• 한국식품위생안전성학회지
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• 제28권3호
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• pp.252-257
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• 2013

표준 평판배지 정량검출법과 TEMPO STA를 이용한 황색포도상구균 정량 분석에 대한 상관성과 유의성을 평가하기 위해 복합조리식품에 황색포도상구균을 인위적으로 접종하여 결과값을 통계 처리하여 유의성을 조사한 결과 두 실험방법간에는 유의적 차이가 없었다(p < 0.05). 상관계수($r^2$)는 0.9672로 두 실험간에는 높은 연관성을 보였다. TEMPO STA를 466개의 시료에 적용한 결과 454개(97.4%)의 시료는 문제가 없었으나 이중 12개의 시료에서는 error가 발생하였다. 그러나 TEMPO법은 실험 단계 간편하고 사용이 쉬우며 신속한 결과를 얻을 수 있으며 자동화된 장비로 실험 과정에 의한 오류를 최소화 할 수 있는 장점이 있으며 표준시험법인 표준 평판 배지법과도 유의적인 차이가 없어 정확한 정량검출이 가능할 것으로 생각된다. 최근 식품의 안전성확보를 위해 검사 품목이 다양해지며 수도 증가하는 추세이기 때문에 황색포도상구균의 정량 검사가 정확하고 신속해야 할 필요가 있으므로 TEMPO STA법의 필요성은 앞으로 크게 늘어날 것으로 보인다.

• 미생물학회지
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• 제42권3호
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• pp.205-209
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• 2006

호소수내의 '살아있는 세균'을 측정하기 위하여 quantitative direct viable count (qDVC) 방법을 적용하였다. qDVC방법에 적용되는 최적 glycine 농도는 2%였으며, '살아있는 세균'을 계수하는데 있어서 평판계수법, CTC법 보다는 qDVC 방법이 보다 효과적이라는 것을 확인하였다. qDVC방법으로 '살아있는 세균'을 측정한 결과 다른 두 방법보다 $2.4{\sim}6.0$배 높은 값이었다. 또한 qDVC방법은 '살아있는 세균'을 죽은 세포 또는 휴면세포와 쉽게 구별할 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제18권8호
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• pp.1453-1458
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• 2008

For quantitative PCR assay of Salmonella enterica serovar Typhimurium in food samples, a real-time PCR method was developed, based on DNA genome equivalent. Specific primers and probe designed based on the STM4497 gene of S. Typhimurium LT2 showed the specificity to S. Typhimurium. Threshold cycle (Ct) values of real-time PCR were obtained from a quantitative standard curve with genomic DNA of Salmonella Typhimurium. In addition, the recovery of S. Typhimurium inoculated artificially to chicken samples with $4.5{\times}10^5$ to 4.5 CFU/ml was evaluated by using real-time PCR and plate-count methods. Result showed that the number of cells calculated from the real-time PCR method had good correlation with that of the plate-count method. This real-time PCR method could be applicable to the detection and quantification of S. Typhimurium in food samples.

• 미생물학회지
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• 제43권3호
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• pp.201-209
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• 2007

송이 자생군락 토양 내 세균군집의 정량적 평가를 수행한 결과 CFDA 형광염색법을 이용해 직접 계수된 생균수는 $7.4{\pm}1.19{\times}10^8{\sim}1.07{\pm}0.17{\times}10^9cells/g$ soil로 육즙영양배지(nutrient broth, NB)에서 배양된 생균수는 CFDA 계수치의 $5{\sim}8%$로 계수되었으며, $10^{-2}$으로 희석한 NB(DNB)배지에서는 $40{\sim}47%$의 계수치를 나타내었다. 이상의 결과로부터 송이 자생군락 토양내에는 배양이 곤란한 난배양성(viable but non-culturable; VBNC)세균이 다수 존재해 있는 것으로 추정되었다. 송이 자생군락 토양내 세균군집의 계통학적 특성을 검토하기 위해 토양으로부터 직접 DNA를 추출하고 16S rDNA-ARDRA cluster 분석을 통하여 대표 clone의 16S rDNA 염기서열 분석을 수행하였다. 송이 자생군락 토양으로부터 구축된 총 115 clone은 31 ARDRA cluster로 분류되었으며, ${\alpha}-,\;{\beta}-,\;{\gamma}-$ Proteobacteria, Acidobacteria, Actinobacteria 그리고 Firmicutes의 6개 계통군이 확인되었다. 이들 계통군 중 약 85%가 Acidobacteria 계통군에 속하여 압도적인 우점군임이 확인되어 매우 독특한 계통학적 특성을 나타내었다.

• 미생물학회지
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• 제39권3호
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• pp.181-186
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• 2003

형광현미경을 이용한 기존의 직접생균수측정(DVC)법을 변형하여 산림토양의 각 층위에 분포하는 난배양성 토양세균의 정량적 평가를 시도하였다. 기존의 방법에서 사용된 DNA합성저해제(nalidixic acid; 100${\mu}g$/ml, pipemidic acid; 50 ${\mu}g$/ml, piromidic acid; 50 ${\mu}g$/ml)보다 5배 높은 농도를 사용한 결과 토양세균 군집의 세포분열이 배양24시간까지 분히 억제되어 기존의 DVC법보다 10배 이상 높은 계수치를 얻었다. 토양시료를 제균수로 원심 세척한 경우 DVC는 전균수(TDC)의 약 I% 미만을 나타내어 첨가된 기질의 이용능을 정확히 판정할 수 있었다. 형광현미경을 이용하여 DVC법에 의해 검출된 생균수는 전균수의 18-44%를 나타내었고, 평판법(PC)에 의해 계수된 생균수는 전균수의 1% 미만을 나타내어 DVC법이 평판법에 비해 100-2000배 이상 높은 계수치를 나타내었다. 이는 평판법으로는 배양할 수 없는 난배양성(VBNC)세균이 토양 내에 다수 존재해 있음으로 판단되었고, DVC법에 의해 난배양성 토양세균을 정량적으로 검출할 수 있는 가능성이 확인되었다. 영양기질로써 통상농도의 NB배지와 NB를 $10^{-2}$로 희석한 DNB배지를 사용하여 DVC법과 평판법에 의한 계수 결과를 비교한 결과 모든 시료에서 DNB배지에서의 생균수는 NB배지보다 5～10배 이상 높은 값을 나타내어 산림토양의 각 층위에 저영양세균(oligotrophic bacteria)이 다수 분포해 있음으로 추정되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제41권5호
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• pp.515-521
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• 2009

시판 라면분말수프(RS-1, RS-2)의 사전 위생화 처리여부를 알아보기 위하여 DEFT(direct epifluorescent filter technique)/APC (aerobic plate count) 측정을 실시한 결과, 사전 살균처리가 이루어진 제품임을 확인하였다. 시료의 초기 존재했던 균수인 log DEFT는 RS-1 6.46, RS-2 7.05를 보이면서 조사선량에 따라 거의 변화가 없었으나 총 생균수인 log APC는 RS-1 2.74와 RS-2 1.95를 보이면서 조사선량의 증가에 따라 감소하였으며 이로써 log DEFT/APC 값은 점차 증가하는 경향이었다. 또한 사전 살균여부가 알려지지 않을 경우 방사선에 의해 위생화 처리될 수 있음을 감안, 5 및 10 kGy의 감마선 조사에 따른 미생물학적, 이화학적 품질을 실온($10{\pm}3^{\circ}C$)에서 6개월 저장 중 평가하였다. DEFT count는 조사선량에 무관하게 일정한 범위의 값을 보여주었으나 생균수(APC)는 조사선량에 따라 유의적으로 감소하였다. 본 시료에서는 대장균군과 효모 및 곰팡이는 검출되지 않았으며, 초기 호기성 세균은 5 kGy 이상에서 사멸되었고 실온 저장 6개월 동안 뚜렷한 생육이 없었다. 라면수프 RS-1은 조사선량에 따라 pH가 감소하였고(p<0.01) 저장 중에는 증가하는 경향을 보였다(p<0.01). 조사선량의 증가로 라면수프의 VBN 함량은 감소하는 경향을, TBA가는 증가하는 경향을 보였으며, VBN 함량과 기계적 색도는 10 kGy까지의 감마선 조사에는 비교적 안정적이었으나 저장 조건의 영향을 더 크게 받는 것으로 나타났다.

• 미생물학회지
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• 제44권1호
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• pp.43-48
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• 2008

정도관리는 분석 결과의 신뢰성을 높이기 위해 필수적인 과정이며, 이를 위해서는 일정한 농도의 표준시료가 필요하다. 본 연구에서는 정도관리의 정략분석을 위해 실온에서도 일정시간 개체수가 유지되는 미생물 정도관리용 표준시료를 제작하였다. 대장균으로 조제한 미생물 시료에 세포 분열을 억제하기 위해 nalidixic acid ($100\;{\mu}g/ml$)와 cephalexin ($50\;{\mu}g/ml$)을 첨가하였다. 이후 12시간 간격으로 acridine orange로 염색 후 현미경으로 계수하는 방법과 한천 배지에 배양하여 집락을 계수하는 평판집락계수법으로 개체수 변화를 측정하였다. 현미경 계수 결과 초기간이 $3.7{\times}10^5\;cells/ml$이었을 때 대장균의 개체수는 48시간 동안 $3.5{\sim}4.2{\times}10^5\;cells/ml$의 범위를 보였고, 평판집락법 결과 초기값이 $1.2{\times}10^4\;CFU/ml$ 이었을 경우에는 $1.0{\sim}1.2{\times}10^4\;CFU/ml$로 조사되어 냉장 및 냉동의 필요 없이 실온에서도 48시간 동안 개체수가 비교적 안정적으로 유지되는 미생물 표준시료를 제작할 수 있었다. 따라서 본 연구에서 제작된 표준시료는 현재 상업적으로 판매되고 있는 표준균주 제품과 함께 정도관리의 정략분석을 위해 사용될 수 있을 것이다.

• 한국환경보건학회지
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• 제39권1호
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• pp.71-82
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• 2013

Objectives: This study was performed in order to investigate hand hygiene practices among food-service businesses employees based on the awareness of hand-washing and load of indicator bacteria on their hands. It focused on the comparison of full-time and part-time workers in food-service workplaces. Methods: A direct-interview questionnaire survey and microbiological analysis were carried out with sixty workers each. Samples for microbiological analysis were collected through a modified glove-juice method from the hands of the food-service workers and were analyzed for aerobic plate count, total coliform, fecal coliform, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Salmonella spp. Microbiological analysis was done according to the Food Code of Korea. Results: Significant differences (p<0.01) were found in the survey between the full-time and part-time workers in hand-washing frequency, use of hand-washing agents, and hand-drying methods. More full-time workers responded to washing their hands after preparing food, after visiting outside, after handling raw materials, and before putting on gloves/when changing gloves than did part-time workers (p<0.05). No remarkable difference was found in bacterial load on the hands except in the aerobic plate count between the two groups. The detection of E. coli, S. aureus, and Salmonella spp. on the hands of some food-service workers in both groups revealed poor hand hygiene practices. Conclusions: The results of this study indicate that there is a need for training programs in order to improve hand hygiene practices and strict hand hygiene compliance by food-service workers.

• 한국환경보건학회지
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• 제36권2호
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• pp.95-107
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• 2010

Hand-washing is one of the major factors in personal hygiene and public health. This study was undertaken to investigate the hygienic behavior of food-service employees, focusing on awareness of hand washing, hand washing practices, and the load of index microorganisms (aerobic plate count, total and fecal coliforms, Escherichia coli, and Staphylococcus aureus) on the hands of food-service employees. A questionnaire survey completed by direct interview, direct observation of restrooms by the researcher and trained observers, and microbiological examination according to the Food Code of Korea were carried out. In the survey, a positive attitude toward hand washing compliance was reported; however, improper hand washing and poor hand hygiene of the food-service employees were seen under direct observation. Significant differences (p<0.05) were found between the questionnaire survey and the direct observations in hand washing compliance after using the toilet, duration of hand washing, use of hand washing agents, use of hand washing tools, washing of different parts of the hands, hand-drying method, temperature of water, and method of turning off the water. Samples taken from employees' hands before washing showed higher levels of bacteria than those taken during work and/or after washing (p<0.05). Poor hand washing practices were indicated by the positive results for total and fecal coliforms, E. coli, and S. aureus on the hands of some food-service employees. This study showed that there is a marked difference between the food-service employees' awareness of hand-washing and their actual hand-washing practices. The poor hand hygiene of and improper hand washing by the food-service employees should be addressed for improved food safety.

• 한국식품위생안전성학회:학술대회논문집
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• 한국식품위생안전성학회 1996년도 제11회 학술대회 및 정기총회 - 식품의 위생 안전성에 관한 최근 연구 동향
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• pp.33-33
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• 1996

Interests in the field of rapid methods and automation in microbiology have been growing steadily on an international scale in recent years. International meetings concerned this problem have been held in elsewhere in the world countries since the past twenty years. But, unfortunately in the field of microbial examination in food hygiene, this problem have not yet been developed so much as in the field of clinical microbiology. Today, I would like to introduce you here present aspects of rapid and automation technologies, those which are manly carrying in milk and meats industries. My illustration will be given recent improved technologies using automatic apparatus and instruments along with process of microbial count procedure. Recent direct microbiological counting system (ChemeScan \ulcorner) as real time ultrasensitive analysis created by Cheminex Ltd., France is now most evolutional instrument to provide direct microbial counts, down to one cell, within 30 minutes. The results from these evaluations how a good correlation between the ChemScan system and the standard plate count method. This system will be successful application for not only in the field of pharmacology but also food microbiology. In addition, current identification of microbes by sophisticated instruments suitable for food microbiology, one of which Biology is manual system (BIOLOG\ulcorner), provides reference-level capability at a modes price. For the manual system, the color reactions in the microplate are read by eye and manually keyed into personal computer. Species identification appears on the computer screen within seconds, along with biotype patterns, a list of closely related species, and other useful statistics. In present this is useful application for microbial ecology and epidemiological survey. RiboPrinter system newly produced by DuPont is now focusing among microbiologists in the world, and is one of the biggest microbial characterization system using a DNA-based approach. The technology analyzer is bacterial culture for its genetic fingerprint or riboprint pattern. Finally Bio-cellTracer system for automatic measurement of fungal growth and Fukitori-Maseter, a Surface Hygiene Monitoring Kit by using swabe procedure in food processing environment are briefly illustrated in this presentation.