworm dpp gene have confirmed for the first time the biological functions such as promoting osteogenesis activity. In addition, previous data shows that dpp have developmental functions such as morphogenetic materials at the blastophyllum stage, induction of the mesoblast at the late embryonic stage and involved in the proliferation and morphogenesis of imaginal disc in adult development. We found the splice variant of the dpp gene originated from the wildtype silkworm by using comparative genomics. It has provided important data for basic research based on genetics studies of these processes may promote a better understanding of evolution. Silkworm is a medicinal insect and is approved for its safety. It is used as a natural antibiotic for promoting growth as a medical material, a health functional food, and a feed additive. Therefore, it is necessary to present various data to obtain more value of functional insect.
International journal of advanced smart convergence
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제7권2호
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pp.101-111
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2018
Celiac disease (CD) is an immune-mediated enteropathy of small intestine diagnosed in both childhood and adulthood. CD is caused by gluten, which produces gliadorphin during its digestion. The enzyme dipeptidyl peptidase-4 (DPP4) breaks gliadorphin down nevertheless the last tripeptide remains and eventually inhibits DPP4, thus slowing down its process. Therefore, the idea is to produce an additional DPP4 enzyme which is crucial. Consequently, the functional DPP4 gene was cloned into pCDNA3 intermediate (FLAG+DPP4) vector and finally a recombinant plasmid pSB1C3 (Andersons promoters+FLAG+DPP4) was constructed using synthetic biology. Normally, a DPP4 inhibitor is used as a cure for diabetes. Another important concern was overexpression of DPP4, which might lead to diabetes, accordingly the work was also performed for the regulation of the DPP4 gene expression. In this regard, three types of Anderson promoters (strong, moderate and weak) were utilized to study the control overexpression. This is the first report of idealistic trial for control the exogenous DPP4 gene-expression by molecular biologic tools.
Dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4) 저해제는 부작용이 적어 제2형 당뇨병의 2차 용법으로 널리 사용되고 있다. 우리는 human DPP-4 (hDPP-4) 유전자를 돼지 zygote의 전핵에 주입한 후, 1 세포 단계의 수정란을 외과적 방법으로 이식하였고, 마지막으로 꼬리에서 hDPP-4 유전자가 발현되는 형질 전환 돼지를 생산하는데 성공했다. 이식한 3두의 임신돈에서 16두의 자돈이 생산되었고, 이들 가운데 1두의 수컷 자돈에서 형질전환 개체가 확인되었다. Western blot과 RT-PCR 분석을 통해 hDPP-4가 형질 전환 돼지의 막 세포에서 강하게 발현되고, hDPP-4 유전자가 다양한 조직과 꼬리에서 각각 발현되고 있음을 확인하였다. 이것은 발현 벡터가 형질 전환 돼지에서 정상적으로 발현된다는 것을 시사한다. 이번 연구 결과는 인슐린 저항성에 대한 내분비 기능을 확인하는 모델 동물로, hDPP-4 형질 전환 돼지가 인슐린 저항성에 대한 내분비 기능을 확인할 수 있는 새로운 신약에 대한 검증의 소재로서 가치를 높일 것으로 기대된다.
Kim, Se Young;Jung, Keuk Il;Kim, Sang Hee;Jeon, Sang-Hak
Molecules and Cells
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제26권6호
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pp.576-582
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2008
Nervous system development takes place after positional information has been established along the dorsal-ventral (D/V) axis. The initial subdivision provided by a gradient of nuclear dorsal protein is maintained by the zygotic genes expressed along the D/V axis. In this study, an investigation was conducted to determine the range of Dpp function in repressing the expression of eagle (eg) that is present in intermediate neuroblasts defective (ind) and muscle specific homeobox (msh) gene domain. eg is expressed in neuroblast (NB) 2-4, 3-3 and 6-4 of the msh domain, and NB7-3 of the ind domain at the embryonic stage 11. In decapentaplegic (dpp) loss-of-function mutant embryos, eg was ectopically expressed in the dorsal region, while in dpp gain-of-function mutants produced by sog or sca-GAL4/UAS-dpp, eg was repressed by Dpp. It is worthy of note that Dpp produced from sim;;dpp embryos showed that Dpp could function at long range. However, Dpp produced from en-GAL4/UAS-dpp or wg-GAL4/UAS-dpp primarily acted at short-range. This result demonstrated that this discrepancy seems to be due to the repression of Dpp to EGFR signaling in sim;;dpp embryos. Taken together, these results suggest that Dpp signaling works at short-range, but can function indirectly at long-range by way of repression of EGFR signaling during embryonic neurogenesis.
Park, Seung-Won;Goo, Tae-Won;Choi, Gwang-Ho;Kang, Seok-Woo;Kim, Sung-Wan;Kim, Seong-Ryul
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제27권1호
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pp.159-165
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2013
Bone morphogenetic proteins (BMPs) belong to the transforming growth factor (TGF-${\beta}$) superfamily and are involved in osteoblastic differentiation. The largest TGF-${\beta}$ superfamily subgroup shares genetic homology with human BMPs (hBMPs) and silkworm decapentaplegic (dpp). In addition, hBMPs are functionally interchangeable with Drosophila dpp. Bombyx mori dpp may induce bone formation in mammalian cells. To test this hypothesis, we synthesized the 1,285-base pairs cDNA of full-length B. mori dpp using total RNAs obtained from the fat body of 3-day-old of the $5^{th}$ instar larvae and cloned the cDNA into the pCEP4 mammalian expression vector. Next, B. mori dpp was expressed in C3H10T1/2 cells. The target cells transfected with the pCEP4-Bm dpp plasmid showed biological functions similar to those of osteogenic differentiation induction growth factors such as hBMPs. We determined the relative mRNA expression rates of Runt-related transcription factor 2 (RUNX2), osterix, osteocalcin, and alkaline phosphatase (ALP) to validate the osteoblast-specific differentiation effects of B. mori dpp by performing quantitative real-time RT-PCR. Interestingly, mRNA expression levels of the 3 marker genes except RUNX2, in cells expressing B. mori dpp were much higher than those in control cells and C3H10T1/2 cells transfected with pCEP4. These results suggested that B. mori dpp signaling regulates osterix expression during osteogenic differentiation via RUNX2-independent mechanisms.
상아질 형성부전증 제 II 형은 상아질 기질에 영향을 미치는 유전질환으로 dentin sialophosphoprotien(DSPP)의 돌연변이에 기인한다. DSPP 발현 산물 중 하나인 dentin phosphoprotein(DPP)은 Asp-Ser-Ser 서열이 반복되는 독특한 구조로, 상아질 석회화 성숙 과정에 관여한다. 본 연구는 DPP 영역을 포함한 DSPP 유전자 염기 서열 분석을 통하여 유전성 상아질 결함의 원인이 되는 돌연변이를 확인하고자 하였다. 임상적 및 방사선학적 검사와 DSPP 유전자 염기 서열 분석 및 DPP 영역의 allele-specific cloning을 시행하여 비교 분석한 결과, 2688번 염기인 티민의 결실(c.2688delT)이 확인 되었고, -1 bp frameshift 돌연변이를 야기하였다. 이는 친수성 아미노산을 소수성으로 치환시켜, DPP 특성의 변화 및 상호작용 능력 저하를 일으켜 상아질 형성부전증 제 II 형의 원인으로 작용하였다.
본 연구의 목적은 외래 EGFP 유전자를 분화이전의 웅성생식세포에 도입한 후 이를 난모세포내에 미세주입하여 형질전환동물을 생산하는 기술을 개발하는 데에 있다. 이를 위하여 반수체 정자세포에서 특이적으로 발현하는 생쥐의 mTP1과 햄스터의 hPrm2 유전자 발현 시기를 RT-PCR로 조사한 결과 그시기는 생쥐와 햄스터에서 각각 18일령과 20일령으로 확인되었다. 이에 따라 외래 유전자의 침입이 용이한 감수분열 직전단계인 17일령의 생쥐와 19일령의 햄스터 정자세포를 EGFP 유전자가 포함된 배양액에 부유시킨 다음, 전기자극을 부여한 결과 0.18 ㎸/cm의 전기자극을 가한 후 72시간 배양한 정자세포의 28.5%와 32.1%에서 EGFP 유전자가 발현되는 것으로 확인되었다. EGFP유전자가 도입된 반수체 정자의 수정 및 발달 능력을 검증하기 위하여, 이들 정자세포를 햄스터 난자 내에 미세주입 하였으나, 형광현미경하에서는 EGFP유전자의 발현은 관찰할 수 없었다. 이에 이들 난자를 공시하여 PCR분석을 실시한 결과, 약 44%의 수정란에서 EGFP 유전자의 존재가 확인되었다. 이러한 결과로 보아 반수체 정자세포는 외래 유전자를 난자 내에 도입하기 위한 운반체로 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
The somatic Sertoli cells play an essential role in testis determination and spermatogenesis by providing nutrition and structural support. In the current study, we report on the novel Ankrd7 gene that contains five ankyrin repeat domains. This gene was specifically expressed in Sertoli cells and was regulated in a maturation-dependent manner. Its expression was restricted to testicular tissue, and its mRNA could be detected in testes at as early as 14 dpp (days post partum) using RT-PCR analysis. In both testicular tissue sections and in vitro cultured Sertoli cells, the Ankrd7 protein was localized to the nucleus of the Sertoli cell. Immunohistochemistry and immunocytochemistry investigations showed that the protein was detectable in testicular tissues at 20 dpp, at which time Sertoli cells were gradually differentiating into their mature cellular form. These results suggest that Ankrd7 is probably involved in the process of Sertoli cell maturation and in spermatogenesis.
Odontogenic cells express many genes spatiotemporally through complex and intricate processes during tooth formation. Therefore, investigating them during the tooth development has been an important subject for the better understanding of tooth morphogenesis. The present study was performed to identify the genetic profiles which are involved in the morphological changes during the different stages of rat tooth development using the Agilent Rat Oligonucleotide Microarrays. Morphologically, the maxillary 3rd molar germ at 10 days post-partum (dpp) was at the cap/bell stage. In contrast, the maxillary 2nd molar germ showed the root development stage. After microarray analysis, there were a considerable number of up- or down-regulated genes in the 3rd and the 2nd molar germ cells during tooth morphogenesis. Several differentially expressed genes for nerve supply were further studied. Among them, neuroligin 1 (Nlgn 1) was gradually downregulated during tooth development both at the transcription and the translation level. Also, Nlgn 1 was mostly localized in the dental sac, which is an important component yielding the nerve supply. This genetic profiling study proposed that many genes may be implicated in the biological processes for the dental hard tissue formation and, furthermore, may allow the identification of the key genes involved in the nerve supply to the dental sac.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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